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南瓜RAPD分析体系的优化* 总被引:5,自引:0,他引:5
为确保南瓜RAPD反应结果的稳定性和重复性,对MgCl2浓度、dNTPs浓度、Taq酶含量、引物浓度、模板DNA浓度、复性温度、PCR循环次数等影响南瓜RAPD结果的重要因素进行了初步研究。最终优化的南瓜 RAPD反应体系为25 μL反应液中:10×反应 buffer(100 mmol/L Tris-HCl,100 mmol/L KCl, 80 mmol/L (NH4)2SO4 ,pH 9.0,NP-40)2.5 μL, 3 mmol/L MgCl2,0.2 mmol/L dNTPs,Taq酶l.0 U,引物15 ng/μL ,DNA模板10 ng/μL 。本研究最终确立的PCR反应程序为: 94 ℃预变性5 min,然后按94 ℃变性30 s,37 ℃退火30 s,72 ℃延伸90 s,进行40个循环,最后72 ℃延伸5 min。在此条件下得到的RAPD图谱可为南瓜遗传多样性、分子标记及辅助育种等研究提供有效的手段。 相似文献
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分子生物技术在马铃薯抗病毒育种中的应用赵福宽,张鹤龄,郑用琏,刘纪麟马铃薯病毒病害每年都给世界马铃薯生产造成巨大损失,严重阻碍了马铃薯生产的发展,解决这一问题的根本途径是培育高度抗病毒的优良品种。近年来应用分子生物技术进行马铃薯抗病毒的研究在国内外都... 相似文献
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NAC转录因子是特异存在于植物中具有多种生物功能的新型转录因子,其家族成员N端含有保守氨基酸序列,C端为高度变异的转录激活区。本项研究以南瓜叶片为材料,根据甘蓝型油菜NAC1、番茄NAC、辣椒NAC保守结构域设计一对简并引物,采用RT-PCR方法扩增得出长度约为440 bp大小的DNA片段,将其克隆至pMDl9-T载体上,而后对重组克隆进行测序,用BLAST和DNAMAN软件对核酸及氨基酸序列进行分析,结果表明所获得的南瓜NAC基因片段由442个碱基组成,编码147个氨基酸,命名为CmNAC。该基因片段具有其他植物NAC基因中存在的保守区,并且属于NAC家族中ATAF1/2亚家族。 相似文献
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植物反转录转座子具有存在广泛和多态性丰富的特点,可用于植物基因组研究。本文对植物反转录转座子的结构与功能、反转录转座子分子标记的主要种类及其在农作物遗传改良中的应用进行了综述。 相似文献
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番茄WRKY转录因子基因片段的克隆及序列分析 总被引:1,自引:1,他引:0
【研究目的】本研究以番茄苗为实验材料,克隆出番茄WRKY转录因子的一个基因片段并对其核酸序列进行分析。【方法】根据本课题组已经克隆出的番茄特异的WRKY基因片段和番茄EST序列设计特异引物,利用RT-PCR技术获得番茄WRKY转录因子的一个基因片段并连接到pMD19-T载体中,转化DH5α,,筛选阳性克隆,用双酶切分析法对其进行鉴定并进一步对核酸序列进行测序分析。【结果】结果表明,克隆获得的WRKY转录因子基因片段约为680bp,用GenBank中的Blastn程序分析表明,其与CaWRKY(AY789641.1)、WIZZ(wizz mRNA)(AB028022.1)的相似性分别为86%和84%。【结论】WRKY转录因子在番茄中受JA诱导,这为克隆番茄WRKY基因全长,进而为番茄抗病育种奠定基础。 相似文献
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蔬菜生产过程产生的废弃物不仅污染生态环境,还造成了资源的浪费。沼气技术的应用在获得优质廉价的生物质能源的同时还能够减轻环境污染。为探索蔬菜废弃物有效利用的新途径,以蔬菜废弃物(甘蓝叶)为材料制作沼气发酵液,研究不同浓度的甘蓝叶发酵液灌根对番茄产量及品质性状的影响。结果表明对番茄灌溉甘蓝叶发酵液可以显著增加番茄产量,提高果实中维生素C含量。处理G5(发酵液的比例为80%)比对照增产64.25%,处理G3(发酵液的比例为40%)的维生素C含量比对照提高了37.60%。 相似文献