猪传染性胸膜肺炎放线杆菌PCR诊断方法的建立与应用

根据GenBank登录的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)血清1~14型的表面抗原蛋白D15和16S rRNA基因序列,设计2对特异性引物,分别扩增出637、431 bp两条核苷酸片段,建立了APP的多重PCR检测方法。特异性结果表明,血清1、3、5a、8、10型能扩增出两条与预期大小的片段,而扩增的大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、链球菌、葡萄球菌均成阴性。敏感性试验结果表明,最低检出浓度为50/μL。对临床分离的5株疑似APP菌株进行PCR,结果表明,其中4株为阳性,1株为阴性。提示,该方法的特异性和敏感性均良好。     

番茄红素对赭曲霉毒素A诱导犬肾小管上皮细胞毒性损伤的缓解作用

[目的]本试验以犬肾小管上皮细胞(Madin-Daby canine kidney cell,MDCK)为模型,研究赭曲霉毒素A(OTA)对MDCK的毒性作用以及番茄红素(lycopene,LYC)对细胞损伤的缓解效应.[方法]将对数生长期MDCK,随机分为对照组(无添加)、OTA组(15μmol·L-1 OTA)、L...     

陕西省小麦禾谷孢囊线虫rDNA-ITS区序列与RFLP分析

 采用线虫通用引物TW81和AB28对采自陕西的20个小麦禾谷孢囊线虫群体的rDNA-ITS区进行PCR扩增、克隆和测序。利用Mega软件的UPGMA方法分析了陕西省小麦禾谷孢囊线虫群体及其与GenBank公布的近缘种的系统发育关系,结果表明陕西省小麦孢囊线虫群体的rDNA-ITS区片段的长度为1 045 bp,且均为禾谷孢囊线虫（Heterodera avenae）,ITS区序列同源性为99.56%,只有3处碱基存在差异。其ITS区同中国河南（EU106175）、北京（AY148382）、山东（HM370427）的禾谷孢囊线虫H. avenae,澳大利亚的H. australis（AY148395）及俄罗斯的H. pratensis（AY148351）的亲缘关系最为接近。利用8种限制性内切酶Ava Ⅰ（Eco88 Ⅰ）、Alu Ⅰ、Hha Ⅰ（Cfo Ⅰ）、Hae Ⅲ（BsuR Ⅰ）、Hind Ⅲ、Hinf Ⅰ、Rsa Ⅰ和Mva Ⅰ（Bst N1）对20个陕西省CCN群体的ITS区PCR扩增产物进行限制性内切酶谱（RFLP）分析,结果表明8种限制性内切酶酶切ITS-PCR产物后共产生22个酶切片段,20个种群的PCR-RFLP谱型一致,表明陕西省小麦禾谷孢囊线虫是同一个群体且与已报道的中国CCN群体的“C”型一致,有别于欧洲的“A”型群体和印度的“B”型群体。这是首次报道陕西省小麦禾谷孢囊线虫种群的分子特征。     

防治甜瓜灰霉病的药剂筛选试验研究

甜瓜灰霉病是由灰葡萄孢菌引起的真菌病害,是危害保护地蔬菜、瓜果的主要病害,能侵染叶、花、茎和果实,病害一旦发生,就会大面积减产,严重时甚至绝收。该病除生长期发生外,还会引起果蔬采后腐烂、变质,由于病原菌在采收前已侵染,采收后在储藏和运输过程中条件适宜就会引起发病,造成严重腐烂,导致不能储藏和长途运输。     

温度对不同虫态异色瓢虫捕食桃蚜功能反应的影响

为明确温度对异色瓢虫(Harmonia axyridis)各虫态捕食桃蚜(Myzus persicae)能力的影响,设定18、23、28、33℃四个温度处理,测定不同虫态(龄)异色瓢虫(1—4龄幼虫和成虫)在不同猎物密度条件下对桃蚜的捕食量,并分析其捕食功能反应和寻找效应。结果显示:不同温度下各虫态异色瓢虫对桃蚜的捕食功能反应属于HollingⅡ型。在18—33℃条件下,随着温度的升高,各虫态异色瓢虫对桃蚜的捕食量逐渐增加。在33℃条件下,异色瓢虫的捕食能力(a∕Th)最强,理论最大捕食量(1∕Th)最高。同一温度下,异色瓢虫对桃蚜的捕食能力、理论最大捕食量均表现为4龄幼虫>成虫> 3龄幼虫> 2龄幼虫> 1龄幼虫。4龄异色瓢虫幼虫在4个温度处理下对桃蚜的理论最大捕食量(1∕Th)分别为90.909、 200.000、 333.333、 500.000头。各虫态异色瓢虫对猎物的寻找效应均随温度的升高而增加,随猎物密度的增加而降低。综上,在一定温度范围内,各虫态异色瓢虫对桃蚜的捕食能力、日最大捕食量和寻找效应均随温度的升高而增加。     

河南尉氏西甜瓜新品种田间表现调查

为加快河南省尉氏县西甜瓜新品种的引进、示范和推广,选择了7个西甜瓜品种进行大田种植试验,调查并比较各品种的生育期、果实外观与品质、抗病性等。评价各品种的田间表现,认为西瓜品种美都、甜瓜品种经典花冠综合性状较好。     

水田小麦生产中存在的问题与对策

分析了湖北省枣阳市水田小麦生产中存在的问题,并提出了相应的对策,以期为当地水田小麦生产提供参考。     

不同水稻品种发芽期的耐盐性研究

为研究不同水稻品种于发芽期的耐盐性,以种子发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数为指标,研究了NaCl对21个水稻品种的种子发芽的影响。结果表明,随NaCl胁迫浓度的增大,各品种种子萌发都受到不同程度的抑制;低胁迫在一定程度下能够促进种子发芽,甚至能促进幼苗的生长;高胁迫对种子发芽具有较大抑制作用。在供试的21个水稻品种中,以“秀水114”．“申优繁15”、“秋优金丰”、“南粳46”、“申优693”等品种耐盐性最好,“秀水321”耐盐性最差。     

条锈菌诱导的小麦TaOZR的克隆及特征分析

【目的】克隆受条锈菌诱导的小麦OZR,研究其在小麦抗条锈病防御反应及非生物胁迫过程中的作用。【方法】通过电子克隆及RT-PCR方法,从条锈菌侵染的小麦水源11中分离出1个编码OZR的cDNA序列。利用生物信息学对cDNA序列及其编码的蛋白序列进行分析;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析该基因在小麦与条锈菌互作、外源激素处理以及非生物胁迫下的诱导表达情况。【结果】获得小麦OZR,命名为TaOZR。其ORF长240 bp,编码79个氨基酸;蛋白序列理论分子量8.67 kD,等电点9.34;具有信号肽和跨膜区,可能为分泌蛋白;与水稻OZR相似性达76%;TaOZR受条锈菌诱导后在亲和互作中差异不显著,在非亲和互作中诱导表达;外源植物激素水杨酸、乙烯、脱落酸、茉莉酸均诱导TaOZR的积累并上调表达;低温、干旱、高盐非生物胁迫下TaOZR表达差异不显著。【结论】首次克隆到一个条锈菌诱导的小麦TaOZR,TaOZR可能通过水杨酸、乙烯、脱落酸和茉莉酸信号途径协同参与小麦对条锈菌的早期防御。     

甜瓜枯萎病菌的生物学特性及防治药剂的室内筛选

研究了甜瓜枯萎病菌的生物学特性,并对防治药剂进行了室内初步筛选。结果表明：菌丝生长的适宜温度范围为5～35℃,最适温度30℃,菌丝和孢子的致死温度为58℃;光暗交替条件下产孢量最大。生理生化特性测定结果表明：甜瓜枯萎病菌对孔雀石绿不敏感,对淀粉和硝态氮的利用能力强。采用生长速率法测定了9种杀菌剂对病菌的抑制作用,其中多菌灵和氟硅唑的毒力较高,EC30分别为2．2671mg／L和13．3418mg／L。