臭氧--绿色食品蔬菜防病新技术

臭氧又称富氧、超氧、三原子氧,是氧气(O2)的同素异构体,分子式为O3 ,因具类似雷电后的臭味而得名。臭氧是常用氧化剂中氧化能力最强的一种,其消毒杀菌能力是氯的2倍多,杀菌速度是氯的300～600倍、是紫外线的3 000倍,且无死角,反应后还原为氧气,被鉴定为高效、无二次污染的洁净氧化剂。一、作用机理臭氧是一种强氧化剂,氧化能力仅次于氟(F2),杀菌效果与氧乙酸相当,强于甲醛,比氯高1倍多。臭氧的杀菌消毒功能与一般杀菌剂不同,一般杀菌剂是起进行性、积累性的杀菌作用,而臭氧的杀菌作用是急速的,当其浓度超过一定阈值后,消毒杀菌作用甚至可…     

多胺与脱落酸对辣椒子叶再生的影响

 以‘中椒5 号’甜椒和‘湘研10 号’辣椒为试材, 探讨了Spm (精胺) 、Spd (亚精胺) 和ABA(脱落酸) 的不同浓度与不同添加时期对子叶再生的影响。结果表明: 在不定芽分化期和伸长期添加100μmol·L^-1的精胺能显著提高中椒5 号和湘研10 号不定芽的伸长率, 分别较对照提高78%和73%; 在不定芽分化期添加0.3 mg·L^-1的ABA 能促进不定芽分化, 两品种分别较对照提高52.8 %和71.6 %。     

辣椒子叶高效植株再生体系的建立

 以双丰等17 个辣椒品种为试材, 探讨了不同基因型、激素组合、有机成分及AgNO3 等因素对子叶再生的影响。观察到DJ 添加物(辣椒幼苗茎叶提取汁液∶卡那霉素= 500∶1) 对不定芽的分化及伸长有明显的促进作用, 比对照分别提高10. 0 %～11. 1 %和90. 5 %～133. 3 %。筛选出高效芽分化培养基为MB+ IAA 1. 0 mg/L + 62BA 5. 0 mg/L + DJ 5 000. 0 mg/L + AgNO3 10. 0 mg/L , 17 个品种平均芽分化率达92. 3 %;高效芽伸长培养基为MB + IAA 1. 0 mg/L + 62BA 5. 0 mg/L + DJ 5 000. 0 mg/ L + AgNO3 10. 0 mg/ L + GA3 2. 0 mg/ L , 17 个品种平均芽伸长率达57. 8 %; 高效生根诱导培养基为MS + IAA 0. 2 mg/ L + NAA 0. 1 mg/ L ,生根率达90 % , 建立了辣椒子叶高效植株再生体系。     

部分蔬菜CMV分离物CP基因的克隆及序列分析

 对来自国内不同地区、不同蔬菜作物上的8个黄瓜花叶病毒分离物, 采用一步法RT-PCR扩增得到CP基因全长片段, 分别克隆到pMD-18T载体并测序。结果表明, 本研究8个分离物的CP基因均为657个碱基, 可编码218个氨基酸, 它们之间的核苷酸序列同源性较高, 达92.8% ～99.1%; 将它们与GenBank中部分CMV CP基因序列比较, 显示出与CMV亚组Ⅰ株系的核苷酸序列同源性达90.7%～98.0%, 而与亚组Ⅱ株系的核苷酸序列同源性仅有75.8%～78.1%。因此, 这8个分离物应归属于CMV亚组Ⅰ。     

重组黄瓜花叶病毒2b基因PVX侵染性载体的稳定性分析

 本研究利用北京甘蓝CMV分离物(CMV-BG)全长2b基因,构建了含其正义和反义序列的PVX侵染性载体pVX2bS和pVX2bAS,并进行了它们与PVX侵染性载体间的共侵染稳定性实验。结果表明:pVX2bS和pVX2bAS能侵染本氏烟、SR1、Sam sun NN烟草、Shepody马铃薯和中蔬5号番茄,与pSfinx相比,表现不同程度的症状延迟效应;pVX2bS和pVX2bAS在22℃/16℃(昼/夜温度)条件下,接种SR1烟草45d仍可检测到重组载体的存在;pVX2bS和pVX2bAS菌液混合接种15d后只能检测到正义或反义一种载体的随机表达,二者交互接种,后接种的一方不能表达。     

松材线虫Hsp70基因的克隆与原核表达

 热激蛋白70(Hsp70)是已知热休克蛋白家族中最重要的-种, 它在细胞内的大量表达可以明显改善细胞的生存能力, 提高对环境胁迫或伤害的耐受性。采用RACE-PCR技术, 从松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)中克隆了Hsp70基因的全长cDNA序列(共2 061 bp)(GenBank登录号为:DQ785812)。其编码-个分子量为70 kD的642个氨基酸的蛋白序列, 含有3段Hsp70家族的签名序列。同源性分析表明, 氨基酸序列与其它真核生物的Hsp70序列具有很高的相似性, 并与秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)热激蛋白70家族中的hsp-1基因编码的氨基酸序列更为相似。因此, 将克隆的松材线虫Hsp70基因命名为Bx-hsp-1。构建了-个原核表达载体Bx70pEASY-E1, 当IPTG终浓度为0.4~0.8 mmol/L时, 能诱导表达融合蛋白。Bx-hsp-1基因的克隆和表达, 将为松材线虫的生态适应性机理研究奠定基础。     

基于本体的蔬菜农药安全使用专家系统

为实现蔬菜生产过程中有害生物的有效防治与农药的合理使用,设计了B/S结构的远程农药安全合理使用专家系统.该系统具有有害生物查询、识别诊断、防治方法决策、农药安全合理使用决策、知识库管理、专家交流等功能模块,采用了本体技术对专家知识进行建模,能够实现高效智能推理和知识的共享与重用;建立了多因素的农药评价模型,综合考虑农药使用的各种因素,为蔬菜有害生物防治推荐科学的农药品种和安全合理的使用技术;应用表明该系统具有成本低廉、扩展性强、实用性好、用户友好等优点.     

湘研辣椒品种抗疫病筛选及抗性机制研究

采用菌悬浮液接种,对湘研系列的１５份辣椒材料进行抗疫筛选,对其中抗感病水平不同的６份材料进行了抗性机制的研究。结果发现,湘研２号、５号、８号、９号、１９号和８５０１抗病性较同情指数低于４０,湘研七号、５９０５抗病性较差。     

应用cDNA-AFLP技术分离应答BABA诱导的番茄抗病相关基因

应用cDNA-AFLP技术研究番茄根部组织应答BABA(β-Aminobutyric Acid,β-氨基丁酸)诱导后基因转录谱,得到与植物获得性抗性相关的差异表达片段29条,克隆测序后获得10个上调基因片断.经过生物信息学分析和功能预测,其同源基因都是植物体在抗病、抗逆反应中的表达序列标签.根据功能可将其分为5类:第1类是防御反应基因,为病程相关蛋白基因P69家族成员,具有蛋白水解酶功能;第2类是转运蛋白基因,负责细胞内外离子、水和小分子物质的跨膜运输;第3类是信号传导蛋白,是Ca2 信号传导途径上重要的功能蛋白;第4类是分子伴侣蛋白BIF1,协助蛋白质的复性;第5类属功能未知基因.研究表明:BABA诱导植物根部抗病机制涉及植物多方面生理生化反应,由多个功能不同基因共同参与控制.差异表达片段的获得将有助于下一步全长抗病基因的克隆和BABA诱导植物抗性机制的研究.     

相似穿孔线虫S型半胱氨酸蛋白酶基因克隆与序列分析

根据不同种类线虫编码半胱氨酸蛋白酶的保守序列及植物寄生性线虫的半胱氨酸蛋白酶氨基酸密码子的偏好设计简并引物,通过RACE技术,首次从相似穿孔线虫(Radopholus similis)中克隆得到一个编码S型半胱氨酸蛋白酶基因的cDNA全长,命名为Rs-CPS(GenBank登录号EU659125)。Rs-CPS基因全长为1112bp,编码314个氨基酸,分子量为34.69ku。分析结果显示:Rs-CPS氨基酸序列具有半胱氨酸蛋白酶家族典型的Cys-His-Asn三联体酶催化活性中心,而且N端有1个17个氨基酸残基组成的信号肽。