一种简便的果树夏秋梢硅胶干燥叶DNA提取方法

以硅胶干燥的杨梅秋梢叶片为试材,对基因组DNA提取方法进行了研究。通过对涡旋、16℃离心、预磨样等方面的改进,提取的杨梅DNA含蛋白质、RNA、多糖等杂质较少,A260/A280在1.72~1.92之间,完全能满足酶切、PCR等试验的要求。同时对梅、枇杷、桃、樱桃、杏等果树较老的叶片、秋梢、鲜叶等样品进行了通用性检验,同样高效快速地获得了高质量的DNA。     

红皮梨新品种‘丹霞红’

‘丹霞红’是中国农业科学院郑州果树研究所以‘中梨1号’为母本,‘红香酥’为父本,人工杂交选育而成的红皮梨新品种。果个大,平均单果质量260 g,果实近圆形,果皮底色绿色,阳面着橘红色,外观漂亮,肉质脆而多汁,果肉质地极细,风味甘甜,有微香,可溶性固形物含量13.5%,在河南郑州地区8月中下旬果实成熟,果实发育期130～140 d,营养生长期210 d。果实耐贮藏,不耐磕碰。盛果期果实产量45 000 kg·hm^-2。     

根癌农杆菌介导AFL2基因转化苹果实生苗的研究

将苹果杂交种(长富2号×新红星)种子用50mg/LGA3液打破休眠,经消毒处理后接种在MS培养基上,获得无菌组培苗。以该组培苗叶片为试材,通过不同激素组合,获得适宜于植株再生的培养基为MS+NAA0.4mg/L+TDZ2.0mg/L。通过不同质量浓度的Kan筛选,证明15mg/L是Kan最佳的选择。利用含AFL2基因的根癌农杆菌LBA4404转化苹果叶片,得到转AFL2基因的阳性植株,经PCR检测,有2株出现特异性条带,证明该基因已经整合到苹果基因组中。     

利用改进的SAM法分离小黄李中的微卫星

对选择性扩增微卫星法进行了改进,应用于分离中国李中的微卫星,共分离出17个中国李特异微卫星位点,相应设计了17条引物,并分别与对应的5′锚定简并微卫星引物配对应用于5个中国李品种的基因组PCR扩增。结果表明：除PCA 04、PCA 07、PCA 11 3条引物没有扩增产物外,其余14条引物在5个受试中国李品种中均有扩增产物。     

早熟杏新品种——早红蜜的选育

早红蜜是从杏树的实生后代中选育出的新品种。果实近圆形,缝合线较深,两半部对称。果皮黄白色,平均单果质量68.5 g,最大125 g,果肉黄白色,肉质细腻。可食率达97.3%,汁液多,香气浓,含可溶性固形物15.3%以上。5月中旬成熟,成熟期比金太阳杏早5～7d。果实在室温下可贮藏5～7d。抗寒、抗病。     

两个具有发展前景的早熟梨新品种

正梨是我国主要水果之一,其栽培面积和产量仅次于苹果和柑橘。梨果素有"百果之宗"的美誉,肉质脆嫩、汁多味甜,含有多种营养成分,一向深受消费者的喜爱。梨果具有一定的医用价值,有帮助消化、清热化痰、润肺止咳、生津除烦、滋阴润燥、降低血压、清心泻火等功效。梨树传统的栽培品种以中晚熟品种为主,如砀山酥梨、河北鸭梨、雪花梨、京白梨、南国梨、库尔勒香梨和苍溪雪     

梨遗传连锁图谱的构建与比较分析

【目的】利用已公开发表的梨和苹果的SSR（Simple Sequence Repeat）引物以及从梨转录组开发的SSR引物构建本研究作图群体的遗传连锁图谱,为后期梨重要性状QTL定位和分子标记辅助选择等奠定基础。【方法】以西洋梨品种‘红茄’（Red Clapp Favorite）为母本,东方梨品种‘晚秀’（Mansoo）为父本,构建F1代作图群体。将所选用的SSR引物在亲本和4个子代个体进行PCR扩增,初步筛选出扩增结果符合JoinMap 4.0软件中“CP”作图模式要求的引物,随后在F1群体中检测,选用JoinMap 4.0软件对分离数据进行连锁分析,分别构建亲本的连锁图谱。以双亲图谱在各连锁群上的同源标记作为锚定位点,对双亲图谱进行整合。【结果】利用PCR技术对不同来源的共909对SSR引物（526对梨和283对苹果公开发表的SSR引物,从梨转录组开发的100对SSR引物）进行初步筛选后,发现来自苹果的SSR引物有效扩增片段的比例和多态性均较低,而来自梨和梨转录组开发的SSR引物相对较高。筛选出207对符合作图要求的SSR引物在群体中扩增,构建亲本的连锁图谱。母本图谱中的141个标记分布在17个连锁群上,总长度757.34 cM,标记间平均5.37 cM;父本图谱中的153个标记分布在19个连锁群上,总长度1 149.43 cM,标记间平均7.51 cM。【结论】对不同来源的SSR引物构建的双亲连锁图谱进行整合,最终得到一张由186个SSR标记,覆盖基因组长度1 125.33 cM的整合图谱。     

2种Y形整形方式对‘中梨1号’生长结果的影响

为了解Y形架不同整形方式对梨树生长结果的影响,研究了龙干式和二主枝2种Y形架整形方式下‘中梨1号’梨品种幼树树干直径、主枝直径、早期结果性能、果实品质等方面的差异。结果表明,龙干式整形的‘中梨1号’树干直径、主枝直径、40%以上节位结果枝条数、单株平均结果数等均显著高于二主枝整形的‘中梨1号’,表现出良好的幼树早期丰产性。但龙干式整形的树势相对中庸,果实平均单果质量略小于二主枝整形的‘中梨1号’。除了龙干式的果心占比稍大于二主枝‘中梨1号’,2种整形方式的‘中梨1号’果实在果形指数、果肉硬度和可溶性固形物含量等品质指标上并无显著差异。总体上,龙干式较二主枝式更容易整形,树势更中庸,幼树早期丰产性强,但需要强化水肥管理。     

梨品种SSR特征指纹图谱与分子身份证构建

为了加强对梨种质资源和育成品种的管理,便于对相关材料进行区分鉴定、资源交换以及新品种特异性、一致性和稳定性(DUS)测试,利用筛选的25对SSR核心引物对分别属于沙梨、白梨、新疆梨、西洋梨和秋子梨的共124个梨品种进行扩增,构建梨品种SSR特征指纹数据表,再将各品种在数据表中各SSR位点的基因型数据进行排序和赋值,串联赋值字符生成124个梨品种的SSR分子身份证号码。结果表明,25对引物表现了较强的品种区分能力,仅用其中9对引物(Pb2L5N03978、Pb4L11N0673、Pb2L2N01186、Pb2L11N19979、Pb2LUN24633、Pb2L2N00685、Pb3L8N5448、Pb3L5N1095、Pb3LUN6569)即可区分115份梨品种;但25对引物未能将"张掖长把"和"兰州长把","巍山红雪梨1号"和"巍山红雪梨2号","火把梨""晚熟火把梨"和"祥云火把梨","弥渡小红梨"和"祥云小红梨"等4组共9个品种区分开。利用优选排序的上述9对引物位点及Pb2LUN23926引物位点的基因型数据构建了供试124个梨品种的SSR特征指纹数据表,生成了SSR分子身份证号码。本研究提供了一个在梨品种SSR特征指纹数据表的基础上,对基因型数据进行编号生成梨品种SSR分子身份证号码的新方法。