多杀性巴氏杆菌分离鉴定及序列分析

旨在了解新疆地区多杀性巴氏杆菌主要流行株的特性。通过病原的分离纯化、PCR扩增及测序,分析8株多杀性巴氏杆菌的血清型,16S rDNA基因、ompH基因和ompA基因的差异。结果表明,3株羊源、2株牛源和1株禽源分离株为荚膜A型,1株牦牛源分离株为荚膜B型,1株标准株为荚膜E型,均具有很强的致病性。分离株与GenBank公布的代表株的16S rDNA基因、ompH及ompA基因同源性分别为93%~100%、93%~100%、98%~100%。ompH基因的ORF氨基酸C端最后10个氨基酸变化较大,分离到5株ompA基因的ORF氨基酸序列N端多出6个氨基酸（M-K-R-I-I-Q）替代原先的起始位置。可见：新疆主要流行株为强致病性的荚膜A型,且有出现变异趋势。     

秸秆在肉鸡饲料中的应用

<正>近年来,国家加大了环境整治力度,禁止焚烧秸秆,同时出台了许多对秸秆进行综合利用的优惠措施,为了破解秸秆综合利用的重点和难点问题,本试验选择农村常见的辣椒、茄子、黄瓜藤、蒜等4种农作物秸秆按照一定的比例混合作为添加剂（下文中称为“四吉”饲料添加剂）添加到肉鸡饲料中,通过饲喂试验探索秸秆在肉鸡养殖中的应用效果,为加快推进秸秆资源化、商品化利用,促进资源节约、环境保护等工作提供参考。     

枫杨叶挥发油的提取及化学成分研究

为了研究枫杨(Pterocarya stenoptera C.DC)叶挥发油的提取工艺及化学成分,采用超声辅助水蒸气蒸馏法提取枫杨叶挥发油,利用单因素和正交试验探究了超声时间、蒸馏温度和蒸馏时间对枫杨叶挥发油提取率的影响;使用气相色谱-质谱联用法对提取的挥发油成分进行了分析鉴定.结果表明,超声波辅助水蒸气蒸馏法提取枫杨...     

自配中草药散剂治疗奶牛隐性乳腺炎效果观察

奶牛乳腺炎是奶牛的一种常见病和多发病,几乎遍及每一个牛群,其是奶牛乳腺受到物理、化学、微生物等刺激所发生的一种炎性变化,特别是奶牛隐性乳腺炎,在整个乳腺炎病例中占有相当大的比例,为临床型乳腺炎的15～40倍.     

几个鸡场大肠杆菌自家苗的研制及应用效果观察

禽大肠杆菌病的病原为大肠埃希氏杆菌，其血清型极多，其中菌体抗原（0）171种，荚膜抗原（K）103种，鞭毛抗原（H）56种，这些抗原可组合成大量抗原性不同的血清型。刘秀梵等从我国18个省、市、自治区分离}}{440株禽源性大肠杆菌，经鉴定有60个血清型之多．而且不同地区的优势血清群差异很大，且与国外报道的优势血清群为O1、O2、O35、O78并不完全相一致。国外家禽大肠杆菌病主要是由这4种血清型所致．很少分离到其他致病性血清型．而国内不同地区都有其独立的优势血清群，就是在同一地区不同养殖场血清型相差也较大，甚至在同一鸡场同一鸡群可以存在多个血清型。不同血清型之间的抗原交叉保护力较弱．不可能制备一种覆盖所有血清型的超广谱疫苗。我国不同地区的优势血清群的差异也不能像国外那样通过开发包括优势血清群抗原的疫苗就可以达到理想的免疫效果。因此，家禽大肠杆菌疫苗在我国应用存在较大的局限性。     

牦牛巴氏杆菌和葡萄球菌的分离鉴定

2007年7月初,农十二师104团某牛场牦牛因阴雨天气转场.造成牛群突然发病、死亡,主要是犊牛.发病率为3%;致死率为20%.其临床症状:病初体温高达41℃～42℃,精神沉郁,呼吸加快,有痛苦性干咳,下痢,气味恶臭.病理变化:肝肿胀、质脆,个别牛肝表面有坏死灶;肾稍肿;淋巴结明显水肿、出血;肺脏表面有肝变区,呈大理石样花纹,有纤维素性胸膜炎变化,有化脓灶;心包积水;初诊为"牛出血性败血病",一种以高热和败血症为特征的急性传染病[1].     

扩展莫尼茨绦虫DAZ基因保守结构域所在片段的克隆及原核表达

为了克隆和表达编码扩展莫尼茨绦虫无精症缺失(DAZ)基因,试验根据GenBank中扩展莫尼茨绦虫DAZ基因cDNA序列(登录号为GH291478)设计1对特异性引物,以扩展莫尼茨绦虫组织总RNA为模板,RT-PCR扩增DAZ基因,并克隆到pMD19-T载体中进行序列测定,构建重组质粒pET28a-DAZ,转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞,以异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达;利用非变性聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分析表达产物,通过螯合琼脂糖凝胶FF亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果表明:重组DAZ基因在大肠杆菌中高效表达,表达的融合蛋白分子量约为14 ku。     

市场检疫中牛马肉的鉴别方法

从市场检疫实际看,冬春两季市场上销 售的牛马肉较多,牛马肉人们喜食,其共同特 点是瘦肉多,但营养价值却不一样,马肉远不 如牛肉.据我们调查所知,农户中健康的牛马 很少宰杀吃肉.一些肉类商贩是以低价从农 民手中购入的老马、病马私屠滥宰,更有甚者 把死马掺人牛肉中或转手充当牛肉出售.因 此,为保护消费者利益,确保人们身心健康, 市场上出售的牛马胴体需要鉴别.因为这类 肉大部分见不到内脏器官,主要靠感官检查, 如需法律裁决时要进行实验室检验.     

绵羊生长激素(oGH)的分子克隆与序列测定

本文旨在新疆绵羊生长激素(oGH)基因的克隆。从阿勒泰×中国美利奴杂交羊脑垂体细胞中提取总RNA,分离得到具翻译活性的mRNA。用RTPCR方法扩增出编码oGH的基因,长度为671bp。将扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,回收纯化。采用PCR克隆试剂盒将扩增产物连接至pTAdv质粒上,经PstI和XbaI双酶切鉴定正反插入后,筛选正向插入阳性克隆,并进行序列分析。结果表明克隆到的oGH基因序列与国外报道的序列有4个碱基差异,但所推导的氨基酸序列完全一致。oGH基因的开放阅读框架共含654个核苷酸,编码217个氨基酸,其中信号肽26个氨基酸,编码碱基为1～78(78bp);成熟肽191个氨基酸,编码碱基为79～651(573bp);终止密码子TAG(652～654bp)。其蛋白质的氨基酸序列与牛、人和鱼的序列同源性分别为99.08%、26.7%和5.9%。     

捻转血矛线虫Hc38基因保守结构域所在片段的克隆及原核表达

参照捻转血矛线虫Hc38基因核酸序列(登录号:AY749124)的保守结构域设计1对引物,采用RT-PCR方法从绵羊捻转血矛线虫雌性成虫中扩增出约429 bp的cDNA序列,将其克隆到pMD19-T中,经酶切鉴定证实,并进行序列测定.与AY749124序列同源性为99%.进一步将克隆基因与原核表达载体pPRO EX HTa构建重组表达载体,经IPTG诱导,能在DH5a细菌中表达了相对分子质量约17 000的融合蛋白.经Western blot等检测表明,诱导表达的抗原蛋白能与捻转血矛线虫阳性血清发生特异性反应.