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运用单因素试验法对影响也门铁ISSR-PCR扩增的各个因素进行了优化,优化体系为:25μL反应体系中,Taq酶浓度0.04 U.μL-1、dNTPs浓度0.18 mmol.L-1、引物浓度0.4μmol.L-1、Mg2+浓度2.0mmol.L-1、模板浓度0.8 ng.μL-1、甲酰胺浓度1.6%、1×buffer,最后用dd H2O补足到25μL。利用优化体系和筛选的引物对也门铁及其嵌合体品种进行了ISSR扩增分析。 相似文献
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韧皮部特异启动子驱动密码子优化的抗菌肽D基因的植物表达载体构建 总被引:1,自引:1,他引:1
根据177个GenBank中登录的柑橘编码蛋白密码子用法的分析结果,优化并重新设计和合成了含柑橘偏爱密码子、对柑橘黄龙病有杀灭作用的柞蚕抗菌肽D基因(命名为CAPD),克隆入pUC19克隆载体并经测序验证后,获得了含新抗病基因的重组质粒pUC19-CAPD。用限制性内切酶BamHI和SacI双酶切pUC19-CAPD克隆载体和pBI121植物表达载体的质粒DNA,回收pUC19-CAPD克隆载体中的CAPD基因小片段和pBI121植物表达载体中去掉GUS报告基因的大片段,经连接、转化和鉴定后,构建了由CaMV35S组成型启动子(35SP)驱动CAPD目的基因的新植物表达载体(命名为pHZ05);用限制性内切酶BamHI和HindIII双酶切含笋瓜韧皮部特异启动子(PSP)的pUCm-PSP克隆载体和pHZ05植物表达载体的质粒DNA,分别回收pUCm-PSP克隆载体中的PSP小片段和pHZ05植物表达载体中去掉CAPD目的基因上游35SP的大片段,经连接、转化和鉴定后,构建了由PSP驱动CAPD目的基因的新植物表达载体(命名为pHZ06)。利用细胞感受态法直接将2个由不同启动子驱动的含CAPD目的基因的新重组植物表达载体分别导入根癌农杆菌LBA4404、GV3101、EHA105和发根农杆菌Ri15834等4个农杆菌菌株中,为利用农杆菌介导的遗传转化技术培育抵抗由韧皮部传导的毁灭性和检疫性病害柑橘黄龙病的新种质奠定了基础。 相似文献
146.
AgNO_3对草莓试管苗生长及抗氧化酶活性的影响 总被引:3,自引:2,他引:3
为了探讨重金属离子对果树的毒性机制,以草莓(Fragaria ananassa Duch.)主栽品种丰香(Toyonoka)和章姬(Akihime)组培苗为外植体,研究了不同浓度AgNO3对草莓生长及抗氧化酶活性的影响。结果表明,1/2MS培养基中有AgNO3存在时,2个草莓品种的根干质量和根长明显增加,根系活力随着AgNO3浓度的增加而增加,1.0 mg/L时达最大值,而根系含水量则随着AgNO3浓度的增加逐渐降低。AgNO3浓度为0.5-1.0 mg/L时,植株株高和干质量逐渐下降,而叶绿素、可溶性蛋白的含量和抗氧化酶的活性则逐渐增加。叶片中MDA的含量、O2-的产生速率、脯氨酸的含量和IAA氧化酶的活性随着AgNO3浓度的增加而增加,而IAA的含量则逐渐降低。 相似文献
147.
“云柠1号”是从“尤力克”柠檬芽变中选出来的新品种。2011年12月通过云南省林木品种审定委员会认定。该品种果实椭圆形,有乳突,无果顶印圈。平均单果重145g。果皮黄色,厚0.83cm,难剥皮。果面光滑,油胞凹陷。果心充实,内果皮白色,果肉黄白色。 相似文献
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普通枇杷和栎叶枇杷APETALA1同源基因的克隆和序列分析 总被引:4,自引:0,他引:4
分析植物花分生组织特征基因APETALA1(AP1)同源基因的保守区序列,设计特异引物;用PCR方法从枇杷栽培品种香钟11号和野生种栎叶枇杷基因组DNA中各扩增出1个350 bp左右的片段;将该片段分别克隆到pUCm-T载体.测序和序列分析结果表明获得了枇杷AP1同源基因的片段.该基因片段的序列在2个不同种的枇杷间差异较小,均含有2个内含子,特别是外显子部分只有1个碱基的差别;编码区共编码36个氨基酸,氨基酸序列也只有1个氨基酸的差异.其序列已经在GenBank中登记(登录号分别为AY549306和AY571786).同源性比较发现该基因片段与其他作物中已经报道的AP1同源基因的同源性大都在80%以上,特别是与同属于蔷薇科的苹果的同源性最高,达到91%(栽培种)和94%(野生种),推测它们具有相似的功能. 相似文献
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