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31.
32.
红豆杉属于我国一级保护珍贵植物。通过简述来宾市野生南方红豆杉资源现状,综合内外因素分析了濒危原因,提出了野生南方红豆杉保护对策。 相似文献
33.
【目的】胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis,LI)是引起猪增生性肠炎(porcine proliferative enteritis, PPE)的肠道病原菌,主要表现为动物福利下降,给世界养猪业造成严重的经济损失。研究通过制备鼠抗LI SodC的单克隆抗体,建立一种针对LI的免疫过氧化物酶细胞单层试验(IPMA)抗原检测方法,检验其在临床上的应用性,从而为LI的病原诊断提供一种科学有效的手段。【方法】选取胞内劳森菌弱毒疫苗为研究对象,通过PCR扩增其sodc片段,将其克隆至原核表达载体pGex-6p-1上,成功构建出pGex-6p-1-sodc重组质粒,诱导表达重组蛋白SodC。Western Blot分析重组蛋白的反应原性,一抗使用鼠抗GST标签的抗体。以该重组蛋白为免疫原,免疫4—6周龄BALB/c小鼠,利用常规细胞融合技术、有限稀释法和间接ELISA技术筛选阳性杂交瘤细胞,并制备腹水。通过间接免疫荧光(IFA)鉴定该单抗的特异性。以该单抗为一抗,摸索并建立了LI IPMA抗原检测方法,并评价该方法的特异性、敏感性和重复性。用优化后的IPMA方法对来自江苏周边地区猪场回肠组织样品进行检测,评价该方法的临床价值。【结果】纯化后SodC蛋白浓度较高,与鼠抗GST标签的抗体发生特异性结合,表明该蛋白反应原性较好。经3次亚克隆后最终共筛选获得2株阳性杂交瘤细胞,分别命名为1D6和1F7。单抗亚型鉴定结果显示:1D6亚型为IgA,1F7亚型为IgG3;ELISA检测1D6单抗效价为1﹕1 024 000;1F7单抗效价为1﹕1 024 000;间接免疫荧光(IFA)结果表明2株单抗均与LI菌株发生特异性反应,与猪霍乱沙门氏菌(Salmonella Cholerasuis,S. Cholerasuis)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等猪常见病原无交叉反应。优化后IPMA反应条件为:一抗稀释倍数为1﹕800,作用45min;二抗稀释倍数为1﹕2 500,作用1h,此时IPMA检测效果最佳。用该方法检测S. Cholerasuis、PEDV、TGEV、伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2(PCV2)均为阴性;最低检测限为103个/mL,说明该方法特异性强、敏感性高。临床样品检测结果显示146份病料中共检测出92份阳性样品,3个不同猪场的阳性样品检出率分别为65.6%、68.2%和53.7%,总体阳性率为63.0%。普通PCR方法检测出82份阳性样品,两种方法的阳性符合率为94.6%。【结论】成功制备了鼠抗LI SodC蛋白的单克隆抗体,建立了针对LI抗原的IPMA检测方法,并对临床样品进行了检测。该方法具有良好的特异性和敏感性,并具有一定的临床价值,为实验室LI的分离鉴定、在感染细胞中的定位以及流行病学调查和相关检疫提供一种有效的技术手段。 相似文献
34.
水稻基因差异表达与杂种优势的关系分析 总被引:4,自引:1,他引:3
【目的】分析水稻强、弱优势组合的基因差异表达模式特征,探讨其与杂种优势之间的关系。【方法】以扬稻6号、明恢63、特青配置的9个杂种F1为材料,利用差异显示PCR技术(differential display polymerase chain reaction,DD-PCR)分别分析分蘖期(叶片)、孕穗期(幼穗)、抽穗期(剑叶)的基因差异表达模式。【结果】同一时期内强优势组G1(父本扬稻6号)、中优势组G3(父本特青)以及弱优势组G2(父本明恢63)在母本特异表达(UNP1)、父本特异表达(UNP2)、F1特异表达(UNF1)、F1特异缺失表达(ABF1)4个基因差异表达模式上存在明显差异;相关分析表明分蘖期叶片UNP2与单株产量呈极显著正相关,来自父本的基因特异表达有利于提高杂种优势;同一优势组在不同时期的表达模式也存在明显差异,反映了基因的时空表达特征;获得19个G1、G2间特异性差异表达的基因片段,分布在除第12染色体以外的其余11条染色体上,主要涉及物质合成与运输、能量代谢、糖类代谢等重要途径。【结论】水稻强、弱优势组合F1在不同生育期基因表达模式存在显著差异,表型性状的差异可以从基因表达模式上得以反映。 相似文献
35.
剪秋罗种子催芽及秋水仙碱诱导多倍体研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为了解决剪秋罗种子发芽率不高的问题,以剪秋罗种子为试验材料,比较种子新旧、播种基质以及不同浓度赤霉素(GA3)对剪秋罗种子发芽势和发芽率的影响,并在此基础上利用不同浓度秋水仙碱和不同时间处理剪秋罗萌动种子诱导多倍体。通过形态鉴定、气孔鉴定以及细胞学鉴定变异植株。结果表明:存放1年的剪秋罗种子发芽指标均优于当年新种子,当年种子可能具有初生休眠特性。以150 mg/L的GA3预处理存放1年的剪秋罗种子24 h并播种于培养皿中能获得最高的发芽势(76.33%)和最高的发芽率(85.33%)。经过秋水仙碱处理的种子普遍存活率低,但每个处理浓度下都获得了变异植株,秋水仙碱浓度0.1%为筛选出的最适诱导浓度。变异植株表现出了与对照植株在形态上、气孔分析上和细胞学检测上的差异。经鉴定,初选出1株多倍体。研究为培育剪秋罗多倍体新品种探索出了一条新的育种途径。 相似文献
36.
草鱼肠巨噬细胞的分离培养与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
为了建立草鱼肠巨噬细胞的分离培养与鉴定方法,本研究在采用刮除法结合胶原酶IV消化法制备肠黏膜固有层单细胞悬液的基础上,使用鱼类脏器单核细胞分离试剂盒分离肠巨噬细胞,再经差异贴壁法纯化肠巨噬细胞,最后,用含10%胎牛血清和5%草鱼血清的RPMI 1640完全培养液,在28°C、5%CO2条件下原代培养肠巨噬细胞,并通过细胞形态学检查、分子标记检测和功能验证实验加以鉴定。结果显示,每尾鱼(约250 g)肠巨噬细胞的获得量约为3×107个,细胞活率为99.6%,纯度达到95%以上;倒置显微镜观察发现,原代培养4~5 d的贴壁细胞多呈圆形或多边形,体积明显增大,细胞汇合度达到95%;光镜和电镜观察到染色后的贴壁细胞具有巨噬细胞的形态结构特征,贴壁细胞经荧光定量PCR在m RNA水平检测到巨噬细胞特异性标志分子(草鱼巨噬细胞集落刺激因子受体),功能实验证实贴壁细胞具有吞噬功能,脂多糖能够显著提高其呼吸暴发活性。本研究首次成功建立了草鱼肠巨噬细胞的分离培养与鉴定方法,为开展口服疫苗诱导的草鱼肠黏膜免疫应答研究提供细胞模型。 相似文献
37.
近年来,随着全球减盐行动的推进,人们对低盐饮食的健康需求日益增长,具备良好风味和外观的低钠盐食品已成为当前的研究热点之一。为适应消费者对健康饮食的需求,本研究利用柠檬酸钠作为食盐替代物制作盐干品,对其品质进行了调查研究。本研究以日本方头鱼为原料,用9%(W/V,质量浓度)食盐(对照组)和柠檬酸钠(实验组)浸渍后风干,制作了高水分半干制品,对表皮颜色和pH值,鱼肉中的Na+浓度、质地、鲜味特征物质IMP、新鲜度指标K值,以及烤制后的感官评价开展了品质研究。结果显示,实验组盐干品表皮红色色度值a*、彩度值C*和pH值显著高于对照组;其肌肉组织中Na+浓度为对照组的39%,且具有较高的持水力,较低的断裂荷重和断裂应力,断裂变形显著高于对照组;同时,IMP和K值等品质指标没有显著差异。烤制后的感官评价结果验证了以上结果,实验组的咸味评分显著低于对照组,在外观评分略高的基础上,咀嚼性、鲜味和总体可接受性等方面没有显著差异。研究表明,用柠檬酸钠代替食盐制作日本方头鱼盐干品,在保证品质的同时,可有效提升表皮色彩,降低Na+含量,是理想的钠盐替代物之一,可为水产品干制加工的工艺改善、口味调节、减少钠盐用量等提供新的思路。 相似文献
38.
39.
在不改动电水壶结构情况下,对电水壶进行简单的改装,就可以成为一电热淋浴器.将壶盖拿去不用,另用厚度为2厘米的木板制成壶盖状,直径较壶盖口大1~2厘米,用三只铁钉 相似文献
40.
产生物絮凝剂自生固氮菌HY1141的筛选及培养条件优化 总被引:1,自引:0,他引:1
从48株自生固氮菌中筛选出一株高效絮凝剂产生菌HY1141。比较确定其最佳碳、氮源后,再通过正交试验筛选最佳培养基和最佳培养条件。结果表明,该菌株的最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为N2。在不加外源氮素的前提下,最佳培养基为蔗糖5g/L,磷酸二氢钾1·5g/L,硫酸镁0·6g/L。最佳培养条件为转速150r/min,培养温度35℃,培养基初始pH7·0、培养时间36h。在此条件下,该菌产生的絮凝剂对高岭土悬液的絮凝率达96·4%。 相似文献