甘露糖在棉花基因转化中对愈伤的诱导和分化的影响

在目前的植物转化系统中,要求在关注基因或目的基因转入细胞时,同时有标记基因存在。标记基因主要是抗生素或除草剂的抗性基因。借标记基因的表达可以将转化细胞从大量的未转化细胞中筛选出来。但抗生素或除草剂的抗性标记基因存在,对转基因作物的安全性有很大的影响。本文利用甘露糖异构酶基因对棉花进行转化,以甘露糖作为筛选剂分析对棉花愈伤诱导和分化的影响。1材料和方法1.1供试品种和菌种以晋棉7号、柯字312、泗棉3号作为供试品种。用于转化的农杆菌菌株为LB4404,内含甘露糖-6-P-异构酶基因。1.2实验方法1.2.1无菌苗制备。棉子经硫…     

雄性不育基因对棉花的遗传转化

利用TA29、A6、A9三启动子功能区与barnase基因融合构建的不育基因以农杆菌介导法对棉花下胚轴进行了遗传转化,通过胚状体途径获得了转基因再生植株.利用150 mg·L-1高浓度卡那霉素(Km)对转化初期筛选出的再生苗进行再次筛选,提高了转化株的选出率.通过PCR检测和Southern dot blot分析从转基因胚状体再生植株中获得了带有barnase不育基因的120株转基因植株.进行转基因植株生物学性状检测和观察表明,所获得的转基因植株对溴苯腈表现出了明显的抗性,并从不育基因转化植株中筛选出了具有明显不育特征的雄性不育株.     

中国棉花质核不育系的研究现状与前景分析

自从Meyer等于20世纪60年代培育出了第一个具有异常棉细胞质的雄性不育材料开始,国内外对棉花细胞质雄性不育系(CMS)及其应用的研究便深入展开。纵观目前中国现有的棉花CMS的研究现状,笔者认为,由于各种类型的棉花CMS的基因来源、生理生化基础、细胞学行为以及性状表现上存在着差异,在三系配套研究及利用上尚存在诸多疑惑。为此,进一步从分子水平上探明棉花CMS的败育机理,克服不育细胞质对F1代的负效应以及昆虫传粉媒介问题,对于棉花三系配套在生产上的快速推广和利用将起着重要的作用。     

NPTII标记转基因棉花再生株的延其筛选

新霉素磷酸转移酶(Neomycin Phosphotransferase Ⅱ,NPTⅡ)基因是迄今植物遗传转化中应用最为广泛的选择标记.该基因编码新霉素磷酸转移酶亦称氨基糖苷-3＇-磷酸转移酶(aminoglycoside-3'-phosphotransferase Ⅱ),其编码产物可使氨基糖苷类抗生素(aminoglycoside angibi-otics)如卡那霉素(kanamycin,Km)、新霉素(neomycin)、G418等磷酸化而失活.卡那霉素等氨基糖苷类抗生素能与植物细胞叶绿体和线粒体中的核糖体30S小亚基相结合,影响70S起始复合物的形成,干扰叶绿体及线粒体的蛋白质合成,从而导致植物细胞死亡.     

关键因子对棉花利用农杆菌介导法导入外源基因的影响

用5～6d的棉花无菌苗下胚轴切段与农杆菌共培,将Bt基因和tfdA基因导入棉花。菌株质粒中GUS基因为标记基因,NPTⅡ基因为选择基因。在含有0.1mg/L2,4-D和0.1mg/LKT的MS培养基上共培48h,转移到添加头孢霉素500mg/L、卡那霉素50mg/L培养基中诱导和筛选抗性愈伤组织。70～80d时,进行GUS检测,选择GUS阳性愈伤组织,经体细胞胚     

山西省发展机采棉的技术分析与前景展望

分析了山西省运城市发展机采棉的有利条件,针对机采棉的技术要求,在品种选用、化控措施和脱叶催熟环节上进行了综合性的研究与论述,旨在探讨山西发展机采棉的技术措施,加快应用进度。展望了山西机采棉的发展前景,并提出了建议。     

旱塬地集雨节水灌溉的初步研究

于1998～2000年设置了天然降雨下渗与径流模拟试验，以比较本田集雨、全覆盖集雨、旱井集雨等集雨方武的效果。试验表明，本田集雨仅能收集降雨量的2．3％～5．9％，所以只能作为集雨的辅助措施，而场院、道路、山坡或全覆盖条件下能收集降雨量的50％以上。利用地头旱井收集径流雨水，在小麦和玉米生育期使用现代化滴喷灌技术补灌，不仅可以显著增加作物产量，而且可以提高复种指数。据1998年试验，小麦、玉米每666．7m^2总产达733．3kg，比对照增产38．2％；1999年试验，小麦、玉米总产达440．7kg；2000年，总产432．7kg，增产67．5％。     

农杆菌介导外源基因在棉花中的表达

用 5～ 6d的棉花无菌苗下胚轴切段与农杆菌共培养 ,菌株质粒中 Gus基因为标记基因 ,NPT 基因为选择基因。在含 0 .1 mg· L- 12 ,4- D和 0 .1 mg· L- 1KT的 MS培养基上共培 48h,转移到添加头孢霉素 50 0 mg· L- 1、卡那霉素 50 mg· L- 1MS培养基中诱导和筛选抗性愈伤组织 ,70～ 80 d时 ,进行 Gus检测 ,选择 Gus阳性愈伤组织 ,经体细胞分化生成转基因再生植株     

抗虫棉品系L22依赖抗坏血酸H2O2清除酶系统活性的降低

以早衰型转 Bt基因抗虫棉 L2 2为主要试材 ,研究了其体内活性氧代谢和一些抗氧化酶活性与对照常规棉 JM1 1、抗虫棉 33B的差异。结果表明 ,抗虫棉 L 2 2在生长中期时叶片中 H2 O2 含量和膜脂过氧化产物丙二醛 ( MDA)显著增高 ,在依赖抗坏血酸 ( As A)的 H2 O2 清除酶系统中 ,抗坏血酸过氧化物酶 ( As A- POD)、脱氢抗坏血酸还原酶 ( DR)、谷胱甘肽还原酶 ( GR)等酶活性极显著低于常规棉 JM1 1和 33B,叶片中 As A含量也以 L2 2为最低 ,而 DAs A/As A是最高的 ,分别是JM1 1和 33B的 3.75倍和 4.31倍。初步认为 L2 2出现早衰现象与其体内活性氧代谢失调和依赖As A的 H2 O2 清除酶系统活性显著降低有关 ,并分析了可能的原因     

两类熟性品种在旱地的差异及其改进方向

在棉花耐旱育种中,由于地区生态差异,育成推广了中熟和早熟两种生态类型。袁钧等曾就其生态表现及适应范围进行了探讨。为针对性的进行品种改良,对两类熟性品种在旱地的差异及其改进方向进行了研究。1材料和方法试验于1987～1995年在山西省棉花研究所试验田进行。选用国内育成的114个棉花耐旱品种(系)。设置了中熟和早熟两套旱地品种联合试验。分别以中棉所12和中棉所16为对照。试验设计同常规区试,栽培管理同旱地一般试验,考察项目有皮棉产量、单株铃数、铃重、衣分、株高和生育期,考察方法依照国家区试要求。在此基础上,汇总了中熟对照、…