甜樱桃四倍体杂种砧木Y1高频、高效离体再生体系研究

以甜樱桃四倍体矮化砧木Y1试管苗叶片为外植体,探讨了不同基本培养基、激素组合、暗培养时间和叶片发育阶段对其不定芽再生的影响,建立甜樱桃四倍体矮化砧木的高频、高效离体再生体系,为进一步进行遗传转化研究奠定基础。结果表明,甜樱桃四倍体矮化砧木Y1采用WPM培养基再生效果最好,明显优于MS和DKW培养基;最佳激素组合为6-BA2.0 mg.L-1+IBA1.0 mg.L-1;接种后暗培养可以明显提高不定芽再生率,最适宜暗培养时间为14 d;Y1试管苗顶部完全展开的幼嫩叶片再生能力最高。通过以上条件的优化,成功建立了甜樱桃四倍体矮化砧木的高频、高效离体再生体系,离体叶片不定芽再生率达90%,每叶片平均再生不定芽数达4.1。     

蓝莓花粉直感研究进展及在栽培生产中的应用

论述了蓝莓的的花粉直感作用及其对果实发育期、果实大小等性状的影响规律,介绍了相关研究进展并探讨了花粉直感现象产生的机理．提出了现阶段在蓝莓栽培生产中有效利用花粉直感提高生产效率的途径。     

起垄栽培对甜樱桃生长及流胶病发生的影响

以吉塞拉6号砧木嫁接的甜樱桃品种萨米特为试材,研究了起垄栽培对树体的生长发育、果实产量、果实品质及树体流胶病发生的影响。结果表明,起垄栽培促进了甜樱桃树体的生长发育,提高了产量和果实品质,7年生树较4年生树的效果明显;同时起垄栽培降低了流胶病的发病率。     

核桃GAI基因的克隆和序列分析

DELLA蛋白是赤霉素信号传导通路中一类重要的负调节因子。利用RT-PCR技术以香玲核桃叶片为试材,克隆得到核桃DELLA蛋白基因JrGAI。对基因和编码蛋白序列进行分析,结果表明,JrGAI基因开放阅读框(ORF)为1 837 bp,编码612个氨基酸;生物信息学分析表明,JrGAI编码蛋白具有DELLA蛋白的典型结构域;利用BLASTx和DNAMAN软件进行相似性分析发现JrGAI编码蛋白氨基酸序列与其它植物的DELLA蛋白具有较高的同源性,其中与辽宁2号核桃同源性最高,达到99%。核桃JrGAI基因的克隆为其进一步研究应用奠定了基础。     

山东地区樱桃绿环斑驳病毒(CGRMV)的RT-PCR检测及外壳蛋白基因的克隆

为调查我省甜樱桃感染樱桃绿环斑驳病毒(Cherry Green Ring Mottle Virus,CGRMV)情况,本研究以甜樱桃(Prunus avium L.)品种"红灯"叶片总RNA为模板,根据CGRMV基因组序列设计特异引物,对山东地区37份甜樱桃"红灯"样品进行RT-PCR检测,共检测出19份阳性样品。利用CGRMV外壳蛋白基因序列引物,从阳性植物样本中分离到约800 bp的目的片段,克隆测序,序列分析显示该片段全长807 bp,编码268个氨基酸,与GenBank中已登录的CGRMV分离物的外壳蛋白基因序列一致性为87%～97%,氨基酸序列相似性为95%～99%。该结果表明山东地区甜樱桃生产园中感染CGRMV的病例较为普遍。     

不同胡桃属砧木嫁接亲和力探究

为提升核桃嫁接成苗率,探究不同类型胡桃属砧木在嫁接中的亲和力差异,筛选优异嫁接砧木,以3个胡桃属植物—核桃、黑核桃、野核桃为砧木,核桃为接穗,进行嫁接试验。结果表明：以野核桃和核桃为砧木的成活率与新梢长势明显优于黑核桃为砧木,采用插皮接方式嫁接大树的平均嫁接成活率分别为60.37%,55.93%,64.07%,当年生新梢长度分别为41.00cm, 33.00 cm, 38.89 cm,当年生新梢粗度分别为10.44 mm, 7.89 mm, 10.00 mm。同时论述了核桃嫁接以及接后管理的要点,为核桃的产业化推广提供理论与实践基础。     

甜樱桃新品种泰山朝阳的选育及栽培技术要点

泰山朝阳甜樱桃品种是由那翁和大紫自然授粉的实生后代中选出。果实圆心脏形,果皮底色黄略带红晕,平均单果重8.14g,果肉多汁,可溶性固形物含量14.8%,口感甜,品质上等。在山东肥城,5月14~16日果实成熟。树姿开张,丰产、稳产,适应性广,对细菌性流胶病有一定抗性。简介了栽培技术要点。     

嫩枝扦插过程中吉赛拉5号叶片光合特性与生根的关系

利用半日光间歇弥雾果树育苗系统,进行了甜樱桃矮化砧木吉塞拉5号的嫩枝扦插试验,测定了扦插生根期间叶片光合特性的变化,研究了不同叶片留量对扦插生根速率、成苗率及生根质量的影响,从光合作用的角度揭示了叶片与嫩枝扦插生根的关系。     

3种甜樱桃病毒PNRSV、PDV及LChV-2的多重RT-PCR检测方法的建立与应用

【目的】建立可同时检测李属坏死环斑病毒（Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV）、李矮缩病毒（Prune dwarf virus,PDV）、樱桃小果病毒2（Little cherry virus-2,LChV-2）的多重RT-PCR检测方法。【方法】以复合感染3种病毒的甜樱桃病株叶片为材料,采用CTAB法提取样本总RNA,选用随机六聚体引物对植物样本总RNA进行反转录,所得cDNA作为多重RT-PCR的扩增模板。根据GenBank中PNRSV、PDV、LChV-2基因组序列共设计6对特异引物,分别通过单一RT-PCR和多重RT-PCR筛选出可用于同时检测3种甜樱桃病毒的引物组合。对多重RT-PCR的退火温度及循环数进行优化,以筛选出各引物组合的最适扩增条件。分别以单一感染PNRSV、PDV、LChV-2、复合感染3种病毒、单一感染樱桃病毒A（Cherry virus A,CVA）及甜樱桃无毒苗为样本,对多重RT-PCR引物的特异性进行分析。选取复合感染3种病毒的甜樱桃总RNA的反转录产物为初始模板,按照梯度稀释法依次将模板稀释为2、22、23、24、25倍,在相同PCR反应体系及反应条件下分别对各引物组合的灵敏度进行分析。多重RT-PCR的扩增条带经凝胶回收试剂盒回收纯化后连接至pMD18-T vector,克隆测序,以验证多重RT-PCR检测的准确性。并应用该方法对山东泰安地区甜樱桃生产园中间隔栽培的中国樱桃进行检测。【结果】筛选到2个可以应用的引物组合,组合1“PNRSV-S1/A1、PDV-S2/A2、LChV2-S1/A1”可分别特异性地扩增733、467、337 bp的片段。组合2“PNRSV-S1/A1、PDV-S3/A3、LChV2-S1/A1”可分别扩增得到733、265、337 bp的片段。扩增产物大小与预期相符。多重RT-PCR反应条件优化结果显示,在退火温度52℃、35个循环条件下,2个引物组合的检测效果均较为理想。特异性分析结果显示,2个引物组合均能特异性检测其各自的靶病毒。灵敏度分析结果显示,2个引物组合在cDNA的23×稀释液中仍能特异性扩增,但扩增条带的强度稍有差异,其对植物总RNA的反转录产物的最低检测浓度为107.9 ng•μL-1。克隆测序及序列分析表明,2个引物组合对各自靶病毒的检测结果可靠。应用该方法对9个中国樱桃样本进行检测,结果显示,测试样品均至少感染了2种病毒,其中5个样品复合感染了3种病毒,2个样品同时感染PDV和LChV-2,2个样品同时感染PNRSV和LChV-2。【结论】应用建立的多重RT-PCR检测方法可稳定、准确、灵敏的同时检测单一或复合侵染的3种甜樱桃病毒。     

鲁樱3号甜樱桃矮化纺锤形整形与肥水管理技术

鲁樱3号甜樱桃矮化纺锤形是在纺锤形和细长纺锤形树形的基础上改良而来,具有树体矮化、早丰产、便于搭建防雨棚等优点,适宜在肥水条件好的甜樱桃适栽区进行推广。介绍了甜樱桃鲁樱3号矮化纺锤形的整形技术和肥水管理要点。