兔出血症病毒VP60蛋白单克隆抗体的制备及活性鉴定

为制备兔出血症病毒VP60单克隆抗体,利用HEK293T细胞瞬时表达VP60,免疫Balb/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选获得阳性克隆细胞株-5D11。利用血凝抑制(HI)、间接免疫荧光(IFA)和Westernblot等方法对5D11分泌的单克隆抗体活性进行鉴定,并对其识别区域进行了定位。结果显示,5D11能抑制病毒凝集人“O”型红细胞,与杆状病毒表达的VP60蛋白发生特异性抗原抗体反应,且其识别VP60蛋白线性抗原表位,并定位于494aa-579aa区段。成功制备了抗VP60蛋白单克隆抗体,为开展病原学检测、流行病学研究等奠定了基础。     

基于测序技术的海南地方猪TLR2基因多态性分析

为了解海南地方猪TLR2基因的多态性,本研究采用PCR法从五指山猪、临高猪和屯昌猪3种海南地方猪的血液中克隆Toll样受体2(TLR2)基因,并进行测序及序列分析。结果显示,3种海南地方猪TLR2基因的扩增长度均为2649bp,编码区长2358bp。3种猪TLR2基因序列的种内比对结果显示,五指山猪种内有7个核苷酸位点存在多态性,2处位于编码区;屯昌猪种内有5个核苷酸位点存在多态性,均在编码区外;临高猪种内有4个核苷酸位点存在多态性,1处位于编码区。种间比对结果显示3种猪有12个核苷酸位点存在多态性,其中3处为错义突变,导致氨基酸改变。同源性分析结果显示,3种猪的TLR2基因序列高度保守,同源性在99.6%~99.9%之间。蛋白质结构预测分析显示,海南猪TLR2基因在876、1454位点呈现的AG突变均引起了其蛋白质二级结构和三级结构的改变,提示可能存在TLR2功能的变化。本研究填补了海南地方猪TLR2基因多态性空白,为深入研究TLR2基因多态性与猪疫病易感性的关系提供基础研究资料。     

尿素在反刍动物饲养中的安全使用

尿素作为非蛋白饲料的一种,已广泛应用于反刍动物的营养中,可部分替代饲料中的天然蛋白质,以缓解世界性的蛋白质饲料资源不足的问题,并取得了明显的效果.尿素的作用是供给瘤胃微生物合成蛋白质所需的氮源,从而起到补充蛋白质的作用.然而反刍动物采食含尿素的饲料后,瘤胃中的尿素会快速分解,其速率可达微生物利用氨的速率的4倍.这样既降低了尿素的利用率,又增加了氨中毒的危险性.     

几种以血便为主的奶牛疾病鉴别诊断与治疗探究

对于奶牛疾病的治疗,应进一步加强鉴别诊断,明确病因,并提出切实可行的治疗方案,采取科学的治疗方法,合理用药,对病牛加强监督和护理干预.而在日常饲养管理中,应密切关注奶牛的饮食,对特殊病牛进行重点监控,明确典型病牛的临床特征,做好诊断鉴别工作,及时治疗,以此降低经济损失.     

不同动物乳脂肪酸组成的比较分析

乳脂肪是乳的主要营养成分之一，其主要生理功能是供给能量、构建机体、提供必需脂肪酸和脂溶性维生素等。本文介绍了人和部分家畜乳中的脂肪含量，比较分析了不同动物乳脂肪酸组成的类别、比例、特点、营养价值和健康效应，并对脂肪酸组成在乳种鉴别中的应用作了简要介绍。     

猪流行性腹泻的诊断与综合防治措施

正1猪流行性腹泻的诊断诊断猪病毒性腹泻的目的是区分致病因素是细菌性、病毒性,还是其他致病因子引起,便于进行有效的综合治疗。由于基层兽医人员没有实验室检验条件,而且病畜不能等到化验结果出来才去治疗,这里根据笔者多年的实践介绍一种简易判断是细菌性病原还是病毒性病原的方法,即可根     

不同禽流感疫苗接种红嘴雁的免疫效果试验

2004年毗邻我市的农十二师发生了一起高致病性禽流感疫情,2005年11月乌鲁木齐市又有3个高致病性禽流感疫点,乌鲁木齐成为全疆禽流感发生的重灾区。为了防止禽流感病在我市蔓延,自2005年底至今我们对全市禽类进行紧急免疫,并对接种疫苗的禽类进行抗体检测,但效果不理想。为此,我们对乌鲁木齐市的红嘴雁进行了不同疫苗的筛选、不同免疫剂量的比较分析,目的是为乌昌地区经济禽类禽流感免疫预防提供科学依据。     

灰树花β-葡聚糖体外抗Ⅰ型单纯疱疹病毒的试验

本研究通过观察细胞病变效应对其细胞毒性、病毒灭活、吸附和增殖等进行体外抗病毒研究,从而研究其抗病毒效应。结果显示,β-葡聚糖对Ⅰ型单纯疱疹病毒在Vero E6细胞上的增殖有明显的抑制作用,测定其IC50为5.18mg/mL,TI为34.1。结果表明,灰树花β-葡聚糖能明显抑制Ⅰ型单纯疱疹病毒引起的CPE效应,具有较好的抗Ⅰ型单纯疱疹病毒的作用。     

应用生物反应器生产高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原

应用激流式生物反应器培养Marc-145细胞生产高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒,并通过工艺优化,实现了病毒抗原的高效生产。首先将Marc-145细胞用含6 0mL/L牛血清的DMEM培养液复苏放大培养,当细胞量达到3×109时,接种入反应器中。先用细胞生长液培养,当细胞达到最大量时更换生长液为维持液,并接种HP-PRRSV。整个过程采用流加方式,每8h采样测定培养上清中葡萄糖浓度。接种病毒后,每24h测定培养上清HP-PRRSV滴度。6个批次细胞生长至88h,糖耗达到最高水平。连续3个批次种毒后培养至96h,上清中HP-PRRSV滴度达到最高,平均约为每106.4 TCID50/0.1mL。因此,认为应用激流式生物反应器进行细胞培养,通过过程工艺优化,可以实现HP-PRRSV抗原的高滴度生产。