甘蓝短散布元件对转基因表达效果的研究*

 为检验甘蓝短散布元件（SINE）对植物转基因表达的影响,采用PCR方法,从甘蓝基因组中克隆了一段短散布元件序列（Short Interspersed Nuclear Element,SINE）,该SINE具有核基质结合区（matrix attachment region,MAR）的结构特征,将其构建到β-葡糖醛酸酶（β-glucuronidase,GUS）基因（uidA）的两侧翼,形成SINE调控的植物表达载体,采用农杆菌介导法,将含SINE序列和不含SINE序列的植物表达载体导入烟草中。对转基因植株进行GUS活性定量测定,结果表明,SINE表现出类似MAR的功能,可以提高外源uidA基因的表达水平,与不含SINE的转化植株相比,外源基因的平均表达水平提高了2倍,但转基因植株个体间表达水平存在较大的差异。     

甘蓝染色体及伸长DNA纤维制备技术的研究

以甘蓝根尖、花药、黄化苗等为材料,初步建立了甘蓝有丝分裂前中期染色体、减数分裂粗线期染色体以及伸长DNA纤维等3种具有不同空间分辨率的靶DNA载体的制备技术.结果表明:通过变温处理可以有效提高前中期染色体分裂相比率;采用0.002 mol/L 8-羟基喹啉20℃预处理1 h、2%纤维素酶和2%果胶酶混合液37℃酶解约2 h、0.075 mol/L氯化钾25℃低渗30 min,制备的前中期染色体效果最佳;2%纤维素酶和2%果胶酶混合液37℃酶解约3 h,可获得伸展良好、背景干净的粗线期染色体;分子梳理法与移动界面法相比,前者制备的伸长DNA纤维效果较好.此方法的建立为荧光原位杂交技术在甘蓝相关研究领域的应用打下了坚实的基础.

Abstract：

A method of preparation was established for different FISH (fluorescence in situ hybridization)resolution on prometaphase and pachytene chromosomes and extended DNA fibers with roots, anthers and albino seedlings of Brassica oleracea. Alternating temperature treatment effectively improved the divisionindex of prometaphase cells. Optimum results were obtained for the preparation of prometaphase chromosomes when pretreatment was made with 0. 002 mol/L 8-hydroxy quinoline at 20 ℃ for 1 h before treatment with the enzyme mixture of 2% cellulase and 2% pectase at 37 ℃ for approximately 2 h in combination with a hypotonic treatment with 0. 075 mol/L potassium chloride at 25 ℃ for 30 min. Well-spread pachytene chromosomes with clear background were obtained through the treatment with the enzyme mixture of 2% cellulase and 2% pectase at 37 ℃ for about 3 h. Molecular combing was better than moving interface for preparing extended DNA fibers. The method lays a solid foundation for the application of FISH in B. oleracea.     

转基因技术在中国蔬菜育种中的应用研究进展

就转基因技术在蔬菜抗病（毒）、抗虫、抗除草剂和抗逆性育种以及人为创造雄性不育和提高耐贮性、提高产量、延迟成熟、品质改良等方面的研究进展进行了综述,并展望转基因技术在中国蔬菜育种中应用的广阔前景。     

一种高效稳定的甘蓝染色体制片新方法

介绍一种高效稳定的甘蓝根尖染色体制片新方法,该方法结合传统的压片法和去壁低渗法优点,制片取得了良好的结果:染色体中期分裂相多,染色体分散良好,形态特征清晰,背景干净.制片可应用于染色体核型分析、分带、荧光原位杂交,以及显微切割等细胞遗传学操作.     

赤霉素及脱落酸诱导芥菜抽薹的效果

将紫丰1号和重庆儿菜种子先于4 ℃春化处理20 d,待两片真叶完全展开后,再对其生长点喷施不同浓度 （300、400、500、600 mg•L^-1）的赤霉素（GA₃）,每隔3 d喷施1次,直至抽薹现蕾。结果表明,促进芥菜抽薹的GA3最佳浓度为500 mg•L^-1。若在喷施GA₃前一天喷施50 mg•L^-1脱落酸（ABA）,则可加强芥菜植株对赤霉素的敏感性,使促进抽薹的赤霉素最佳浓度降低到400 mg•L^-1,其中紫丰1号对赤霉素的敏感性不及重庆儿菜明显     

拌种灵在辣椒地与辣椒中的降解动态研究

在实验室条件下研究了拌种灵在在湖南长沙、海南澹州、浙江杭州、河北石家庄辣椒地与辣椒中的降解动态。结果表明:拌种灵在辣椒地与辣椒中的降解符合一级化学反应动力学方程:Ct=C0e-kt;湖南长沙拌种灵在辣椒地土壤和辣椒上的半衰期分别为5.9d和3.8d,海南澹州拌种灵在辣椒地土壤和辣椒上的半衰期为8.7d和5.1d,浙江杭州拌种灵在辣椒地土壤和辣椒上的半衰期为10.9d和6.8d,河北石家庄拌种灵在辣椒地土壤和辣椒上的半衰期为6.3d和3.8d。     

夏秋甘蓝新品种西园10号的选育

西园10号是以日本引进的胞质不育材料经5代回交转育获得的优良胞质雄性不育系2002041为母本，以南坪甘蓝经11代自交纯化的稳定优良自交系2002070为父本配制的夏秋甘蓝一代杂种。生育期105~120 d（天），外叶11~13片，灰绿色；叶球扁圆形，纵径11.0~13.0 cm，横径21.5~23.5 cm，叶球紧实度0.52，中心柱长5.5 cm，球叶脆嫩，品质优良，单球质量1.5 kg左右，VC含量310.4 mg?kg-1（FW），纤维素7.5 g?kg-1（FW），可溶性固形物5.3 %；耐热，抗TuMV，中抗黑腐病，耐根肿病，每667 m2产量3 500 kg左右，适宜我国南方地区夏秋季栽培。     

柑橘果实粒化过程中木质素生物合成与调控研究进展

柑橘果实粒化是成熟期以及贮藏期容易发生的一种生理性病害。木质素的积累与柑橘粒化的形成密切相关,汁胞木质化作为柑橘果实粒化过程中最明显的现象之一,备受果树研究者们的关注,并取得了一定的研究进展。本文以木质素的生物合成及其调控方式作为研究柑橘果实汁胞粒化的切入点,对木质素生物合成途径中的关键酶基因以及相关转录因子的研究进展进行综述,并对木质素合成途径调控柑橘果实粒化形成机制中存在的问题进行总结以及今后的研究方向进行展望,以期为柑橘果实粒化的后续研究提供借鉴。     

根癌农杆菌介导的甘薯遗传转化及转基因植株的再生

以甘薯优良品种"新大紫”的茎尖培养再生植株为试材,经根癌农杆菌介导将甘薯块根贮藏蛋白启动子(Sporaminpromoter)调控下的10kD玉米醇溶蛋白基因导入到"新大紫”中,并获得了转化植株.甘薯品种"新大紫”再生植株的茎切段,与携带有表达载体质粒pSP10Z的根癌农杆菌菌株LBA4404共培养后,在含75mg/L卡那霉素(Kan)的筛选培养基上可     

农民在户籍制度改革中的意愿及原因分析——以重庆市荣昌县昌元街道办事处方家坝村为例

文中采用问卷调查法对重庆市荣昌县昌元街道办事处方家坝村进行实地调查,探讨了农民参与户籍改革的意愿及影响因素。结果表明,户主的受教育程度、职业技能和家庭收入与其参与户籍改革意愿有密切关系,农民不愿意放弃农村居民户口主要是受传统思想观念、恋地情结和对户籍制度改革政策了解不够的影响。针对此,文章提出了促进农民参与户籍制度改革的几点建议。