追忆往昔展望未来--庆祝上海市农业科学院建院40周年

在这祥龙腾飞之年,千年交汇之际,在这春光明媚,万象更新的时节,上海市农业科学院迎来了建院40周年的喜庆日子.     

西藏开菲尔粒中酵母菌的分离与初步鉴定

西藏开菲尔粒(俗称藏灵菇)是由多种乳酸菌(间或少量醋酸菌)和酵母菌共生而成一种外形酷似菜花的白色或乳黄色团状聚合体,是目前已知的唯一可用于酸奶制作的天然野生菌种资源。采用扫描电镜、分离培养、26S rRNA基因测序与序列分析、荧光原位杂交(FISH)相结合的技术方法,对西藏开菲尔粒中的酵母菌进行了分离培养、鉴定和形态观察。结果显示:西藏开菲尔粒中酵母菌多为球形(2.0~5.0μm)或椭圆形(1.0~3.0×2.0~4.0μm);从西藏开菲尔粒中分离出的16株酵母菌分属于酿酒酵母属(Saccharomyces)、克鲁维酵母属(Kluyveromyces)、亚罗酵母属(Yarrowia)这3个属中的4个种,其中3株是酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae),8株为马克斯克鲁维酵母菌(Kluyveromyces marxianus),3株为解脂亚罗酵母菌(Yarrowia lipolytica)。     

药用真菌脂溶性提取物对PC12细胞氧化应激损伤保护作用的研究

利用PCI2细胞氧化应激损伤模型,对6种药用真菌的49个脂溶性提取物进行筛选,研究表明,灵芝等药用真菌均具有氧化应激保护作用,其中桑黄和北虫草活性显著.29个样品在5～150 mg/L对PC12氧化应激损伤的保护作用呈剂量依赖性增长.药用真菌脂溶性提取物对PC12细胞氧化应激损伤保护作用与药用真菌的种类密切相关,并且药用真菌的不同菌株对PC12细胞氧化应激损伤保护作用也是不同的.     

副溶血弧菌耐热直接溶血毒素基因的克隆及原核表达

根据GenBank上已有的副溶血弧菌耐热直接溶血毒素的基因序列,设计并人工合成引物.将耐热直接溶血毒素的基因全长克隆到大肠杆菌表达载体pGEX- 4T-1上,构建重组表达载体tdhA/pGEX- 4T-1和tdhS/pGEX- 4T-1,转化大肠杆菌BL21(DE3),得到表达的工程菌株.优化诱导表达条件,表达耐热直接溶血毒素.转化有重组质粒tdhA/pGEX- 4T-1,tdhS/pGEX- 4T-1的BL21可稳定高效地表达可溶形式的目的蛋白.表达产物用聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,用GST琼脂糖珠柱亲和层析纯化.溶血实验表明,表达的蛋白具有溶血活性.     

土池肥水培育的生物饵料与卤虫无节幼体的脂类及脂肪酸组成的比较研究

测定和比较了土池培育的褶皱臂尾轮虫（Brachionus plicatilis,简称轮虫）、背刺胸刺水蚤（Centropages dorsispinatus,简称桡足类）、日本新糠虾（Neomysis joponica,简称糠虾）和渤海品系卤虫（Artemia sp.）无节幼体（简称卤幼）的水分、总脂、磷脂及脂肪酸组成。结果表明：（1）轮虫的水分含量显著高于其它3种生物饵料（P〈0.05）,卤幼的总脂/湿重、总脂/干重和磷脂/干重含量最高,轮虫的总脂含量最低（P〈0.05）,桡足类和糠虾的总脂及磷脂含量则介于两者之间。（2）4种生物饵料的脂肪酸组成差异显著（P〈0.05）,无论是中性脂还是极性脂,桡足类的DHA含量最高,糠虾和轮虫次之,卤幼最低（P〈0.05）;糠虾体内的EPA含量最高,卤幼次之,轮虫和桡足类的EPA含量显著低于前两者（P〈0.05）。（3）4种生物饵料中的∑HUFA的含量由高到低依次为糠虾〉桡足类〉轮虫〉卤幼,DHA/EPA值大小依次为桡足类〉轮虫〉糠虾〉卤幼。     

海产品与淡水产品中重金属的差异性及其风险评价

为了解我国东部沿海地区海产品与淡水产品中重金属污染现状及摄入风险,实验分析了东部沿海地区市售的12种海产品和8种淡水产品,采用微波消解-电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定铅、镉、汞、砷、铬共5种常见重金属,根据单因子污染指数（P_i）和金属污染指数（MPI）评价其污染程度,比较不同水产品重金属含量差异及污染状况,并通过靶标危害系数（THQs）评价其健康风险。检测结果显示,海产品与淡水产品中,铅含量范围为ND～1.100 mg/kg,铅超标率为1.4%,各品种铅均值含量无显著差异。镉含量范围为ND～1.600 mg/kg,镉超标率为2.8%,长牡蛎、海湾扇贝镉均值含量高于其他品种。总汞含量范围为ND～1.900 mg/kg,蓝鳍金枪鱼总汞均值含量高于其他品种,其他品种总汞均值含量无显著差异。总砷含量范围为0.004～4.100 mg/kg,淡水鱼（乌鳢除外）总砷均值含量低于其他品种。铬含量范围为0.010～32.000 mg/kg,铬超标率为2.3%,鳙铬均值含量高于其他品种。单因子污染指数显示：不同品种的水产品都有一定的污染。重金属污染指数显示：污染指数呈现...     

应用电子鼻技术检测南美白对虾副溶血性弧菌试验

为了将电子鼻技术应用于水产品中副溶血性弧茵等食源性致病菌的快速无损检测,试验利用电子鼻对从南美白对虾(Litopenaeus vannamei)中分离的一株副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)进行检测.试验采用具有18个金属氧化物传感器的电子鼻对副溶血性弧茵经纯培养所得的挥发性代谢产物进行检测,同时用空白3.5%氯化钠TSB培养液作为对照.电子鼻所得的数据用主成分分析(PCA)、判别因子分析(DFA)、单类成分判别分析(SMICA)等多元统计方法进行分析.结果显示,副溶血性弧菌经纯培养后产生了明显不同于空白培养液气味的挥发性代谢产物.电子鼻可以应用于纯培养微生物的检测.     

双孢蘑菇原生质体同核体及杂交异核体的RAPD分析

本研究以双孢蘑菇原生质体同核体及杂交异核体为材料,用5对随机双引物进行RAPD分析。结果表明,RAPD反应扩增出的特异DNA谱带能够将原生质体同核体与异核体出发菌株以及杂交异核体与同核体亲本明显区别开来。因此,RAPD分析是一种快速有效的手段,能够在双孢蘑菇的遗传研究和菌种改良中发挥重要作用。     

几种药用真菌粗提物免疫调节和肿瘤抑制作用的筛选

运用高通量筛选技术检测了几种药用真菌粗提物对人体肿瘤细胞增殖的抑制作用和对小鼠巨噬细胞的激活作用,并与粗提物透析袋外的小分子成分的活性进行比较。结果显示,灵芝、猴头、云芝和灰树花粗提物对人肠腺癌细胞株SW620有很明显的抑制作用,并有显著激活小鼠巨噬细胞的作用。粗提物经过透析后,透析袋外的小分子成分对SW620的抑制作用与粗提物相似,但对小鼠巨噬细胞没有明显的激活作用。本研究所采用的高通量筛选技术为进一步筛选药用真菌的有效成分奠定了基础。     

南美白对虾养殖水体中霍乱弧菌的毒力、耐药及重金属抗性研究

旨在分析南美白对虾养殖水体中霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的毒力、抗菌素耐药性以及重金属抗性特性,为致病性霍乱弧菌流行预警的研究提供数据支撑。利用聚合酶链反应技术检测了84株霍乱弧菌分离菌株的毒力以及整合接合元件(ICEs)相关基因;采用美国临床与实验室标准研究所(CLSI)标准Kirby-Bauer纸片扩散法以及最小抑菌浓度法测定了受试菌株的抗菌素和重金属抗性;运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对部分受试菌株进行了分子分型。结果显示:受试霍乱弧菌菌株均不携带致病性肠毒素基因ctxA B以及毒素相关基因sto、tcpA、ace、zot;含有毒素表达调控蛋白基因toxR,其中19.05%菌株还含有RTX家族毒素基因rtxA;携带SXT-R391家族ICEs保守功能模块部分相关基因(int、traI、traC、setR、attR)。受试霍乱弧菌菌株对六大类十种抗菌素的耐药性存在显著差异,其中对氨苄西林的耐药率最高为13.10%,其次是庆大霉素(2.38%);利福平、链霉素、氨苄西林、卡那霉素、壮观霉素的中介耐药率为25.00%~1.19%;对四环素、氯霉素、甲氧胺苄嘧啶、复方新诺明均敏感。此外,30%的受试霍乱弧菌菌株对重金属铅、锌具有高度抗性,而对铬、镉、铜、镍、汞、钡敏感;PFGE分子分型可分为5种Not I-PFGE型13种亚型,相似性值为56%~100%。本研究结果为进一步探讨致病性霍乱弧菌的进化起源奠定了基础。