冷冻等处理对不同孵化进程的卤虫卵存活率的影响

研究了冷冻、双氧水和干燥处理对处于不同孵化进程中的卤虫卵的存活率(孵化率)的影响。冷冻对未经孵化处理的卵的孵化率影响很小,冷冻1~8周,基本保持不变。孵化进行了3h的卤虫卵,冷冻8周后,其孵化率降低了10个百分点。孵化进行了6h的卤虫卵,冷冻8周后,其孵化率降低了31个百分点。孵化进行了9h的卤虫卵,冷冻8周后,其孵化率降低了40个百分点。处于不同孵化阶段的卤虫卵经冷冻处理8周后,再经3%双氧水处理10min和40℃干燥处理6h,其孵化率表现为不同的特点。未经孵化处理卵的孵化率基本保持不变。孵化进行了3h的卤虫卵,其孵化率再次降低5个百分点。孵化进行了6h的卤虫卵,其孵化率再次降低了20个百分点。孵化进行了9h的卤虫卵,其孵化率再次降低了37个百分点。     

锦鲤疱疹病毒囊膜蛋白ORF59的克隆、分析及其主要B细胞表位区的原核表达

从感染锦鲤疱疹病毒（Koi herpesvirus,KHV）的锦鲤（Cyprinus carpiokoi）肾脏组织中提取DNA,通过PCR扩增了KHVORF59基因。该基因全长411bp,所编码的蛋白包含136个氨基酸,分子量14.3kDa,等电点（PI）6.91,有12个潜在的O糖基化位点。此研究克隆的KHVORF59基因第130位碱基由G突变为A,使其编码的第44位氨基酸由Ala突变为Thr。采用DNAStar程序,在综合分析二级结构柔性区、蛋白的亲水性、表面可能性和抗原性指数的基础上,预测了KHVORF59蛋白主要B细胞表位,并将其区段的编码序列与KHVORF59完整编码序列分别克隆入原核表达载体pET-32a（＋）,构建重组质粒pET32a-ORF59S和pET32a-ORF59C,转入大肠杆菌Rosetta菌株,IPTG诱导表达。SDS-PAGE及WesternBlot分析显示,pET32a-ORF59S可以高效表达,表达的截短KHVORF59蛋白主要以可溶性形式存在,采用HisBindResin填料,层析纯化了该截短蛋白。     

日本鳗鲡谷胱甘肽过氧化物酶 1 和 4 的克隆、分析和组织表达分布

采用RACE技术,克隆了日本鳗鲡(Anguilla japonica)谷胱甘肽过氧化物酶1和4(GPx1、GPx4)基因的完整编码序列(Complete coding sequence,CDS)。GPx1基因全长993bp,5′非编码区(UTR)29bp,CDS573bp,3′UTR372bp,PolyA19bp;第803-898位碱基(位于3′UTR)形成1个硒半胱氨酸插入序列(Selenocysteine insertion sequence,SECIS),协助144-146位密码子TGA编码Sec。GPX4基因全长1048bp,5′UTR115bp,CDS561bp,3′UTR346bp,polyA26bp,第766-863位碱基(位于3′UTR)形成1个SECIS,协助299-301位密码子TGA编码Sec。GPx1包含190个氨基酸,分子量21.4kD,等电点8.04,第21位氨基酸具有1个潜在的N-糖基化位点。GPx4包含186个氨基酸,分子量21.4kD,等电点8.85,第68位和153位氨基酸具有2个潜在的N-糖基化位点。GPx1、GPx4均具有Sec、Trp、Gln和Asn构成的催化四联体。日本鳗鲡与其他脊椎动物相比,GPx1的核苷酸序列一致性为42.7%～60.2%,氨基酸序列一致性为56.4%～80.4%;GPx4的核苷酸序列一致性为46.5%～60.2%,氨基酸序列一致性为59.9%～81.2%。进化分析显示,脊椎动物的GPx1、GPx4分别占据进化树的不同分支。利用Swiss-Model预测了日本鳗鲡GPx1、GPx4单体的3D模型,序列分析显示,GPx1可以形成1个同源四聚体。本研究在克隆日本鳗鲡β-actin基因部分CDS序列的基础上,采用Real-timeRT-PCR方法,检测了日本鳗鲡GPx1、GPx4基因表达,比较了GPx1、GPx4在鳃、皮肤、肌肉、肝、脾、肾、肠组织中的表达变化,发现在鳗鲡的肠、肌肉、肝脏等组织中GPx1、GPx4明显表达,并且GPx1的表达量高于GPx4。     

微粉中药“黄藿散”对正常小鼠炭粒廓清指数和血清溶血素含量的影响

为探讨微粉中药“黄藿散”对正常小鼠非特异性免疫和体液免疫功能的影响。将49只昆系小鼠随机平均分为7组,即高、中、低剂量微粉组,高、中、低剂量粗粉和生理盐水对照组。各组连续灌服6 d后,分别测定各组小鼠的炭粒廓清率和血清溶血素含量的变化。结果表明,黄藿散微粉的3个剂量和粗粉的中、高剂量,均可显著提高正常小鼠的碳粒廓清指数和血清溶血素含量(P<0.01或P<0.05),且微粉的整体作用明显优于普通粗粉。表明黄藿散具有促进正常小鼠非特异性免疫和体液免疫功能的作用。     

Pseudomonas stutzeri|A1501基因组结构及功能注释

采用全基因组“shotgun”方法完成了固氮斯氏假单胞菌A1501的全基因组序列测定,并进行了基因组结构与功能注释分析。A1501基因组全长4 567 418 bp,含有4 146个ORFs。该基因组中已鉴定了42个编码转座酶的重复序列,这些序列的存在预示着转座现象在A1501菌中非常活跃,预示该菌与其他生物之间基因交流可能比较频繁。比较基因组表明,为了适应特定的生存环境,假单胞菌在基因组结构和遗传信息容量上产生了明显的分化。此外,基因组分析鉴定了A1501环境适应的遗传基础,包括物质转运、信号传导和趋化系统等,这些系统是细菌能够在根际土壤环境中保持竞争力以及能够与水稻形成高效联合固氮体系的关键。A1501基因组的完成为进一步开展功能基因组学和蛋白质组学研究奠定了基础。     

利用花粉管通道法将耐草甘膦基因mG2-epsps 导入玉米自交系的研究初报

构建了含有耐草甘膦基因mG2-epsps的植物表达载体pUmG2,采用花粉管通道法将其导入优良玉米自交系X90中,对Tn代1542株植株进行草甘膦喷洒实验,共得到32株能够耐受0．25％草甘膦药液的抗性植株;对这32株抗性植株的PCR检测结果表明,其中29株为PCR阳性植株,平均转化率为1．88％;Southern杂交和Western杂交检测结果证明mG2-epspps基因已整合至玉米基因组并正确表达。     

电子束辐照对赤拟谷盗保护酶系的影响

研究了赤拟谷盗Tribolium castaneurn（Herbst）不同虫态（3-4龄幼虫、1-2龄蛹和羽化1天成虫）体内过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、超氧歧化酶（SOD）活力在电子束辐照条件下的变化。结果表明,赤拟谷盗不同虫态的POD活力：羽化1 d成虫〉1-2龄蛹〉3-4龄幼虫;CAT活力：羽化1 d成虫〉1-2龄蛹〉3-4龄幼虫;SOD活力：3-4龄幼虫〉1-2龄蛹〉羽化1 d成虫。辐照处理后,保护酶活力随辐照剂量的增加呈先上升后下降的趋势,赤拟谷盗3种虫态POD活力均在500 Gy辐照剂量最高;3-4龄幼虫和1-2龄蛹CAT活力在420 Gy辐照剂量最高,羽化1 d成虫300 Gy最高;3-4龄幼虫和1-2龄蛹SOD活力在420 Gy辐照剂量最高,羽化1 d成虫500 Gy最高。本试验结果有助于阐明电子束辐照对储粮害虫的生理生化效应。     

低温对贵州山地红玉芒采后贮藏品质及生理生化的影响

研究低温对贵州山地红玉芒果实采后贮藏品质及生理生化的影响,为红玉芒等贵州山地芒果的采后贮藏保鲜提供方法及理论支撑,以贵州山地红玉芒果实为试验材料,通过低温(15±1)℃处理与常温18～25℃处理的对比实验,测定失重率、转黄指数、病情指数、丙二醛和可溶性固形物含量等相关品质及生理生化指标。结果表明:低温贮藏可以较好地维持红玉芒果实的外观品质,保持较高的超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性及较低的过氧化物酶活性,可抑制失重率、转黄指数、病情指数、丙二醛和可溶性固形物含量的上升及可滴定酸和V_C含量的下降,还能延缓呼吸高峰的出现和降低呼吸强度。低温贮藏可作为贵州山地芒果贮藏保鲜方法。     

丹参的药理作用

丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhizaBge.的干燥根及根茎,丹参味苦,性微寒,入心、肝经,具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦等功效,现代药理研究发现丹参对心血管系统有显著影响,对脂质代谢及中枢神经系统都有作用,抗菌作用及抑降血糖作用明显,笔者对丹参的化学成分,药理作用等进行了全面总结,具体内容如下:     

家畜妊娠诊断技术研究进展

家畜的妊娠诊断技术是提高繁殖效率的重要措施之一.文章主要介绍了目前在家畜早期妊娠诊断中常用的几种方法,并对以后的诊断技术进行了展望.