病毒性神经坏死病病毒核酸检测用标准物质的制备

利用基因克隆和体外转录技术,制备病毒性神经坏死病病毒(Nervous necrosis virus,NNV)核酸检测标准物质。设计NNV RNA2基因的特异性引物,通过RT-PCR获得目的片段并连接至p GEM-T载体;采用体外转录方法,获得大量纯品RNA。初步定量稀释至约10~8 copies/μL,均匀性检验结果显示样品间差异5%;稳定性检验表明,室温(20~25℃)保存7 d、冷藏(2~8℃)保存1个月和冷冻(-20℃)保存6个月的含量均无明显变化。采用核酸浓度测定与拷贝数换算的方法,对转录的RNA片段进行定值,并根据委托单位的定值结果进行不确定度估算。核酸标准物质定值为(8.452±0.068)×10~8 copies/μL,可用作NNV核酸检测的标准质控品。     

马鼻肺炎诊断方法研究进展

马鼻肺炎的病原是马疱疹病毒l型和马疱疹病毒4型,属于疱疹病毒目,疱疹病毒科,a疱疹病毒亚科,通常会引起呼吸道疾病和病毒性流产,严重时引发神经性疾病。该病毒在世界范围内流行,对养马业和赛马业的危害很大。本文总结国内外近些年关于马疱疹病毒的病原学和血清学诊断方法的研究成果,了解国际上关于马鼻肺炎检测诊断方法的研究进展,为出入境赛马的马鼻肺炎的检验检疫提供可靠的检测方法。     

基于多元统计法的黄皮果实品质评价指标的选择

为科学地简化黄皮果实品质的评价指标,以22份不同黄皮种质为试材,采用主成分分析和系统聚类法对测得的果实单果重、果形指数、可食率、可溶性固形物含量、可滴定酸含量、总糖含量、维生素C含量等13项常规指标进行分析.主成分分析结果表明,这13项指标反映的黄皮果实品质可用3个主成分来表示(累计贡献率达84.8951％).根据这3个主成分对13项品质指标的特征向量进行系统聚类,可将这些指标划分为5类.从这5类指标中分别选取单果重、果形指数、可滴定酸、总糖及糖酸比5个简化指标对黄皮果实品质进行聚类分析,在欧氏距离2.07时,可将供试的22份不同种质分为3类,这一结果与实际口感评价结果相吻合.     

荔枝龙眼种植采收技术

7月初许多迟熟荔枝如糯米糍、桂味、淮枝等成熟上市,迟熟产区如从化、粤北等地荔枝从6月下旬开始陆续采收上市。龙眼早熟产区如海南岛、雷州半岛、茂名地区等开始陆续成熟上市。目前,主要工作是及时采收,施肥,修剪,攻放秋梢。     

"仙婆果"荔枝

仙婆果荔枝母树生长于广东省惠东县增光镇大路村。其树干周长5.16米,树冠高10.5米,覆盖面积21×28米,生势壮旺,连年结果。树龄约500～600年。1仙婆果品种的特征特性1.1品种特性果大,平均单果重25克;果圆形或心形,果肩一边微隆起,果基微凹,果顶浑圆;果皮鲜红色,皮厚,韧,带有不规则的褐斑,龟裂片较大,隆起呈不规则圆锥形,裂片峰较尖,缝合线不明显,果梗微斜生;果肉黄蜡色,肉厚1.0～1.4厘米,肉质软滑略爽,清甜多汁,有一种特殊香味,含可溶性固形物19%～21%,100毫升果汁含维生素C43.27毫克,含酸0.8克,还原糖13.96克,蔗糖2.36克,可食率75%,品质优…     

供港澳家禽高致病性禽流感及H7N9病毒监测与分析

采集供港澳家禽喉头、泄殖腔拭子进行禽流感病毒监测,建立一步法荧光RT-PCR检测A型和H5、H7、H9亚型及H7N9病毒,所用高通量核酸提取和基因扩增体系可适应活禽出口快速检测通关的要求。2006—2015年共检测约150万份拭子,结果 H5和H7亚型高致病性禽流感全部为阴性,H9亚型等A型流感病毒阳性率约0.035%,冬、春季节检出率较高,H9亚型病毒HA基因与H7N9病毒广东流行毒株具有亲缘关系。供港澳禽流感病毒监测体系快速高效、生物安全性好,结合抗体监测和临床检查,可保证出口家禽处于无禽流感状态。     

进口猪产品中莱克多巴胺残留的快速检测

应用经验证可靠的ELISA方法,对进口猪产品进行莱克多巴胺残留快速筛选检测,对ELISA检测阳性的样品采用色谱质谱联用分析方法进行确证检测。1330份猪产品的检测结果显示,采用ELISA方法检出阳性率达11．4％（152／1330）;对ELISA阳性样品采用高效液相色谱-串联质谱（HPLC—MS／MS）或气相色谱-质谱方法（GC—MS）确证,阳性率达90．8％（138／152）。检测工作表明,综合运用快速筛选检验技术与确证检测技术可实现快速准确检测动物产品中莱克多巴胺残留,提高进出境检验工作效率。     

欧盟关于进口禽肉的要求

关于禽流感和新城疫的第三国划分的标准(93／342／EEC委员会)。欧共体委员会根据欧共体成立条约，根据1990年10月5日在共同体内的贸易和由第三国进口家禽和种蛋的动物卫生条件的90／539／EEC理事会指令，最后经92／65／EEC指令修正。     

多重PCR方法检测锦鲤疱疹病毒基因

根据对已报道的PCR检测方法灵敏性评价,以常用KHV病毒PCR检测的目的基因KHVSphI片段(AY568590)、KHV5/9(AF411803)和KHVTK基因(AJ535112)作为靶基因,设计并选择3对特异性引物建立的多重PCR检测体系用于KHV病毒多基因的检测。本研究建立的多重PCR体系具有较高的特异性,能够特异性扩增出KHVSphI片段290bp、KHV5/9片段484bp和KHVTK基因片段409bp,对锦鲤和鲤鱼的另外一种病毒性病原鲤春毒血症病毒检测结果为阴性。多重KHV病毒PCR体系检测KHVSphI、KHV5/9和KHVTK基因片段单一模板的检测下限分别为:10fg、100fg和100fg,在相同模板浓度的情况下,KHVSphI、KHV5/9和KHVTK基因片段同时被检出的检测下限为100fg。对KHV病毒感染组织的检测结果表明,多重KHV病毒PCR检测结果与常规PCR检测结果基本吻合,在多重PCR检测体系中KHVTK基因片段检测的灵敏度高于检验检疫行业标准方法。结果表明,多重KHV病毒PCR检测方法能够快速、准确和灵敏地检测KHV病毒基因。     

大中型动物进口检疫工作衔接供给侧改革的若干思考

本文以"去库存、降成本、补短板"等三个供给侧改革主要项目为突破口,从强化顶层设计的角度,分析了出入境检验检疫机构在进口大中型动物检疫业务工作中的新思路和新方向,提出了农业质检等机构强化协调、盘活资源、提高效能、服务行业和人民群众的若干建议。