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161.
椴树组织培养中污染控制技术初步研究 总被引:12,自引:0,他引:12
针对椴树组织培养过程中外植体容易污染,而且难以控制等问题,采用次氯酸钠(商品名为安替福民)对不同季节的外植体进行消毒处理。结果表明:在4~5月份取当年生的嫩茎或萌蘖,其污染率在10%以下;采用水培苗结合10%的安替福民消毒15min 320万单位/L的青霉素 160万单位/L的链霉素浸泡35min,或采用水培苗结合10%的安替福民消毒15min 480万单位/L的青霉素 160万单位/L的链霉素浸泡30min,其污染率为3%。10%的84消毒液处理种子30min或15%84消毒液处理种子20min,污染率为0,效果最为理想。 相似文献
162.
163.
本研究旨在检测绵羊组织中朊病毒受体37kDa/67kDa LRP/LR mRNA水平并探讨其与朊病毒组织嗜性的关系.选用背景相似的6只内蒙绵羊,提取组织RNA.反转录RT-PCR构建cDNA模板;利用本研究前期构建的标准质粒及标准曲线,对组织中该受体mRNA水平进行Real-time(实时)荧光定量PCR检测.结果表明,大脑皮质中的受体表达水平最高(P<0.05),其次为心脏和脑干,中等表达的器官依次为海马、小脑、脾脏、丘脑、肠系膜淋巴结、肝脏和肾脏,表达量最低为肺脏(P<0.05).结果提示,朊病毒受体--37kDa/67kDa LRP/LR在绵羊各组织中的表达量高低与朊病毒的复制程度有一定的相关性,受体LRP/LR表达量较高的区域朊病毒复制水平相对较高.结果提示朊病毒入侵机体后,组织器官PrPsc聚集程度可能与受体37kDa/67kDa LRP/LR表达水平相关. 相似文献
164.
冰核细菌对仁用杏花粉超微结构的影响 总被引:6,自引:1,他引:5
应用透射电镜对几个仁用杏品种接种冰核细菌并低温处理后的花粉超微结构进行观察, 发现冰核细菌对花粉的超微结构有很大影响: ( 1) 使花粉壁的覆盖层在某些区域解体消失或整个花粉外壁缺失; ( 2) 使花粉中的细胞器受到破坏, 包括线粒体被膜不完整, 嵴呈囊泡状; 内质网呈同心圆卷绕或折叠状排列包围部分细胞质而形成膜内含物; 核糖体数量明显减少等。因为花粉中细胞器的破坏, 花粉细胞内部形成一些空腔, 花粉失去生活力。接种冰核细菌并低温处理比单纯低温处理对花粉超微结构的破坏程度加重。 相似文献
165.
羊痒病 ( Scrapie)是致命的神经退化性紊乱疾病 ( TSE)的原型 ,目前在世界许多地方流行。1 羊痒病发病机理尽管该病常发生在老年母羊、公羊及阉羊中 ,但大多已报道的美国羊群痒病病例多为 3~ 5岁母羊。临床上绵羊痒病发生日龄较早 (大约 2 4月龄 ) ,与其它流行地区相比具有不同的遗传背景。自然传播感染母羊产的羔羊的发病率很高 ,并且在出生后 60~ 90 d危险性更高。在产羔期间 ,成年绵羊和山羊与感染羊同舍饲养也可能被感染。已经在胚盘和胚膜中检测到一种传播性因子和 Pr P蛋白。当具有传染性的组织或液体污染了圈舍、饲料、饮水或… 相似文献
166.
猪瘟RT-PCR ELISA诊断方法的建立 总被引:6,自引:0,他引:6
将RT—PCR方法和高灵敏度的地高辛检测系统相结合,先建立猪瘟病毒(classicalswinefevervirus,CSFV)的RT—PCR方法,用地高辛标记RT—PCR产物;再建立CSFV的PCR—ELISA方法,用生物素标记的探针在链亲和素包被的微量板孔中杂交捕获地高辛标记的PCR产物,最后进行免疫显色得出结果。试验主要对RT—PCRELISA的各种反应条件进行了优化,确定了1mg/L的链亲和素、50μg/L生物素标记的探针、1:3000抗地高辛的过氧化物酶、37C杂交2h等为最适反应条件。该方法的敏感性比常规琼脂糖凝胶电泳检测高100倍以上,克服了组织样品中CSFV含量少而难以检测的困难,为猪瘟的早期诊断和分子流行病学调查提供了一条新途径。 相似文献
167.
以去势雌兔作为对照,用高胆固醇饮食法复制动脉粥样硬化(AS)模型,研究了利维爱(Livial)在防治兔动脉粥样硬化过程中对雌激素受体和低密度脂蛋白受体mRNA表达的影响。应用RT-PCR方法,β-actin做内参照,对各组去势雌兔心脏、肝脏组织内雌激素受体和低密度脂蛋白受体mRNA的表达进行了检测。结果,2种受体在兔心脏和肝脏内均有表达。对照组,雌激素受体在心脏、肝脏内的相对表达量分别为0.43±0.12、0.39±0.20;低密底脂蛋白受体在心脏、肝脏内的相对表达量分别为0.27±0.05、0.86±0.12,差异显著(P<0.001)。AS模型组,雌激素受体和低密度脂蛋白受体在心脏、肝脏内的相对表达量分别为0.29±0.03、0.27±0.06和0.04±0.01、0.17±0.02,2种受体的mRNA表达均比对照组降低,差异显著(P<0.001)。利维爱组(饲喂高胆固醇饲料同时给予利维爱),雌激素受体在心脏、肝脏内的相对表达量为0.41±0.09、0.36±0.06,与模型组相比表达量显著提高(P<0.001),与对照组表达量接近;低密度脂蛋白受体在心脏、肝脏内的相对表达量为0.04±0.02、0.18±0.04,与模型组比较未见显著变化。由此认为,组织内2种受体的mRNA表达量降低可促进动脉粥样硬化的发生;利维爱通过提高组织内雌激素受体mRNA的表达可防治AS的发生与发展,对低密度脂蛋白受体的mRNA表达影响较小。 相似文献
168.
实时荧光定量PCR检测PrP基因表达标准品质粒和标准曲线的构建 总被引:4,自引:1,他引:4
对金黄地鼠P rP基因序列进行分析,选择其高度保守区域设计引物,对金黄地鼠各组织提取mRNA,经RT-PCR扩增,产物纯化后与pGEM-T-easy连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选后得到重组标准品质粒,对重组标准品质粒进行酶切、PCR和测序鉴定,表明P rP基因保守区段已经成功克隆。将107~102拷贝/反应的重组标准品质粒进行荧光定量PCR,10次重复C t值平均分别为17.50±0.5、21.38±0.2、25.29±0.7、29.12±0.7、31.34±0.4、33.89±0.1,系统自动分析软件显示C t值与标准品浓度的对数之间存在良好的线性关系,回归系数为0.998。对动力学曲线分析表明,在该反应体系和反应条件下,该标准曲线的灵敏度为102拷贝/反应。荧光PCR P rP基因表达检测标准品质粒和标准曲线的建立,为检测P rP基因的组织特异性表达和动物传染性海绵状脑病发生的分子机理奠定了基础。 相似文献
169.
牛分支杆菌侵入巨噬细胞的机制,主要是由哺乳动物细胞侵袭蛋白(Mammalian cell-entry proteins,Mce)介导的,在牛分支杆菌的致病机理中具有重要的作用。为了探讨Mce4A蛋白在牛分支杆菌致病机理中的作用,用不同浓度的重组Mce4A蛋白刺激肺泡巨噬细胞,结果显示,Mce4A蛋白抑制巨噬细胞的活性;用重组Mce4A蛋白、MtbPPD、MbPPD和BCG刺激肺泡巨噬细胞,结果表明,Mce4A蛋白促使肺泡巨噬细胞TNF-α、i NOS和IL-6的表达上调,而对IL-12的表达没有影响。MbPPD和BCG促使肺泡巨噬细胞TNF-α、i NOS、IL-6和IL-12的表达上调;MtbPPD促使肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-6和IL-12的表达上调,但是对i NOS的表达却没有影响。由此可见,Mce4A蛋白能够促使巨噬细胞分泌炎性细胞因子,促使机体发生炎性反应,在宿主细胞免疫应答反应中具有重要的作用。 相似文献
170.
为建立一种适于野外对无症状口蹄疫病牛的检疫方法,以便应用于对从云南入境的进口偶蹄兽实施检疫,我们用“O”型细胞弱毒和"Asia I”型乳鼠弱毒BHK_(21)细胞适应毒的细胞病毒悬液,以透析方法浓缩提纯,制备口蹄疫琼脂扩散抗原,用入境的受检牛血清样品作试验,部分材料同时进行血清中和试验和查毒试验(Probang test),证明了我们自制的琼脂扩散抗原对病牛可以全部检出,同血清中和试验完全一致,18个月间共检疫入境牛342头,剔除阳性后,均未造成口蹄疫的爆发。 自制的琼扩抗原没有型特异性,可出现两条沉淀线。当经加温灭能后,则仅与相对应的阳性血清出现沉淀线,而与异型血清不出现反应,具有型的特异性。我们建立的琼脂扩散试验不仅可用作检疫,並可用作口蹄疫定型。现将一年多来的试验研究报告如下。 相似文献