甘南牦牛CYGB基因的克隆及生物信息学分析

【目的】探讨甘南牦牛CYGB基因的分子结构特征及生理功能。【方法】提取甘南牦牛血样基因组DNA,以其为模板PCR分段扩增后拼接得到CYGB基因,测序后进行生物信息学分析。【结果】克隆出甘南牦牛CYGB基因,其长度为8 484bp,含有4个外显子和3个内含子,外显子长度分别为143,232,164和34bp,内含子长度分别为5 175,280和2 379bp,可编码190个氨基酸残基,氨基酸编码存在明显的密码子偏倚现象。与普通牛相比较,甘南牦牛CYGB基因存在73处核苷酸变异位点,其中2处发生在外显子2区域,氨基酸序列未发生改变;71处发生在内含子区域。甘南牦牛CYGB拥有"three-over-three"类型的螺旋"三明治"折叠结构。系统发育树分析表明,甘南牦牛CYGB与黄牛、绵羊等物种之间存在较高的同源性。【结论】成功克隆了甘南牦牛CYGB基因,为进一步研究牦牛CYGB的遗传特性和生理机制奠定了基础。     

甘南牦牛NGB基因的克隆及序列分析

【目的】对甘南牦牛NGB基因进行克隆和序列分析,同时探讨NGB的生理功能。【方法】采用TA克隆法克隆甘南牦牛NGB基因,运用多种软件对其基因序列及编码产物的结构、功能进行了生物信息学分析。【结果】甘南牦牛NGB基因全长3 844bp,包括4个外显子和3个内含子,其内含子中存在2个反向重复序列和1个正向重复序列;牦牛NGBCDs区全长456bp,其编码产物是由151个氨基酸残基组成的可溶性蛋白质,分子质量约为16 876.36u,理论等电点为4.86,推测NGB编码产物可能在牦牛物质运输和结合、能量代谢等过程中发挥着重要作用;系统发育树分析表明,甘南牦牛NGB与牛、藏羚羊等物种之间存在较高的同源性。【结论】甘南牦牛NGB基因的成功克隆,为进一步研究牦牛NGB的遗传特性和生理功能奠定了基础。     

三色堇新品种‘百堇3号’

‘百堇3号’是以四倍体三色堇自交系DSRFY-4-2-2-1为母本,二倍体三色堇自交系08H-3-2-1-2为父本杂交选育的新品种。该品种花大,上瓣紫色镶金边,侧瓣和下瓣黄色基部有褐色斑块;株形紧凑,长势旺,耐寒,是优良的花坛和盆栽品种。     

金银花花粉生活力测定及贮藏研究

[目的]对不同贮藏条件下金银花花粉生活力进行测定,以期为金银花生产、科研提供参考。[方法]以金银花新鲜花粉为试材,通过I-KI染色法、TTC（氯化三苯基四氮唑）染色法、培养基萌发试验法对花粉生活力进行测定,并研究了不同贮藏条件对花粉萌发的影响。[结果]培养基中添加不同浓度的蔗糖和硼酸对花粉的萌发有促进作用,其浓度分别为150、30mg/L时花粉的萌发率最大值为75.23%和52.78%;I-KI染色法不宜用于金银花花粉生活力测定;采用TTC染色法测定金银花花粉生活力达80.46%。[结论]TTC染色法测定金银花花粉生活力相对准确且简便易行。在金银花花粉贮藏过程中低温贮藏（-80℃）好于冷藏（4℃、-23℃）,不宜常温贮藏。     

一种新型DNA标记技术——限制性位点扩增多态性(RSAP)的建立与优化

为了避开基于限制性酶切位点分子标记技术的DNA酶切环节,简化其复杂的程序,试验以辣椒为材料,建立了一种新型DNA标记技术——限制性位点扩增多态性(RSAP),并对其反应体系进行了优化,对RSAP适用性、重复性进行了检验。结果显示,RSAP技术的引物为2条长度均为18 bp的引物,引物的3′端为4~6个碱基的限制性酶切位点序列,接着是12~14个碱基的随机序列,2条引物的限制性位点和随机序列不同;PCR扩增的前5个循环采用35℃的退火温度,随后的35个循环采用48℃的退火温度;在25μL反应体系中,模板DNA用量为20 ng,M g2+浓度为2.5 mm o l/L,dNTP s浓度为0.2 mm o l/L,T aq DNA聚合酶用量为1.5 U,2条引物浓度均为600 nm o l/L;RSAP技术重复性好,适用性广泛,是一种操作简便、产率中等、稳定可靠的DNA标记技术。     

三色堇叶片叶绿素质量分数、气孔特征及光合特性

以4个不同地区来源的三色堇品种08-H2(荷兰)2、29-18(酒泉)、EP1(上海)和ZMY2-1(郑州)为试材,研究了其叶片叶绿素质量分数、气孔特征对光强和CO2的响应特性。结果表明:①4个三色堇品种叶片叶绿素a的质量分数平均为1.06 mg/g,叶绿素b为1.93 mg/g。品种EP1的叶绿素b的质量分数显著高于ZMY2-1,4个品种在叶绿素a的质量分数上无差异。②三色堇叶片气孔密度平均为97.09个/mm2,气孔大小为17.74μm×12.31μm,品种间无显著差异。③三色堇的光饱和点和光补偿点较高,具有阳生C3植物的特点。08-H2的高光饱和点,显示其为强阳性品种。EP1的光饱和点和光补偿点均最低,显示其具有一定的耐弱光性。④各品种的CO2饱和点均达到设定的CO2摩尔分数的最大值(2 000μmol.mol-1),08-H2的CO2补偿点最低、羧化效率最高,显示其Rubisco的羧化活性较高。     

EPO及EPOR在成年牦牛菱脑中的表达与分布

[目的]了解成年牦牛(Bos grunniens)菱脑中促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)及其受体(erythro-poietin receptor,EPOR)的表达分布特征,对其与低氧适应性之间的关系进行探讨.[方法]利用qRT-PCR及免疫组织化学技术,对EPO及EPOR在牦牛菱脑中的表达与分布...     

甘肃西门塔尔牛高台类群MSTN基因多态性与生物信息学研究

为分析甘肃西门塔尔牛高台类群MSTN基因的遗传多态性、变异特征及MSTN基因的基础数据。采用PCR-SSCP方法检测了62头高台西门塔尔牛MSTN基因的多态性,对群体内各等位基因进行了克隆,得到西门塔尔牛MSTN基因的完整CDS区序列及部分5'端和3'端UTR区,并进行了相关生物信息学分析。高台西门塔尔牛MSTN基因第1和3外显子只发现一种纯合基因型,第2外显子发现一种杂合基因型。序列分析结果表明,高台西门塔尔牛MSTN基因第2外显子在41bp处发生了C→T的突变,第1和3外显子无突变。生物信息学分析表明,西门塔尔牛MSTN基因CDS区全长1128bp,编码375个氨基酸残基组成的蛋白质,分子量约为42.5kD,理论等电点为6.14;二级结构是以β-转角和无规卷曲为主。西门塔尔牛MSTN与牦牛、绵羊等物种之间存在较高的同源性。统计结果表明,甘肃西门塔尔牛高台类群MSTN基因未发现有多态,对MSTN生物信息学的分析表明,甘肃西门塔尔牛高台类群MSTN是一个由375个氨基酸残基构成的不稳定的可溶酸性蛋白质,二级结构预测为一个混合型蛋白。本研究结果为进一步研究甘肃西门塔尔牛高台类群MSTN基因的遗传特性和生理机制奠定了基础。     

中国南瓜经济性状遗传初探

对55个中国南瓜自交系及其23个F1代4个重要经济性状进行调查,分析了各性状的变异程度、性状间的相关及杂种一代的优势表现.结果表明,各性状在不同材料间差异明显,平均变异系数达35.88,反映了中国南瓜遗传资源相当丰富.单果质量与产量呈极显著正相关(r=0.5574);而可溶固形物含量与单果质量及产量呈显著负相关,相关系数分别为-0.3872和-0.3142;果形指数与单果质量、可溶固形物含量、产量相关性则无显著相关性.南瓜产量和单果质量的正向杂种优势明显,杂交育种潜力较大;而果形指数负向超优势明显,F1趋向扁盘状.     

Lactobacillus helveticus|ND-01高密度培养条件的优化及冻干发酵剂的制备

瑞士乳杆菌Lactobacillus helveticus ND-01是一株分离、筛选自新疆酸马奶中的乳酸菌,并且在发酵牛乳的过程中能产生较高的ACE-Ⅰ抑制活性和γ-氨基丁酸。实验通过对L.helveticus ND-01培养基的组分进行优化,从而得出L.helveticus ND-01优化培养基配方为：乳糖25 g/L,大豆蛋白胨14.1 g/L,酵母粉14.1 g/L,醋酸钠15.3 g/L,柠檬酸纳6.5 g/L,K2HPO42.2 g/L,MgSO4.7H2O 2 g/L,MnSO4.5H2O 25 mg/L,吐温-80 1 g/L,L-半胱氨酸盐酸盐750 mg/L,维生素B9（VB9）20 mg/L。L.helveticus ND-01在此培养基中经42℃,18 h培养,其活菌数可达到4.2×10^8cfu/mL,比MRS中（8.2×10^7cfu/mL）提高近5倍。将此优化培养基作为基础培养基,在5 L发酵罐中,经优化发酵条件,其活菌数可达到3.1×10^9cfu/mL,发酵液离心收集菌体,加入保护剂,冷冻干燥后活菌数可达到2.5×10^10cfu/g。冻干菌粉经90 d的低温贮藏,其存活率为81.20%。