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多重RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒 总被引:5,自引:0,他引:5
为了检测、区分猪传染性胃肠炎(TGE)和猪流行性腹泻(PED),建立了同时检测这2种疾病痛原体的多重PCR方法。参考GenBank登录的TGEV和PEDV纤突蛋白S基因序列,经DNAsis 2.0比较分析。分别筛选出TGEV、PEDVS基因相对保守区。以TGEV TH-98株(GenBank登陆号为AF494337)和PEDV CV777株(GenBank登陆号为NC003436)为参考模板,利用软件Primer3设计合成了2对寡核苷酸引物,以ST细胞培养的TGEV和PEDV毒株核酸为模板。利用所设计的2对引物进行多重RT-PCR扩增,结果同时得到与试验设计相符的499bp(TGEV)和199bp(PEDV)的扩增条带。而对其他3种猪病原的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明。建立的多重RT-PCR方法可检测出10pgTGEV RNA和100pg PEDV RNA。 相似文献
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本研究使用Vero细胞复苏繁殖猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)DR13株,并通过蔗糖梯度超速离心、SDS-PAGE电泳纯化PEDV DR13株的N蛋白和M蛋白.结果PEDV DR13株具有致Vero细胞病变能力,TCID50为105.12/mL;获得的PEDV... 相似文献
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新发猪流行性腹泻病毒ORF3基因的遗传进化分析 总被引:1,自引:0,他引:1
从浙江地区分离的2株代表性样品与全国范围内流行的参考毒株进行比对和遗传进化分析,结果分为4个组,代表性样品与大部分国内的毒株落入G4-2组,与国内早期CH-S毒株核苷酸(氨基酸)同源性为98.4%~98.5%(99.1%~99.6%);以华南地区为主的2011-2012年分离的毒株自成一组,与中国其他地区的毒株的同源性为95.0%~97.2%,与其余3组比较有9个核苷酸的变异。遗传进化分析表明所分离毒株与大部分中国的流行毒株属于一个基因型;以2011-2012年中国华南地区为主的毒株成为PEDV的一个新的基因型;提示2011-2012年中国流行着2种PEDV的基因型。 相似文献
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山地果园牵引式双轨运输机排绳装置的设计 总被引:1,自引:0,他引:1
针对山地果园牵引式双轨运输机的牵引钢丝绳在弯曲起伏轨道上使用时易出现乱绳、挤绳等问题,设计了一种双螺旋式自动排绳装置。在分析该装置的设计要求、基本组成和工作原理基础上,对装置的链传动、滑块换向曲线、导向拨叉的结构参数和排绳轮的受力进行分析,并进行综合排绳测试试验。测试结果显示,原驱动装置加装排绳装置后,绕卷16m的钢丝绳,其钢丝绳充满系数平均增加22.6%,功耗平均增加0.026kW·h,振动噪音平均降低0.75%。这表明该排绳装置具备有序排绳、耗能少和降低驱动装置振动噪音等优点。 相似文献
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近景摄影测量提高裸露地表粗糙度测量精度 总被引:1,自引:2,他引:1
微波遥感观测量对地表参数敏感,可用于对土壤水分、地表粗糙度和植被信息的定量提取。地表粗糙度参数实测值,是遥感反演结果验证、精度评价,以及各类遥感反演算法中的重要参量,但一直缺少一种简便、快捷、高精度的获取手段。该研究将近景摄影测量方法和微波遥感领域传统地表粗糙度测量的针板法进行对比,分析2种方法均方根高度及相关长度的测量结果,表明近景摄影测量法可以有效提高粗糙度实地测量精度;以近景摄影测量法全角度粗糙度参数的均值作为实测真实值,表明传统针板法测量的均方根高度误差达到12%~35.1%,相关长度误差最大能达到19.6%~62.4%;分析了采样间隔和采样数目对粗糙度测量的影响,表明针板法采用1 cm的间隔是实际地表较好的选择,但仅采用2个方向均值的测量方法必然带来很大误差,同时得出测量次数大于12时,测量结果趋于稳定并可认定为真值的结论;此外,研究表明,在一些传统针板法无法提取粗糙度的情况,近景摄影测量法依然有效。该研究表明,近景摄影测量法的非接触式、高精度、采样间隔及采样频率可调节等特征,为微波遥感工作提供了有效的地表粗糙度地面实测手段。 相似文献