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81.
82.
人工抗凋亡蛋白PTD-Bcl-x L能保护多种因素引起的细胞异常凋亡,为了获得高纯度Bcl-x L与PTD(Protein transduction domains)的融合蛋白,首先采用TRIzol法提取SD大鼠肝脏总RNA,将RNA反转录为c DNA,设计引物以c DNA为模板,PCR扩增Bcl-x L基因,构建p UM19-T-Bcl-x L质粒,并对质粒双酶切鉴定和测序鉴定;其次设计包含PTD序列的Bcl-x L引物,以测序正确的p UM19-T-Bcl-x L质粒为模板,PCR扩增PTD-Bcl-x L序列,将扩增序列克隆入p ET28a载体,构建PTD-Bcl-x L蛋白的原核表达质粒p ET28a-PTD-Bcl-x L,并对p ET28a-PTD-Bcl-x L载体双酶切鉴定和测序鉴定;将p ET28a-PTD-Bcl-x L重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,并对IPTG诱导融合蛋白表达的浓度和诱导时间进行了优化;SDS-PAGE分析表达蛋白的可溶性情况,在变性条件下用Ni-NTA琼脂纯化融合蛋白;最后用SDS-PAGE、Western Blot及质谱对融合蛋白进行鉴定。结果表明:双酶切p UM19-T-Bcl-x L质粒出现约774 bp大小条带,p UM19-T-Bcl-x L质粒测序结果与NCBI数据库比对序列一致,表明成功构建p UM19-T-Bcl-x L质粒;双酶切p ET28a-PTD-Bcl-x L质粒出现约744 bp大小条带,p ET28a-PTD-Bcl-x L质粒测序结果与预期序列一致,表明成功构建了p ET28a-PTD-Bcl-x L原核表达载体;在IPTG诱导下p ET28a-Bcl-x L重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出36 k Da大小蛋白,最优IPTG诱导浓度为0.1 mmol/L,最佳IPTG诱导时间为6 h;SDS-PAGE电泳显示融合蛋白主要出现在菌液超声后的沉淀里,以包涵体形式表达,经Ni-NTA琼脂纯化获得了高纯度的融合蛋白;Western Blot和质谱鉴定证明IPTG诱导表达蛋白和纯化的融合蛋白为PTD-Bcl-x L蛋白。纯化得到了PTD-Bc L-x L融合蛋白,推进了PTD-Bcl-x L蛋白在猪、牛等家畜精液冷冻保存的应用进程。 相似文献
83.
生物柴油的主要组分含有不饱和双键,分子碳链较长,含氧量在10%左右,这些特殊的燃料组分和分子结构对NOx的形成有重要影响。为了探讨燃料组分和结构对NOx排放的影响规律,运用Chemkin软件中的闭式均相反应器模型,模拟了元素组成相同或相近、分子结构类似的若干组物质NOx的生成,考察了饱和程度、碳链长度、含氧量对NO,NO2生成和燃烧温度的影响。研究结果表明,双键数量越多,燃烧温度升高,NOx的生成速率越快,NOx的生成量越大;较长的碳链在一定程度上能抑制NOx的生成;较高的含氧量能促进燃烧温度的升高,导致NOx生成量增大。 相似文献
84.
试验对水牛发情周期血清和唾液中雌二醇(E_2)和孕酮(P_4)的浓度变化规律、水牛唾液结晶与卵泡发育变化分别进行了分析研究,为进一步探讨水牛发情规律、指导生产提供依据。采用酶联免疫分析法(ELISA)测定发情母水牛血清和唾液中E_2和P_4的浓度变化,并对血清和唾液的激素变化规律进行相关性分析。结果表明,水牛血清和唾液中的E_2和P_4呈波动性变化。发情前期,唾液中P_4浓度一直维持在6.50~7.10 ng/mL,发情第13天达到11.09 ng/mL,随后快速下降。唾液中E_2浓度在发情第3~5天出现一个峰值178.53 pg/mL,在第14~17天唾液中E_2浓度显著升高,出现第二个峰值179.10 pg/mL。母水牛唾液中E_2和P_4浓度的变化趋势与其在血清中的变化趋势基本一致,均呈显著相关(P0.05);唾液中E_2与P_4浓度呈极显著相关(P0.01)。水牛发情当天唾液结晶呈现明显的蕨类作物形状且分维值显著低于其他时间点(P0.05)。水牛发情周期唾液结晶图形的变化与卵巢卵泡发育基本同步,可作为监测水牛发情及预测排卵的可靠指标之一。 相似文献
85.
雏鸡葡萄球菌病的诊断与防治 总被引:1,自引:0,他引:1
1流行病学调查1997年4月22日,该户从外地购进1日龄海兰雏鸡(鉴别雌雄后的小公鸡)2200只,在预制结构楼上平面育雏,喂给“希望”饲料。30日龄时,雏鸡长势参差不齐,成活1988只,成活率90.4%,因鸡只不断长大,楼上房间地面较小,于5月24日... 相似文献
86.
87.
为了研究河流型水牛HSP70基因CDS序列的多态性,试验首先从摩拉水牛、尼里/拉菲水牛、槟榔江水牛、地中海水牛冷冻精液中抽提基因组DNA,以基因组DNA为模板扩增获得河流型水牛HSP70基因,对其进行基因克隆,测序,序列分析;其次对26头摩拉水牛、43头尼里/拉菲水牛HSP70基因CDS序列进行测序、高分辨率熔解曲线检测分析。结果显示:河流型水牛的HSP70基因CDS序列长度为1927bp,4个品种HSP70基因CDS序列相似度高达99%以上;摩拉、尼里/拉菲种公牛HSP70基因CDS序列存在相同的SNP位点,分别是C602T、A708T、A1284G,并产生不同的基因型。摩拉公牛HSP70基因CDs区602bp位点、尼里/拉菲602bp位点处于Hardy-Weinberg不平衡状态。试验结果说明了HSP70基因在进化上具有高度保守性,但在同一群体中存在多态性。 相似文献
88.
广西以水牛品种杂交改良为抓手助推现代特色农业产业发展 总被引:1,自引:0,他引:1
广西是全国水牛存栏量最多的省份。据调查统计,2015年广西水牛奶产量全国排名第1位。2007年国务院印发《关于促进奶业持续健康发展的意见》(国发[20077]31号)中明确把发展南方奶水牛养殖作为解决奶业发展“北多南少”矛盾的主要途径。2014年《广西壮族自治区人民政府关于做大做强水牛奶业的意见》(桂政发[2014]16号),明确要求把奶水牛业培育成广西农业经济的一大新兴特色支柱产业。 相似文献
89.
为了提高努比亚山羊繁殖力,研究同期发情技术在努比亚山羊上的处理效果,试验分别采用CIDR+PMSG+PG、CIDR+FSH+PG、孕酮海绵栓(自制)+PMSG+PG 3种方法对努比亚山羊进行同期发情处理。结果显示:CIDR+PMSG+PG、CIDR+FSH+PG方法同期发情率相同,略高于孕酮海绵栓(自制)+PMSG+PG方法,但差异不显著(P≥0.05);CIDR+FSH+PG方法受胎率最好,孕酮海绵栓(自制)+PMSG+PG次之,CIDR+PMSG+PG效果第三,但差异不显著(P≥0.05)。 相似文献
90.
[目的]研究干旱沙漠区灌溉量对骏枣果实产量及品质的影响.[方法]在分析沙地田间土壤水分动态及田间耗水规律的基础上,探讨不同处理灌水量对滴灌骏枣果实性状、产量及品质的影响,研究沙漠区适宜红枣生长的土壤水分下限.[结果](1)骏枣产量与灌溉量之间关系符合Y=-277.5X2+1 114.5X+ 5535,相关系数R2=0.990 6,且灌水量在553 mm左右时,骏枣的水分生产率最高,65;处理灌水量相比对照减少了20.09;,水分生产率提高了23.66;.(2)骏枣果实糖分积累始于膨大前期,积累最快的时期为果实成熟期.(3)灌水量越少枣果实可溶糖含量越高,65;处理可溶性糖含量较对照提高了5.52;,且一级果较对照提高了21.23;.[结论]在干旱沙漠区骏枣的土壤含水量应控制在田间持水量的65;左右,既能保证红枣生长发育过程中对水分的需求,又能使灌水生产率达到最大,红枣的品质最佳. 相似文献