家蚕微孢子虫蓖麻毒蛋白B链基因RBL463-4的克隆及在毕赤酵母中的表达

基于家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)基因组中发现的蓖麻毒素B链(ricin B chain)序列数据设计引物,提取感染Nb第8天的家蚕幼虫中肠组织总RNA,利用RT-PCR方法扩增出RBL463-4基因,并将其克隆进毕赤酵母表达载体pPICZα-A中,构建重组酵母表达载体pPIC-R4。重组质粒pPIC-R4经SacⅠ线性化后,电击导入毕赤酵母X33中,利用博莱霉素(zeocin)筛选获得重组酵母X33/RBL463-4。以2%甲醇诱导表达后,经SDS-PAGE、Western blot检测表达产物,结果出现25kD和20kD2种蛋白,其中25kD蛋白与预测融合蛋白大小一致,表明获得了RBL463-4的融合蛋白。研究结果为进一步探究RBL463-4蛋白在家蚕微孢子虫侵染宿主过程中的功能作用奠定了基础。     

家蚕微孢子虫全基因组分析支持微孢子虫与真菌的亲缘关系

微孢子虫(microsporidia)是一类细胞内专性寄生的单细胞真核生物,虽然分子生物学的研究证据表明其与真菌(fun-gi)存在亲缘关系,但这些证据均是基于单个或少数几个基因构建系统进化树而得出的。利用家蚕微孢子虫全基因组数据,采用基于基因同源性的Darkhorse基因组统计方法,鉴定家蚕微孢子虫基因组中每个基因的来源谱系,并通过全基因组谱系可能性指数(lineage probability index,LPI)分析微孢子虫与其他物种的亲缘关系。结果表明家蚕微孢子虫与其他微孢子虫的LPI加权平均值为0.93,具有最近的亲缘关系,与真菌界的LPI加权平均值为0.65,与原生生物界的LPI加权平均值为0.38。由此证明微孢子虫与真菌存在着更近的亲缘关系,微孢子虫门属于真菌界而非原生生物界。     

重庆市铜梁·桂园都市生态农业园区规划与实践

以重庆市铜梁·桂园都市生态农业园区为例,对生态农业观光园区规划主题定位为“都市生态农业园”,通过对园区总体布局规划,产业项目策划,园林景观专项规划,将城郊型生态观光农业园区相关规划理论融入实践, 以期为以现代都市为依托的城郊型生态观光农业园区规划提供借鉴。     

山地果园生草栽培技术研究与应用

果园生草栽培技术是现代果园首选的土壤管理制度,它能控制不良杂草对果树和果园土壤的有害影响,克服传统果园管理模式导致的土壤有机质大量消耗及水土流失的弊端,增加土壤有机质含量,改善土壤团粒结构,提高土壤保水、保肥能力,从而提高果实品质。本文系统地介绍了山地果园生草技术试验,阐述了果园生草技术对果园环境效应改良方面的影响,以期为果园的可持续发展、推广果园生草栽培技术提供参考。     

小果冬青种实性状研究

小果冬青多分布在南方高大山脉及其余脉,适宜生长在海拔600～1100 m的阔叶林中.文章观测了不同种源的小果冬青种实性状,测定果实的横径、纵径、千粒重、千粒脱水重、种子数、发芽率和发芽势等指标.使用主成分分析法和聚类分析法对这些数据进行处理,结果表明:不同种源的小果冬青果实的性状指标存在较大差异.主成分分析中第一主成分表明果实的横径和纵径都与千粒重有关;第二主成分表明小果冬青的果实形状跟所含的种子数及发芽率有一定相关性;第三主成分表明种子含水率与种子的发芽势相关.再通过聚类分析,可以得出所有种源按千粒重划分成适中、偏小和偏大三类,结合主成分分析计算出的综合得分排名,围绕着千粒重这个关键指标,江西修水和重庆种源在纵径数据上是没有差异而聚类;江西婺源和浙江宁波P2种源因为含水率和脱水后重量2项指标是相似的聚为一类.     

几个因素对菲律宾蛤仔组织培养的影响

研究了不同消毒剂和培养基对菲律宾蛤仔组织培养的影响.结果表明,在术必泰消毒剂醋酸氯己定(C26H36O4N10C12)的有效浓度为100～200μg·mL-1、或复方新洁尔灭中苯扎溴铵(C21H38BrN)的有效浓度为300～600μg·mL-1时,既能有效杀灭粘附在组织块上的细菌,又能保持细胞活性而不影响细胞生长.在D-MEM、M199和RPMI-1640 3种培养基中,蛤仔的外套膜和鳃细胞均能正常生长,其中D-MEM、M199的培养效果优于RPMI-1640.     

池州浓香型特色品种的挖掘与筛选利用

[目的]为筛选出具有较强生态适应性的浓香型特色品种,确定池州地区最佳栽培种。[方法]本研究根据产区浓香型烟叶质量风格形成的生态条件,结合工业企业对质量的需求特点,对6个品种（K326、NC55、NC71、0508、云烟99、烟240）进行比较和筛选。[结果]结果表明0508产值量最高, NC71产值量中等、化学成分比较协调,该项研究在质量水平和特色风格等方面进行系统评价,进一步明确了各品种浓香型风格特色强度和利用价值。[结论]认为 NC71为地区最佳栽培品种,建议下年将NC71作为示范品种。地区特色品种的挖掘筛选及利用的研究及研究方法的探讨对烟草生产行业有重要意义。     

外源褪黑素对高温胁迫下厚皮甜瓜幼苗光合及抗氧化特性的影响

以厚皮甜瓜‘迎春’杂交种为试材,采用营养钵种植法,设5种不同浓度(50、100、150、200和250μmol/L)的褪黑素(MT)溶液,以清水为对照,经MT溶液处理后对幼苗进行高温胁迫(昼43±1℃/夜32±1℃)4d。通过测定幼苗叶片光合参数及SOD、POD和CAT等生理生化指标,研究外源MT溶液对高温胁迫下幼苗叶片光合作用及抗氧化特性的影响。结果显示:高温胁迫下喷施不同浓度MT溶液,可不同程度地提高厚皮甜瓜幼苗叶片中光合色素含量、光合能力及抗氧化酶活性,与对照相比,200μmol/LMT处理时,厚皮甜瓜幼苗叶片中叶绿素含量和净光合速率达到最高峰,分别为4.43、8.87μmol/(m~2·s);SOD、POD和CAT活性也达到最大,分别为211.28、24.77和376.92U/g;且MDA含量降到最低,为7.93μmol/g。结果表明,高温胁迫下外源MT能增强厚皮甜瓜幼苗抵抗力,且浓度为200μmol/L时效果最佳。     

植物学课程考核达标分析

该文分析了1个样本班级植物学的考核结果,得出课程平均分为79.19,平均达标值为0.792,总达标率为80.8％,其中名词解释和选择题所有学生全部达标,论述题达标率最低,仅为65.4％,总分及格的21个学生中有1个学生问答题不达标,4个学生论述题不达标,这5个学生课程考核均已通过,但课程的知识应用能力并未达到课程的考核要求,从而暴露出考试总分掩盖了具体知识点甚至重要知识点的掌握情况,不能真正反映学生对课程的学习情况.建议在用总分评价课程考核结果时,兼顾重要知识点的考核,把工科专业工程教育认证的理念引入进来,对课程标准中的所有课程目标逐一开展考核,所有课程目标都达标的才认为课程考核通过.     

家蚕微孢子虫总蛋白两条大分子量主带的LC-MS/MS分析

为了深入认识家蚕微孢子虫高分子量蛋白的主要组成,我们采用LC-MS/MS技术鉴定分析玻璃珠破碎法提取的家蚕微孢子虫总蛋白中85kD以上两条主要蛋白带。我们从H1带(位于150～200kD之间)中成功鉴定出16个蛋白,包括极管蛋白3(PTP3)、极管蛋白2(PTP2)、真核蛋白翻译起始因子(eIF2C2)、延伸因子(EF1-alpha、EF2)、肌动蛋白(actin)等。这暗示两种结构蛋白PTP3与PTP2以及蛋白翻译延伸因子(EF1-alpha、EF2)与肌动蛋白(actin)可能各形成一个复合体。并且用SDS或β-巯基乙醇处理时,这两个复合物是稳定的,表明这些复合物的相互作用力不仅仅是通过二硫键。H2带(85～100kD)鉴定出主要集中在水解酶、蛋白合成与折叠、细胞结构、运动四个方面的20多个的蛋白。从两条蛋白带鉴定出PTP3与PTP2、三磷酸腺苷酶(ATPase)或过渡期内质网三磷酸腺苷酶(ATPase-TER94)、蛋白翻译因子(eIF2C、EF1-alpha、EF2)、HSP70、Actin、M1家族氨肽酶1(M1family aminopeptidase)6类蛋白。基于蛋白分子质量分析,暗示在家蚕微孢子虫中,这6类蛋白都可能是以复合体形式呈现的。研究结果丰富家蚕微孢子虫高分子量蛋白的数据,同时,为研究非二硫键间的蛋白互作提供了有价值的研究线索。