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41.
人防御素(HNP)是一类广谱抗菌阳离子小肽的总称,一般具有3个分子内二硫键。防御素对于细菌、真菌乃至某些被膜病毒有广谱杀伤作用,是免疫系统中的重要组分。实验根据已发表的HNP-1cDNA序列,设计并合成了一对引物。以HL-60细胞总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增目的片段并克隆到pUC18载体上,经筛选获得阳性重组子pUC18-HNP-1(pDFS1)。测序分析证实,扩增片段即为HNP-1cDNA。pDFS1再经SmaI与SalI酶切、插入pGEX-6p-1质粒构建HNP-1表达载体。利用PCR技术和酶切反应筛选转化子最终获得pGEX-6p-1-HNP-1(pDFS2)重组质粒。 相似文献
42.
洋葱细胞质雄性不育系与相应保持系线粒体DNA的RAPD分析 总被引:6,自引:0,他引:6
运用RAPD技术对洋葱细胞质雄性不育系A和相应保持系B的线粒体DNA(mtDNA)进行了100个单引物的多态性研究。结果表明69个引物有扩增,表现出多态性的有12个,然后随机选取不育系A和保持系B各9株验证多态性片段在单株中的稳定性,有两种引物A13和E14扩增出的多态性片段表现稳定。 相似文献
43.
44.
通过PCR方法克隆了从我国哈尔滨分离的一株鸡贫血病毒(CAV)的VP2基因,并对之进行了测序,该基因的开放读码框由65bp组成,编码216个氨基酸。通过将本次克隆的基因与GenBank收录的CAV的VP2基因比较,同源性至少为99%,未发现与本次克隆的VP2蛋白完全一致的CAV分离株,与之同源性最好的是CIA-1的VP2蛋白,相差1个氨基酸,与Cux-1也仅相差2个氨基酸,因此从该蛋白看CAV哈尔滨分离株的变异程度不很高。比较这27株病毒的VP2及其基因序列,发现共有31处核苷酸发生变异,这些变异将导致VP2的12个氨基酸变化,尽管他们散布于整个VP2,但在186到191号氨基酸区域存在一个没有报道过的变异程度相对较高的区域,CAV的VP2是相对较保守的蛋白。 相似文献
45.
几种与肝再生有关的细胞因子研究概况 总被引:1,自引:0,他引:1
肝脏是机体具有强大再生能力的重要器官之一 ,当肝脏被部分切除或受到药物 (如四氯化碳 ,D -氨基半乳糖胺等 )毒害后 ,剩余的或未受损害的肝细胞可以分裂增殖 ,使肝组织再生恢复到原来的体积。有关肝细胞再生的调控机理的研究国际上已进行了百余年 ,近年来 ,研究发现了肝细胞分裂受内分泌、旁分泌和自分泌等多种因素的影响[1] 。目前已知的与肝细胞再生有关的因子很多 ,包括表皮生长因子 (epidermalgrowthfac tor,EGF) [2 ] ,胰岛素 (insulin) ,转化生长因子 -α(transforminggrowthfa… 相似文献
46.
47.
48.
猪肺炎支原体PCR诊断方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
建立了一个PCR检测猪肺炎支原体(Mhp)的方法。根据国外发表Mhp 16sr RNA基因设计了一对特异性引物,扩增出一个大小为653bp的特异性片段。将PCR产物克隆并测序表明,与GenBank的Mhp的序列的同源性为89.2%。而对于常见的猪呼吸道疾病有关的病原胸膜肺炎放线杆菌、支气管败血波氏杆菌、多杀性巴氏杆菌以及牛支原体、羊支原体不能扩增出特异性片段;PCR的敏感性实验显示这对引物能够检测到1ng的DNA,结果表明此方法特异、敏感。 相似文献
49.
一步法快速纯化mRNA 总被引:2,自引:0,他引:2
介绍一种针对 R N A、m R N A 的理化及生物学特性,在酸性胍一步抽提法基础上加以改进,并配合oligo (d T)) 纤维素亲和层析法纯化提取m R N A 的方法, 此法具有简便、经济、快速、重复性好等多种优点。本实验通过对 Hela 细胞、兔脾脏组织、菜豆苗m R N A 的分离提取, 并运用甲醛变性凝胶电泳及分光光度计检测, 证明采取此法所获得的m R N A 完全符合实验要求, 可广泛应用于c D N A 文库的建立、核酸探针制备、逆转录 P C R 多项生物学技术。 相似文献
50.
GFP与GnRH/TRS融合基因表达载体的构建及表达 总被引:3,自引:0,他引:3
应用基因工程技术构建GnRH/TRS与绿色荧光蛋白的融合基因,核酸序列测定和Western boltting印迹分析基因表达;激光共聚焦荧光显微镜观察活细胞内荧光布局。结果融合基因获得了正确表达,GnRH/TRS-GFP融合基因的瞬间和稳定表达均获得了相同结果。GnRH/TRS-GFP融合蛋白具有绿色荧光蛋白的自发荧光特性,且不影响Gn-RH/TRS分子在细胞内的正确表达,为低促性腺激素性功能减退综合征治疗的进一步研究奠定了基础。 相似文献