重组水蛭素的原核表达及分离纯化

为了提高水蛭素的生产效率以适应生物医药应用的需求,试验通过对水蛭素基因进行密码子优化,构建了重组水蛭素原核表达系统,并对D600nm值、诱导时间、诱导剂IPTG浓度和诱导温度4种诱导条件进行了探索,同时通过引入试验设计(design of experiment,DOE)方案将4种因素对诱导效率的影响进行进一步系统的优化,使用His-Trap亲和层析对重组蛋白进行纯化,并通过凝血酶滴定法对重组水蛭素的活性进行测定。结果显示,试验成功构建重组水蛭素原核表达载体,水蛭素蛋白为可溶性表达。单因素变量优化后的诱导条件为:在菌体密度D600nm值为0.4时,加入1mmol/L IPTG,37℃下诱导7h,重组水蛭素蛋白表达效率最高,占菌体总蛋白66.5%;而DOE试验优化结果为:在菌体密度D600nm值为0.6时,加入0.82mmol/L IPTG,31.9℃下诱导7.6h,预测重组水蛭素蛋白表达效率最高,占菌体总蛋白72.7%,显著高于单因子变量法优化结果(P0.05)。进一步分析发现,各影响因素之间存在明显的交互效应,影响了单因素试验结果的准确性。通过亲和层析纯化后的重组水蛭素纯度可达99%,抗凝活性为114ATU/mg。研究成功构建了重组水蛭素原核表达载体,对其表达条件进行了优化,并获得了重组水蛭素蛋白,为水蛭素应用于生物医药奠定了基础。     

猪胚胎早期卵裂时间与其发育潜能关系的初步研究

旨在探讨初次卵裂时间对猪孤雌胚胎发育潜能及其基因相对表达水平的影响。本试验从健康母猪卵巢上抽取卵母细胞进行体外成熟培养，将猪孤雌激活胚胎分为早期卵裂组（16~22 h）与晚期卵裂组（26~32 h）统计比较卵裂率和囊胚率，并对囊胚的多能性相关基因Oct4、Sox2、Klf4等和凋亡相关基因Bcl-xl、Bax、Caspase-3的相对表达水平进行分析检测。结果表明，猪孤雌激活胚胎在16~22 h发生卵裂的为50%~60%，而26 h之后发生卵裂的不到20%，在18 h前完成第一次卵裂的胚胎囊胚发育率为79%，42 h后发生初次卵裂的胚胎无法发育至囊胚期。猪孤雌激活胚胎早期卵裂组的囊胚发育率显著高于晚期卵裂组（P<0.05）。早期卵裂组囊胚的Oct4、Nanog、Sox2、Klf4基因的表达量显著高于晚期卵裂组（P<0.05），Oct4、Sox2、Klf4基因的相对表达量极显著高于晚期卵裂组（P<0.01），Bax和Caspase-3基因的相对表达水平极显著低于晚期卵裂组（P<0.01），而Bcl-xl作为保护因子其表达量相对于晚期卵裂胚胎（26~32 h）显著上调（P<0.05）。结果显示，初次卵裂时间较早的猪孤雌激活胚胎发育潜能显著高于较晚卵裂胚胎，其囊胚多能性相关基因表达上调，凋亡相关基因表达下调，卵裂时间可作为鉴定猪孤雌激活胚胎发育潜力的重要参数。     

重组水蛭素的原核表达及分离纯化

为了提高水蛭素的生产效率以适应生物医药应用的需求，试验通过对水蛭素基因进行密码子优化，构建了重组水蛭素原核表达系统，并对D_{600 nm}值、诱导时间、诱导剂IPTG浓度和诱导温度4种诱导条件进行了探索，同时通过引入试验设计（design of experiment，DOE）方案将4种因素对诱导效率的影响进行进一步系统的优化，使用His-Trap亲和层析对重组蛋白进行纯化，并通过凝血酶滴定法对重组水蛭素的活性进行测定。结果显示，试验成功构建重组水蛭素原核表达载体，水蛭素蛋白为可溶性表达。单因素变量优化后的诱导条件为：在菌体密度D_{600 nm}值为0.4时，加入1 mmol/L IPTG，37℃下诱导7 h，重组水蛭素蛋白表达效率最高，占菌体总蛋白66.5%；而DOE试验优化结果为：在菌体密度D_{600 nm}值为0.6时，加入0.82 mmol/L IPTG，31.9℃下诱导7.6 h，预测重组水蛭素蛋白表达效率最高，占菌体总蛋白72.7%，显著高于单因子变量法优化结果（P<0.05）。进一步分析发现，各影响因素之间存在明显的交互效应，影响了单因素试验结果的准确性。通过亲和层析纯化后的重组水蛭素纯度可达99%，抗凝活性为114 ATU/mg。研究成功构建了重组水蛭素原核表达载体，对其表达条件进行了优化，并获得了重组水蛭素蛋白，为水蛭素应用于生物医药奠定了基础。     

黄腐酸对植烟土壤改良及烟叶品质的影响研究

以云烟97为研究对象,通过大田试验,于2014年研究了不同黄腐酸施用量对植烟土壤改良及烟叶品质的影响。结果表明:施用黄腐酸提高了土壤速效磷、速效钾、碱解氮、有机质、土壤微生物生物量碳、土壤微生物生物量氮含量,并促进土壤中三大菌落的繁殖,但施用黄腐酸对土壤微生物多样性促进效果不明显;黄腐酸促进了烟株根系发育,提高了烟株根系体积,干、鲜重;烟株根系有随黄腐酸施用量增加而增加的趋势;施用黄腐酸降低了烤后烟叶两糖含量,适当提高了烟叶氯离子含量和钾离子含量,但有增加烟叶烟碱含量的趋势;施用化肥配施1200 kg hm-2黄腐酸的处理提升土壤微生物量碳、量氮的效果最好,烟叶协调性相对较好;施用化肥配施1800 kg hm-2黄腐酸的处理对土壤肥力的提升效果最好。     

基于粒子群算法的汽车电子节气门控制策略研究

汽车电子节气门控制系统是一个变化的复杂性的过程,由于电子节气门受到不稳定等因素的影响,常规PID控制策略很难达到理想的效果。采用粒子群(PSO)优化算法来优化PID控制器,设计出PSO-PID复合控制策略。完成了电子节气门PSO-PID控制器参数的设置及算法流程的设计,通过仿真分析出:电子节气门的PSO-PID复合控制策略可以减小控制系统的超调,减小瞬态误差,缩短滞后时间,适用于电子节气门控制系统。     

沙场秋点兵赛场试剑锋诸城市举办检疫大比武活动

为推动动物卫生监督执法队伍建设,提高动物卫生监督执法能力和水平,保障动物卫生安全和动物产品质量安全,充分展示动物卫生监督执法队伍形象,2012年9月21至22日,山东省诸城市组织全市动物检疫人员在华宝食品公司开展了动物检疫技能大比武活动。此次检疫技能大比武活动分为理论知识考试、检疫技能操作两个环节,有各镇街的13个代表队26名选手参加比赛。诸城市畜牧兽医管理局成立了检疫技能比武评委组,通过检疫理论考试和实践操作两个阶段的比赛,评选出6个团体奖和10名个人十佳。副市长鞠俊海参加活动并为获奖单位和个人颁奖。     

贵阳市第二环城林带森林资源评价

本文从森林资源现状、森林覆盖率、单位面积蓄积、林龄结构、林种结构、森林生态功能及景观功能等6个方面对贵阳市第二环城林带森林资源进行了评价。针对第二环城林带森林资源总量处于较高水平,森林资源质量不高、生态功能差、景观功能不高及森林资源有较强持续状态等特点,从技术、经济和机制等不同角度提出了保护和管理森林资源的建议。     

热解温度对玉米秸秆炭产率及理化特性的影响

【目的】通过对不同热解温度条件下玉米秸秆炭理化特性的分析,探索玉米秸秆炭具有较高利用价值的炭化温度。【方法】以玉米秸秆为原料,采用低氧升温炭化法,在不同热解温度下 (100℃、200℃、300℃、400℃、500℃、600℃、700℃、800℃) 分别炭化2 h,制备生物炭,收集并测定了固体产物生物炭产率及特性。【结果】生物炭的产率随热解温度的升高逐渐降低。生物炭全碳含量和碳氮比随热解温度升高而升高,全氮含量在400℃以后随热解温度升高而降低。阳离子交换量 (CEC) 在400℃～600℃达到较高水平,为70.87～83.48 cmol/kg。随热解温度升高,玉米秸秆炭表面碱性含氧官能团增加、酸性含氧官能团减少,pH随着热解温度的升高逐渐增加,当温度达到400℃及400℃以上时呈碱性甚至强碱性。红外光谱分析表明,热解温度达到500℃时,纤维素和半纤维素已经完全分解;高温热解使玉米秸秆中–CH₃、–CH₂、–OH、–C=O间发生缔合或消除,促进芳香基团的形成。随着热解温度的升高,玉米秸秆炭的比表面积和比孔容均是先变大后变小,孔径先变小后变大,在400℃～600℃条件下,玉米秸秆炭的孔隙相对较为丰富,不同热解温度下玉米秸秆炭的比表面积和比孔容呈极显著正相关关系(P < 0.01)。【结论】综合各项指标,玉米秸秆的最佳热解温度为400℃～500℃,此温度下制备的生物炭产出率相对较高,氮、碳养分损失少,生物炭的理化性能和养分利用均达到最优。     

基于4种生态位模型的长芒苋潜在适生区预测

恶性入侵杂草长芒苋Amaranthus palmeri S.Watson对农业生产和生物多样性造成严重威胁。预测其潜在适生区对粮食安全和生物多样性保护至关重要。不同模型由于算法不同对长芒苋潜在适生区的预测结果存在差异。本研究综合4种生态位模型(MaxEnt、GARP、BIOCLIM和DOMAIN)预测长芒苋在我国的潜在适生区以提高预测准确性。结果表明,4种模型的平均AUC值均大于0.85。MaxEnt和DOMAIN的平均Kappa值大于0.81;BIOCLIM和GARP的平均Kappa值大于0.69。MaxEnt的预测精度和稳定性要略胜一筹。BIOCLIM和MaxEnt的预测结果较为收敛,DOMAIN和GARP预测的适生区范围较广,由此预测的长芒苋潜在适生区分别占我国陆地总面积的20.66%和32.38%,48.39%和49.76%。综合预测结果,长芒苋在我国的适生区主要集中在中东部地区,西北和东北地区则是长芒苋存在的边缘环境地区。     

过量锰对鸡大脑中锰、铜、铁、锌和钙的影响

本试验探讨锰(Mn)对鸡大脑中锰、铜、铁、锌和钙的影响.在饲料中添加600、900、1800 mg/kg MnCl2建立慢性锰中毒模型,分别在试验30、60、90 d剖杀鸡只取大脑组织,采用火焰原子吸收法进行锰、铜(cu)、铁(Fe)、锌(Zn)及钙(Ca)含量检测.结果发现:与对照组相比,各染锰组鸡大脑中锰、铜、铁含量升高,锌含量降低,呈一定时间一剂量效应:钙呈波动性变化.其中锰与铜呈显著正相关,锰与锌呈显著负相关.总之,摄入过量锰可使鸡大脑中锰、铜、铁、锌和钙5种金属元素含量发生变化,并呈现一定的相关性.过量锰引起脑内金属元素失衡,从而对鸡的中枢神经系统产生危害.