广西巴马小型猪miR-148b慢病毒制备及靶基因通路预测分析

[目的]构建广西巴马小型猪miR-148b慢病毒表达载体并对其靶基因进行预测及相关通路分析,为揭示miR-148b的作用机制打下基础.[方法]以广西巴马小型猪血液基因组DNA为模板,扩增miR-148b的前体及部分侧翼序列,使用T4连接酶将目的片段连接至pLV-CMV-MCS-EF1载体上,构建获得pLV-miR-148b慢病毒表达载体;以pLV-miR-148b慢病毒表达载体转染293T细胞48 h后进行表达验证;利用miRDB、miRWalk 2.0和TargetScan 7.2三大数据库预测分析广西巴马小型猪miR-148b的靶基因,并以MirPath v.3分析miR-148b靶基因相关通路.[结果]广西巴马小型猪miR-148b片段大小为385 bp,与miRBase 21.0网站上已发布猪miR-148b成熟序列(前体和侧翼序列)的同源性达100%.构建获得的pLV-miR-148b慢病毒表达载体能在293T细胞中成功表达,且相对表达量极显著高于pLV-GFP慢病毒空载质粒转染组(P<0.01).数据库预测分析得到18个广西巴马小型猪miR-148b的靶基因,分别为CLOCK(时间昼夜调控因子)、MIER1(转录调控因子)、MECP2(甲基化CpG结合蛋白)、ZNF704(锌指蛋白)、SPTY2D1(SPT2染色质蛋白)、QKI(RNA结合蛋白)、ZBTB20(锌指蛋白)、MGAT4A(钠/磷酸转运蛋白)、UHMK1(编码蛋白激酶)、PIK3C2A(磷酸肌醇-3-激酶2α肽)、C6orf62(6号染色体开放阅读框62抗体)、HECW2(E3泛素蛋白连接酶)、MAP1B(微管相关蛋白)、NHS(NHS肌动蛋白调节因子)、B4GALT6(β-1,4-半乳糖基转移酶)、ATP2A2(肌浆ATP酶/内质网Ca2+转运酶)、AP4E1(蛋白复合物接头分子)和BBX(锌指蛋白);且发现有11条靶基因相关通路,其中与疾病相关的通路有脂肪酸合成通路、细胞外基质受体相互作用通路、癌症的蛋白聚糖通路、神经胶质瘤通路、癌症的小分子核糖核酸通路、肾细胞癌通路、N-聚糖生物合成通路和致心律失常性右室心肌病通路.[结论]广西巴马小型猪miR-148b慢病毒表达载体能在293T细胞中成功表达,miR-148b存在18个靶基因和11条相关通路,且主要在脂肪酸合成、N-聚糖生物合成及致心律失常性右室心肌病等相关疾病通路上发挥作用.     

农村饮水工程水处理工艺现状研究

以绍兴县为例,对农村现有水处理设施和技术所面临的主要问题进行了探讨,并对各水处理单元技术进行了综合评价,指出了当前饮水工程中存在的问题,提出了适宜的水处理优化设想和建后管护措施的研究,为绍兴县饮水安全工程提供有效的参考。     

旱地小麦品种和自育高代品系资源抗旱性鉴定研究

干旱是影响宁夏春小麦产量的重要因素之一。为了研究小麦品种的抗旱性与形态或生理指标的关系,本试验通过室内模拟干旱条件。在生育期对不同抗旱性小麦品种和自育高代品系资源分别对抗旱系数、株高、株高胁迫指数、拔节期苗高、离体叶片持水力、叶片含水量等形态和生理指标进行了研究分析。结果发现,在干旱胁迫条件下,抗旱强的品种（系）株高胁迫指数、离体叶片持水力、叶片含水量与抗旱性中等和抗旱性弱的有一定差别。本研究将为小麦抗旱育种提供理论依据。     

杜仲低效林改造技术

杜仲低效林改造技术李建林（略阳县林技站，陕西略阳７２４３００）景跃民，杨森保（略阳县杜仲研究所，陕西略阳７２４３００）胡超（略阳县科委，陕西略阳７２４３００）近年来，各地营造了大面积的杜仲林。但因只注重数量，忽视质量，经营管理跟不上，形成大面积的低效...     

油菜茎象甲的生物学特征及防治研究

油菜茎象甲原是陕西渭北塬区白菜型冬油菜上的主要害虫,近年来对关中甘蓝型冬油菜的为害也越来越重,被害株率达４５．０％～６５．０％,受害株减产５０％左右。幼虫平均历期一龄５．５ｄ,二龄５．４ｄ,三龄至四龄合计为７．０ｄ,前蛹期与蛹期平均共２４ｄ左右;幼虫发育起点温度７．６７℃,幼虫期需有效积温１４９．９日度,蛹期发育起点温度７．９０℃,有效积温２２１．３日度。同时,对久效磷－羊毛脂涂茎防治幼虫的效果进     

推荐几个经济作物良种

一、大麦“浙皮2号”大麦浙皮2号是浙江省农科院作物所育成。该品种既可作饲料又可作啤酒原料。其产量比一般品种高5.8％～10％,最高亩产达375公斤,是目前江浙一带较理想的棉麦套种地区搭配品种。大麦浙皮2号秆矮抗倒、株型紧凑,分蘖力强,每穗结实18～20粒,千粒重36～d0克,抗赤霉病能力中等,易感染大麦黄花叶病,籽粒粗蛋白质含量10.97％～11.62％,淀粉含量62.50％～63.01％。该品种适于麦—稻—稻一年三熟及棉麦套种地区搭配种植,尤宜在迟茬口田块搭配种植,施肥量比一般品种适量增加。注意防治黄花叶病和赤霉病。     

青霉素对羊瘤胃纤维分解细菌的影响

反刍动物的瘤胃内容物中,共生着多种微生物群体。对植物中的主要组成成份——纤维素、半纤维素和木质素的分解、消化和营养成份的转化具有极重要的功能。其中瘤胃纤维分解细菌的存在和数量的变化,对营养转化的影响更为明显。因此,反刍动物应用抗菌药物,在近些年来引起了兽     

关于《重庆市实施〈中华人民共和国渔业法〉的办法（草案）》的起草说明

我市境内江河交错、水域广阔、渔业资源丰富。全市有各类水面170多万亩，其中江河水面130多万亩，此外还有可养鱼的冬囤水田200多亩，有各种鱼类120多种，其中江河鱼类达113种，属全国重点保护的珍贵鱼类4种，名贵鱼类和经济鱼类52种。多年来，     

使用抗生素添加剂应注意的问题

<正> 抗生素作为畜禽饲料中的添加剂应用已较为普遍。虽然它属于非营养物质,但将其添加到畜禽日粮中却能促进动物生长,提高饲料转化率。对单胃动物来说,可以节约营养物质、降低体内营养需要,抑制肠道内与宿主争营养的细菌并促进合成菌体蛋白被     

大白猪眼肌面积、估计瘦肉率和背膘厚的加权一步法全基因组关联分析

旨在使用加权一步法全基因组关联分析方法,充分利用群体的表型、系谱和基因型信息,探索与大白猪眼肌面积、估计瘦肉率和背膘厚相关的候选基因。本研究收集21 754头大白猪眼肌面积、估计瘦肉率和背膘厚的表型记录数据,其中基因型数据个体共1 259头。通过方差分析和加权一步法全基因组关联分析,确定性状显著相关的数量性状基因座(quantitative trait locus, QTL)。并进行基因注释、GO(gene ontology)功能和KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路富集分析。计算结果表明,大白猪眼肌面积、估计瘦肉率和背膘厚的遗传力分别为0.450 6±0.017 3、0.496 8±0.017 4和0.475 8±0.017 2。利用加权一步法全基因组关联分析,定位到与眼肌面积显著相关的候选QTL区域10个,与估计瘦肉率显著相关的候选QTL区域8个,与背膘厚显著相关的候选QTL区域12个。后续基因注释、GO功能和KEGG通路富集分析显示,与眼肌面积相关的候选基因36个,共富集到7个条目;与估计瘦肉率相关的候选基因29个,共富集...