橡胶树乳管细胞GPPS基因的克隆与表达分析

[目的]克隆橡胶树乳管细胞短链异戊烯基合酶(GPPS)基因,分析其表达特性和编码蛋白的相互作用,为解析该类基因在天然橡胶和萜类合成中的作用提供理论参考.[方法]采用逆转录PCR(RT-PCR)和cDNA末端快速克隆(RACE)从橡胶树乳管细胞胶乳中克隆GPPS基因(HbGPPS1和HbGPPS2),利用生物信息学分析其编码蛋白的特性;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测HbGPPS1和HbGPPS2在树皮和胶乳中的组织表达特异性、在不同橡胶树品系中的表达模式及其对割胶和外源茉莉酸甲酯(MeJA)处理的响应模式,并在原核细胞中进行表达分析;通过酵母双杂交技术检测HbGPPS1和HbGPPS2蛋白的相互作用关系.[结果]从橡胶树乳管细胞乳胶中克隆获得HbGPPS1和HbGPPS2基因,其中HbGPPS1基因编码框长度为1248 bp,编码415个氨基酸,蛋白分子量为45.9 kD,理论等电点为6.77;HbGPPS2基因编码框长度为1239 bp,编码412个氨基酸,蛋白分子量为45.6 kD,理论等电点为6.77.二者的核苷酸序列相似性为89%,且编码蛋白均含有2个典型的异戊烯基转移酶活性结构域DDXXD(D),定位于叶绿体和线粒体.HbGPPS1蛋白自身及其与HbGPPS2蛋白均能形成较弱相互作用的二聚体.qRT-PCR检测结果显示,Hb-GPPS1和HbGPPS2基因在胶乳中的表达量高于树皮,但均以HbGPPS2基因表达量较高,表明二者表达存在组织特异性.经MeJA处理后橡胶树胶乳中HbGPPS1和HbGPPS2基因表达量较对照高,即外源MeJA可促进内源茉莉酸的合成,激活乳管细胞内的茉莉酸信号从而上调HbGPPS1和HbGPPS2基因表达.在5个橡胶树栽培品系中,HbGPPS2基因的表达量均明显高于HbGPPS1基因,且与PR107、热研7-20-59、RRIM600和热研7-33-97干胶含量趋势一致,但二者仅在热研8-79和热研7-33-97的表达模式存在差异.HbGPPS2基因能在大肠杆菌中成功表达.[结论]HbGPPS2基因可能是乳管细胞中参与天然橡胶和萜类合成的主效基因,而HbGPPS1基因可能是功能冗余基因.HbGPPS2和Hb-GPPS1基因在不同橡胶树品系中的表达模式与各品系干胶含量呈正相关,可用作为干胶含量评估的筛选标记.     

溴氰菊酯与布氏杆菌M_5号菌苗同步气雾试验

我们在试验室使用溴氰菊酯与布氏杆菌M_5号菌苗(以下简称M_5号菌苗)同步气雾抑菌试验的摹础上, 为求证用于生产的可行性,今年选湖东种羊场一土杂种羊群进行了溴氰菊酯与M_5号菌     

秦巴山区野生果树种质资源研究概述

秦岭、巴山山区是我国暖温带和北亚热带气候的分开地区,也是我国野生果树资源分布最为丰富的地区之一。调查表明这里分布着26科、52属、164种落叶和常绿性野生果树,是我国一个宝贵的野生果树种质资源库,由于古地质和古气候的原因,这里至今仍保留着部分古老的孑遗植物,其中一些是我国所特有或世界上珍稀的野生果树。研究分析显示:秦巴山区野生果树中许多种类都含有其独特的营养成分,具行较高的利用价值,深入研究秦巴山区野生果树资源对探讨我国果树的起源与进化、促进对“第三代果树”的开发利用都将有重要理论价值和实践意义。     

盆栽葡萄新型方式

盆栽葡萄在我国有较长的历史，由于葡萄是藤本果树，枝条柔软，可以随意弯曲造形，所以葡萄是最常用于进行盆栽的果树之一。随着我国城镇建设的发展．利用盆栽葡萄美化居室、阳台、楼顶及道边，越来越受到广泛的重视。     

巧使蛋鸭“冬休”变“冬产”十措施

目前,农村有不少农户白白使自己饲养的蛋鸭在冬季"休闲"而减少了收入.笔者经过近几年的试验,摸索出了巧使蛋鸭"冬休"变"冬产"的10条措施.     

重视巨峰系品种充分发挥巨峰系品种优势

1 巨峰系品种在我国葡萄生产中有着重要的地位和作用 巨峰系葡萄品种是指以巨峰(Kyoho)为主以及以其为亲本选育出的一大类欧美杂交种四倍体鲜食葡萄品种,目前国内外已报导的巨峰系品种约180多个,我国栽培面积较大的约十余个品种.近年来,一些地区也将一些欧美杂交种品种如紫珍香、康太、悦香、大宝等品种归入巨峰系品种.严格来讲,巨峰系品种仅是指巨峰和与巨峰有亲缘关系的有关品种,但从栽培角度来讲,欧美杂交种品种都有着一些相似的生长结果习性和栽培特点,因而将这些品种归为一个品种类群有利于生产者进行栽培和利用.     

羔羊大肠杆菌病的诊治

羔羊大肠杆菌病是一种急性、败血性传染病,死亡率高,主要发生于数日龄至6周龄的羔羊。2004年3月,一养殖场羔羊发生一种以口鼻流沫、呼吸困难和胸膜肺炎为主要特征的疾病。根据发病情况、临床症状、剖检变化和实验室检验,确诊为大肠杆菌。     

特征香韵烤烟新品种(系)多指标综合评价

特征香韵烤烟新品种(系)‘中烟特香301’、‘特5’、‘特18’是通过EMS (甲基磺酸乙酯)诱变烤烟品种‘中烟100’所得,具有优异的烟叶品质。为明晰‘中烟特香301’、‘特5’、‘特18’在山东烟区的推广应用价值,本试验以山东烟区主栽品种‘中烟100’为对照品种在山东省日照市莒县与诸城市开展品种比较试验,从大田生育期、植物学性状、农艺性状、田间主要病害、经济性状、原烟外观质量及原烟内在质量7个方面分析各品种(系)的性状特点。结果表明,与‘中烟100’相比,两地各品种(系)表现出以下特点：株高略矮、茎围较粗、节距略短、最大叶长较长;大田抗病性较好;总糖与还原糖含量较高,烟碱含量稍低;产量、产值、上等烟比例较高;原烟外观质量较好。综上特征香韵烤烟新品种(系)在山东省日照市和潍坊市具有良好的推广应用价值。     

产植物激素拮抗细菌CX-5-2的筛选、鉴定及其特性研究

 利用高效液相色谱筛选到能够同时产生IAA和GA₃的细菌菌株1株,产GA₃的细菌菌株2株。生测结果显示,菌株CX-5-2对小麦的促生长作用最明显,10倍稀释发酵液处理比清水对照处理可使麦苗高度增加10.54%。利用反相高效液相色谱法明确了菌株CX-5-2在不同培养条件下产生GA₃和IAA的积累情况;通过细菌16S rDNA的保守序列鉴定,菌株CX-5-2为假单胞菌属。本研究表明利用高效液相色谱可快速高效地筛选产激素类植物促生菌。     

引起杨树湿心材的一种病原真菌--Fusarium proliferatum (Matsushima) Nirenberg

在我国,杨树湿心材是一种分布广危害严重的病害。１９９５～１９９６年从湖北、山东、河北、辽宁等省及北京地区的２０多种杨树的根、干部取样,分离到一种真菌,此菌在杨树的根、干部都有广泛的分布,依据其形态特征和培养形状,据Ｎｅｌｓｏｎ,Ｔ．Ｍ．（１９８３）《ＦｕｓａｒｉｕｍＳｐｅｃｉｅｓ》,此菌被鉴定为Ｆｕｓａｒｉｕｍｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ（Ｍａｔｓｕｓｈｉｍａ）Ｎｉｒｅｎｂｅｒｇ。室内和田间的多次接种结果表明,Ｆ．ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ致病力强,能产生典型的湿心材症状,是引起我国杨树湿心材的主要病原之一,这在国内外还是首次报道。电镜观察表明,此菌能破坏杨树导管—射线间纹孔膜,与国内外有关纹孔膜的报道一致。本文还讨论了细菌及生理因素在湿心材形成过程中的可能作用。