芜菁花叶病毒CP基因反向重复植物表达载体的构建及遗传转化

 针对芜菁花叶病毒外壳蛋白基因构建反向重复表达载体,利用农杆菌介导法将其导入四九菜心,PCR检测共获得13个阳性转化株,遗传转化效率为2%。     

利用cDNA-AFLP检测甘蓝雄性不育相关基因的时序性表达

 通过cDNA-AFLP技术分别对4种具有不同败育时期特征的甘蓝雄性不育材料和遗传背景一致的可育材料进行分析, 揭示了4种不育类型育性相关基因的时序性表达特征, 并对4种育性相关基因分别选取1个转录表达片段(TDFs) 克隆测序。结果表明, 获得的113条不同表达方式TDFs可分为12种模式: 其中按照不同雄性不育败育顺序表达中断的有A、B、C、D 4种模式, 分别代表造孢细胞期、花粉母细胞期、四分体前期和四分体后期发育中断的育性相关基因。这4种表达模式包括76条TDFs, 占总TDFs的67.25%。结合发育中断模型和序列分析结果, 推测糖基水解酶家族基因、具有VQ结构域的基因、富含甘氨酸蛋白和促进游离小孢子解离的果胶裂解酶基因可能分别参与上述花药发育4个时期雄性育性的建成。     

芜菁花叶病毒外壳蛋白基因的克隆与序列分析

将来自北京地区甘蓝和芥菜上的TuMV外壳蛋白基因片段分别克隆到pMD18-T载体中,测序并进行序列分析。结果表明:两者CP基因序列长度均为867个核苷酸,编码288个氨基酸,它们的核苷酸同源性为97·2%,氨基酸同源性为97.6%;两者与GenBank中的部分CP基因序列的核苷酸同源性在87.8%~97.8%之间,氨基酸同源性在91.7%~99.0%之间;分子进化树分析两者可归属World-B组。     

早熟甘蓝品种配合力研究初报

许多试验资料已经证明,从配合力优良的农作物品种原始材料中,往往比较容易分离出配合力好的自交系或自交不亲和系作为优良杂交组合的亲本。近年来,我们与北京市农科院蔬菜所合作,已经育成“报春”、 “双金”、“园春”等早熟甘蓝一代杂种在生产上推广、应用。随着生产的发展,品种需要不断地更新。因此,我们于1982、1983年春季,对14个早熟、中早熟甘蓝品种主要数量性状的配合力进行了初步研究,试图通过试验,进一步了解这些品种各主要数量性状的配合力,发现新的优良杂交组合及配合力好的早熟甘蓝品种,进而从中分离优良的自交系及自交不亲和系…     

不同生态型花椰菜采种中的几个问题

花椰菜（ Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ Ｌ． ｖａｒ．ｂｏｔｒｙｔｉｓ Ｌ．）亦称莱花或花菜。人们食用的花球是花椰菜的营养贮藏器官，它是由花枝和原始花蕾的聚合体组成。因其食用部分质地细嫩，营养丰富，深受广大消费者欢迎。 我国栽培花椰菜也有近百年的历史，初在南方栽培较多；近年来，随着人民生活水平的提高，我国各地特别是城市郊区花椰菜栽培发展很快。以北京市为例，７０年代初每年花椰菜栽培面积为１７００余亩，到１９８１年已发展到９０００余亩，现在已达２万亩以上。由于种植面积增加快，而花椰菜采种技术比较复杂…     

十字花科蔬菜芜菁花叶病毒的RT-PCR快速检测

利用RT PCR技术 ,建立了一种简便、快速、准确地检测十字花科蔬菜芜菁花叶病毒的方法。应用该方法 ,不需复杂的提取、纯化病毒RNA过程 ,直接对田间病样简单处理后进行RT PCR检测。通过获得包含该病毒CP基因的cDNA片段 ,对一些十字花科蔬菜田间病样进行了芜菁花叶病毒的快速检测     

国内外蔬菜育种及良种产业化发展动态

(续上期)2．2．2杂种优势育种 我国对蔬菜杂种优势的研究始于50年代,但是,直至60年代中期,杂种一代一直未应用于生产。70年代初,第一批用于生产的蔬菜杂种一代逐渐问世,如茄子杂种一代苏长茄(1964-1968),番茄杂种一代浦江一号和浙江1、2、3号(1970-1972),白菜杂种一代青杂早丰(1963—1971),甘蓝杂种一代“京丰一号”(1970—1973)等。70年代中到80年代初,蔬菜杂种优势利用研究获得更迅速地发展,     

二倍体马铃薯分子连锁图谱的构建

利用二倍体马铃薯亲本08675-21与09901-01及其125份杂交一代无性系进行AFLP分析, 按亲本来源构建与24条染色体对应的AFLP分子连锁图谱, 母本图谱含有75个标记, 覆盖基因组全长512cM, 平均图距为6.83 cM; 父本图谱含有95个标记, 覆盖基因组全长578 cM, 平均图距为6.08 cM。     

中国50个甘蓝代表品种EST-SSR指纹图谱的构建

【目的】研究甘蓝DNA指纹鉴定方法,并构建50份中国甘蓝代表品种DNA指纹数据库,为甘蓝品种特异性、真实性、纯度鉴定提供参考依据。【方法】首先,利用6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和来源不同的甘蓝材料对已开发的甘蓝EST-SSR引物进行筛选,获得多态性引物;然后将可用于甘蓝DNA指纹鉴定的核心引物正义链5′末端分别标记TAMRA、HEX、 ROX、6-FAM四种荧光,利用DNA分析仪检测不同等位变异的扩增片段大小,并确定每个等位变异的标准品种。利用核心引物扩增结合标准品种的片段大小,构建中国50个甘蓝代表品种的SSR指纹数据库。通过人工构建模拟群体对‘中甘21’品种真实性进行鉴定,进而对该指纹鉴定技术进行验证。【结果】利用6份来自中国不同生态条件、植物学性状差异较大的甘蓝品种对978对EST-SSR引物进行初步筛选,获得带型清晰、具有多态性的引物128对。进一步根据引物扩增带型清晰、多态性信息指数较高、不同等位变异的带型易于区分、在染色体上分布均匀原则,筛选出20对核心引物。该套引物可以检测甘蓝染色体20个位点的58个等位变异,平均每条染色体上被检测位点2.22个,平均每个位点包含2.9个等位变异,其中引物BoE607、BoE723等位变异数最多为5个,PIC值处于0.34-0.76之间。通过DNA分析仪检测显示等位变异扩增片段长度范围143-296 bp。利用20对核心引物构建50份中国甘蓝代表品种DNA指纹数据库,并阐述了甘蓝SSR-DNA指纹鉴定的应用和技术流程。本研究还对来自甘蓝主产区的31份‘中甘21’品种进行真实性鉴定,结果显示指纹鉴定与田间鉴结果完全一致。【结论】筛选获得20对核心引物,用于构建中国50个甘蓝代表品种DNA指纹数据库,通过构建人工模拟群体对‘中甘21’品种的真实性进行鉴定,准确率达100%。     

甘蓝类蔬菜育种团队50年发展的几点体会

中国农业科学院蔬菜花卉研究所甘蓝类蔬菜遗传育种团队(以下简称甘蓝类蔬菜育种团队)建立于1970年7月,至今已50年.现有老中青成员10人,是我国蔬菜科技界持续时间最长、成果丰硕的科研团队之一.