规模化养殖场种鸭新城疫和A型流感病毒带毒监测研究

自2007年7月至2008年4月,从规模化肉用种鸭场固定鸭群共采集360份气管和泄殖腔棉拭子,每份样品尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚5枚,共有78份样品鸡胚尿囊液有血凝性.通过血凝抑制、Dot-ELISA和病毒中和试验对分离病毒鉴定结果表明,所有分离病毒均为新城疫病毒,没有A型流感病毒.监测结果显示,鸭群气管和泄殖腔样品病毒分离阳性率最高值均出现在2007年9月,分别为87.5%和100%,平均值分别为14.6%和21.7%.     

2006年至2010年山东省鸡传染性支气管炎病毒分子变异的研究

为研究山东省鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的遗传变异规律,本研究2006年～2010年从山东省发病的商品鸡中分离鉴定了17株IBV,并对其S1基因、N基因和M基因分别进行RT-PCR扩增、测序及遗传进化分析.序列分析结果表明:与疫苗株H120相比,17个分离株S1蛋白的变异程度较大,存在广泛的基因突变和氨基酸替代,多数病毒株还存在氨基酸的插入;N蛋白无碱基的缺失和插入,仅存在核苷酸的突变和氨基酸的替代;M蛋白除病毒株CK/CH/SD09/005插入3个碱基外,其它16个分离株仅存在少数的碱基突变和氨基酸替代.S1基因、N基因和M基因的系统进化分析结果表明多数分离株的3个基因在进化上相对平行,与国内分离株LX4同属一个进化分支,同源性较高;分离株SDYT0605的3个基因与疫苗株H120同源性较高,可能是免疫压力下变异的疫苗株;分离株SDTA06111、SDWF0608和CK/CH/SD09/005的S1基因、N基因和M基因分属于不同的进化分支,可能发生了基因重组.本研究结果显示基因突变、插入和不同基因之间的重组是免疫压力下IBV变异的主要方式.     

不同药物对鸡败血霉形体病的治疗试验

鸡败血霉形体病是由败血霉形体引起的主要侵害鸡呼吸道的疾病,该病不仅可以经卵垂直传染,并且能引起饲料转化率降低。目前我国还没有有效的疫苗采用,防冶该病主要依靠抗菌素,为了探讨不同药物对该病的治疗效果,我们用不同的抗菌素对败血霉形体阳性鸡进行了治疗试验和净化方面的研究。     

禽四种病毒多重PCR诊断技术的建立和应用

根据禽呼肠孤病毒(ARV)、禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)和鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的基因保守区设计了4对特异性引物,建立了针对四种病毒的多重PCR检测体系,并对该体系进行了条件优化及特异性、敏感性试验.该体系扩增的四种病毒基因片断大小分别为199 bp(ARV)、264 bp(AIV)、362 bp...     

畜禽疫病防治与药物残留

我国虽是一个畜牧生产大国,但却是一个出口小国,出口肉类仅占总产量的１％。目前,动物疫病仍是制约畜牧业发展的重要因素,为防治动物疫病使用的药物、疫苗和饲料添加剂在动物食品中的有害残留问题也越来越突出,成为出口创汇的重大障碍,同时在政治上也造成极大影响。...     

国内禽流感疫苗的研究与应用

禽流感(Avian Influenza.AI)是由A型流感病毒(Avian Influenza Virus.AIV)引起的一种高度接触性传染病.鸡、火鸡、鸭等家禽及野鸟均可感染.由于AIV负链、分节段的RNA病毒性质,病毒很容易发生变异并不断的突破其感染宿主的种属障碍,引起新的流感流行.AIV据其致病性可分为高致病性AIV(Highly Pathogenic Avian Influenza virus,HPAIV)和低致病性AIV(Low Pathogenic Avian In-fluenza virus,LPAIV),感染家禽的HPAIV和LPAIV分别以H5和H9亚型为主.     

应用RT-PCR和病毒学方法诊断山东省鸡新城疫感染的比较研究

分别应用病毒分离和区分新城疫强弱毒株的RT—PCR技术,对山东各地疑似鸡新城疫感染的25份病料进行了实验室诊断。结果表明：从18份病料中既扩增到了新城疫强毒基因,也分离到了新城疫病毒;3份病料未分离到病毒,仅扩增到了新城疫强毒基因;4份病料分离到了新城疫病毒,但未检测到相关基因。研究表明,将RT—PCR和病毒分离鉴定两种方法相结合,可更好的满足快速、灵敏、准确的新城疫诊断要求。     

基于荧光显色的环介导等温扩增技术(LAMP)检测禽呼肠孤病毒

建立了一种基于荧光显色的禽呼肠孤病毒(ARV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法.该检测方法使用针对ARV的p10基因8个区域的6条LAMP引物,能够在等温(63℃)条件下1h内完成反应,具有良好的敏感性和特异性,最低能够检出102个拷贝的病毒,敏感性比普通PCR高100倍,而对其他病毒检测结果为阴性.在荧光显色中分别应用SYBR Green Ⅰ和钙黄绿素作为显色剂,其结果与琼脂糖凝胶电泳一致.在对80份临床样本的检测中,使用LAMP和PCR检测出阳性样本的数量分别为68份和55份.因此,基于荧光显色的LAMP方法可以应用于ARV的快速检测,具有在科研机构、基层实验室特别是检测现场推广和应用的潜力.     

4株鸭坦布苏病毒包膜蛋白基因的分子进化分析及表达

从规模化养鸭场分离到4株鸭坦布苏病毒,成功克隆了包膜蛋白(E蛋白)基因片段,并对其进行了序列测定、分析和表达.结果表明,E基因全长1 503 bp,编码501个氨基酸,序列高度保守.进化分析显示,鸭坦布苏病毒属蚊媒黄病毒类恩塔亚病毒群,与其他坦布苏病毒及近期发现的BYD病毒关系最近.采用原核表达系统对E基因进行了表达,蛋白大小54 300,主要以包涵体形式存在.随后,对E蛋白外功能区序列和3D结构进行了分析,在已解析结构的黄病毒中与WNV E结构最为相似.研究结果为该病的防控和基因工程疫苗的研制奠定了基础.