SOE-PCR技术在羊口疮病毒真核表达质粒构建中的应用

为了构建羊口疮病毒B2L和F1L基因融合真核表达质粒pVAX1-B2L-F1L,探讨制备安全可靠羊口疮病毒核酸双基因疫苗的可行性,试验通过Primer Premier 5.0软件设计B2L和F1L融合基因2对引物,应用SOE-PCR技术将B2L和F1L连接起来,用限制性内切酶消化后插入pVAX1真核表达载体中,构建B2L-F1L融合基因表达质粒,再转入大肠杆菌DH5α感受态细胞中,对真核表达质粒进行PCR鉴定、双酶切鉴定及序列测定。结果表明:利用SOE-PCR技术成功扩增出B2L-F1L融合基因;对真核表达质粒pVAX1-B2L-F1L进行PCR鉴定和双酶切鉴定后,均可得到与预期大小一致的DNA片段;测序发现,真核表达质粒目的基因序列与预期设计一致。说明真核表达质粒pVAX1-B2L-F1L构建成功。     

苏铁害虫曲纹紫灰蝶的发生与防治研究进展

概述苏铁害虫曲纹紫灰蝶的发生与综合防治研究进展,主要包括其分类地位及名称、生物、生态学特性,发生、发展规律,以及综合防治技术。     

一种新的柑桔病害

1986年,我所从美国加利福尼亚州引入一批柑桔品种,均高接在隔离观察圃的夏橙上。其中两个华盛顿脐橙(以下简称华脐)单株枝干表皮出现木栓化裂突,枝条基部及着生腋芽处木栓化裂突密集,叶背主、侧脉开裂并形成木栓化组织(见封三照片),在解剖镜下观察可见叶背气孔周围亦呈木栓状。在高接     

苏州地区两种主要木蠹蛾害虫的发生与防治

近年来,两种主要木蠹蛾(咖啡木蠹蛾和梨豹蠹蛾)在苏州地区对园林树木危害严重。为给相关单位开展防治提供借鉴,对这两种害虫进行了多年的田间调查和防治技术研究。结果发现,在苏州地区,咖啡木蠹蛾1年发生2代、梨豹蠹蛾1年发生1代,均以幼虫在被害枝蛀道内越冬。建议采取修剪虫枝、保护利用自然天敌、灯光诱杀成虫和树冠喷药等综合防治措施,可有效地控制咖啡木蠹蛾和梨豹蠹蛾的发生与为害。     

大三岛等六个日本脐橙品种感染裂皮病情况鉴定

1986—1987年,我们利用指示植物对新引进的日本脐橙大三岛、清家、铃木、吉田、森田、白柳等6个品种进行了感染裂皮病情况鉴定,现简述如下。 一、材料和方法 以拟鉴定的植株(每品种一个单株)不同方位上取1—2年生枝条4—5支作接穗。以Etrog香橼     

夏洛来绵羊的风土驯化

夏洛来绵羊原产于法国中部的夏洛来地区,该羊具有较好的肉用体型,结构匀称,头大额宽,略带粉红色和灰色,有时带有黑色斑点,眼眶距离大,耳朵细长,会动,两肩紧凑,屁部后侧方形,股后肌群丰满,后腿腕关节、跗关节以下无毛,较短、浅色,     

鸭瘟病毒、鹅细小病毒和番鸭细小病毒三重PCR检测方法的建立

为建立鉴别鸭瘟病毒(DPV)、鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)的多重PCR检测方法,参考文献合成针对DPVUL6基因、GPVNS基因和MDPVVP1基因序列的特异性引物。通过优化多重PCR反应中的引物浓度和退火温度,建立快速鉴别3种病毒的多重PCR方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行检验。结果显示,该方法对禽流感病毒、新城疫病毒、鸭肝炎病毒、鸭源巴氏杆菌、鸭疫里氏杆菌的核酸扩增结果均为阴性,表明特异性较强;DPV、GPV和MDPV的最低核酸检出量分别为237.3pg、22.45pg和204.6pg,表明敏感性良好;该方法对DPV+GPV+MDPV、DPV+GPV、DPV+MDPV、GPV+MDPV、DPV、GPV和MDPV的核酸均能扩增出与预期大小一致的目的条带,表明该多重PCR方法重复性较好。本研究方法具有特异性强、敏感性良好、重复性较好和快速简便等特点,可用于DPV、GPV和MDPV临床感染病例的联合检测与鉴别诊断。     

高温生物降解法在病死畜禽无害化处理上的应用探析

如何处理病死畜禽的尸体在养殖业中成为至关重要的问题之一，处理得当时不会对环境、土壤等造成污染，处理不得则会造成水体、土壤以及空气的污染。高温生物降解法作为一种处理病死畜禽尸体的方式之一，有其独特的优势。因此本文探讨了高温生物降解法在处理病死畜禽上的相关流程以及应用此技术后的效果，以期为广大养殖户提供参考，在养殖过程中更好的处理病死畜禽。