荷叶黄酮的提取工艺研究

[目的]优化荷叶总黄酮的提取工艺条件。[方法]以安徽合肥地区产的风干荷叶为材料,用乙醇热提法提取荷叶黄酮。以影响提取得率的因素固液比、提取时间、提取温度和乙醇体积分数为因素,通过正交试验筛选提取荷叶总黄酮的最佳工艺条件,并通过单因素试验对提取条件的重现性与稳定性进行验证。[结果]由正交试验极差K值可知各因素对荷叶黄酮提取得率影响的顺序为：提取温度〉固液比〉乙醇体积分数〉提取时间;根据节能的角度最终得出提取荷叶总黄酮的最佳工艺条件是：提取温度为80℃、料液比为1：20、乙醇体积分数为50％、提取时间为3h。单因素试验表明,重现性与稳定性试验与正交试验所得的结果基本符合。[结论]该研究为荷叶黄酮开发利用提供一定的参考依据。     

铁皮石斛SCoT-PCR反应体系的建立及其初步应用

为建立铁皮石斛的SCoT-PCR反应体系,本研究以8个不同增殖代的铁皮石斛组培苗为试验材料,采用正交试验设计,对影响PCR反应体系的2xTaq Master Mix混合液、引物、模板DNA的浓度进行优化,建立了铁皮石斛SCoT-PCR的最佳反应体系,筛选引物,并对1～8代的组培苗进行遗传稳定性鉴定.结果表明:铁皮石斛的...     

鸭瘟病毒单抗的制备及胶体金试纸条检测方法的建立

【目的】鸭瘟（DP）是由鸭瘟病毒（DPV）引起的一种急性、败血性传染病,以头颈肿胀、食道黏膜和泄殖腔黏膜出血、黄白色溃疡,头颈部皮下有黄白色胶冻样渗出为特征。该病一旦发生,发病急、死亡快、死亡率高,对养鸭业危害严重。快速诊断是控制鸭瘟的重要措施之一,可以及时确定病原,以便采取有效的防制手段。试验旨在建立鸭瘟病毒（DPV）胶体金快速检测方法。【方法】利用生物学软件Protean分析,选择鸭瘟病毒抗原表位较多的一段序列设计引物,PCR扩增目的基因。连接到载体pMD-18T上,测序正确后再连接到原核表达载体pET-28a上。将获得的重组质粒转化至Rosetta感受态细胞中进行诱导表达。表达的蛋白经纯化后测其浓度并经Western blotting鉴定分析。以表达的DPV-gB蛋白作为抗原,免疫7周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA筛选及亚克隆,获得DPV-gB特异性单克隆抗体。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,以制备的 H6F6单抗作为标记抗体（标记的最适pH为8.0-8.5,最佳标记浓度为15倍原液稀释）,将纯化的A8D7单抗（浓度为2倍原液稀释）和羊抗鼠IgG（浓度为10倍稀释）包被在硝酸纤维素膜（NC）上,分别作为检测线和质控线,经条件优化建立了鸭瘟病毒胶体金试纸条检测方法。【结果】共获得4株能稳定分泌抗DPV-gB蛋白抗体的杂交瘤细胞株,命名为A8D7、E6C3、H11F8、H6F6。间接ELISA检测腹水效价分别为1:10³、1:10³、1:10⁵、1:10³。亚类鉴定结果分别为IgG2b、IgG2a、IgG2b、IgG1,轻链均为kappa链。Western blotting结果显示4株单抗均能与DPV-gB蛋白特异性结合。IFA结果显示制备的4株单抗是针对DPV产生的。建立的胶体金试纸条方法能够特异性地检测鸭瘟病毒,与鸭坦布苏病毒、H9N2亚型禽流感病毒、呼肠孤病毒、减蛋综合征病毒无反应。阳性尿囊液稀释50倍后用该试纸条检测依然为阳性;用不同批次的试纸条重复检测,结果无差异。利用制备的胶体金试纸条和PCR方法对38份临床样品进行检测比较,结果显示两者符合率为91.6 % 。【结论】本研究建立的试纸条检测方法具有良好的特异性、敏感性、重复性和稳定性,可用于DPV的快速检测。     

“设施农业环境学”课程教学实践及改革探讨

以福建农林大学设施农业科学与工程专业核心课程"设施农业环境学"为例,分析了目前课程中存在的问题(适宜的专业教材缺乏,相关课件及辅助资料不完善;网络教学平台利用不充分,教学效果的反馈和跟踪困难;教学案例的筛选与组织有待加强,人文素质培养环节需要重视),提出了改革措施(精心组织问题和案例讨论,提升学生学习兴趣;结合多元化考核和教学效果跟踪,提高授课效果;加强学生的人文素质培养,提高其环保意识、农产品质量安全意识等)。     

中国主要土壤有效磷演变及其与磷平衡的响应关系

目的研究不同品种磷肥施用对玉米根际土壤不同磷组分的影响。方法以玉米大豆间作为研究对象,通过盆栽试验和田间试验,采用Tiessen-Moir磷分级方法,研究施用磷酸二铵(DAP)、磷酸一铵(MAP)和过磷酸钙(SSP) 3种不同品种磷肥(盆栽100 mg/kg,田间90 kg/hm²)下间作玉米根际红壤全磷和磷组分的变化。结果施用磷肥提高了玉米根际土壤全磷含量,不同磷肥品种的作用顺序为DAP>MAP>SSP。综合田间试验及盆栽试验结果显示：相比于不施磷处理(CK),磷肥施用提高了玉米根际土壤中活性态磷(NaOH-Pi、NaOH-Po和D.HCl-Pi)占比(5%~42%),降低了活性态磷(Resin-P、NaHCO₃-Pi和NaHCO₃-Po)占比(2%~16%)和稳定态磷(C.HCl-Pi、C.HCl-Po和Residual-Pt)占比(3%~9%);间作增加了活性态磷和稳定态磷占比(分别为3%和4%),降低了中活性态磷占比(6%)。盆栽试验中,除NaHCO₃-Po和Residual-Pt外,施用不同品种磷肥均可使玉米根际其他土壤磷组分含量增加;相比于单作,间作显著降低了NaOH-Pi和NaOH-Po的含量(P<0.05),显著增加了NaHCO₃-Pi、NaHCO₃-Po、C.HCl-Pi和Residual-Pt的含量(P<0.05),对其他磷组分含量无显著影响(P>0.05)。结论不同品种磷肥施用下间作对玉米根际不同磷组分的影响不同,其中,施用DAP对玉米根际中活性态磷的活化和全磷的提高均有显著正效应。     

优质马铃薯的经济效益与碳汇效应分析

为实现常德市马铃薯产业发展的绿色跨越,通过开展马铃薯品种与栽培技术集成试验,探索马铃薯提质、增效、减碳种植新模式。试验采用两因素随机区组设计,因素一为栽培方式,因素二为马铃薯品种。结果表明,栽培方式和品种都会对马铃薯产量有影响,但两者并无互作,其中中薯191绿色栽培产量最高,为15.91 kg·6.67 m^-2;品种对品质的影响占主导作用,其中东农310有机栽培食味评分最高,为6.94分;在经济效益方面,费乌瑞它有机栽培产值最高,为6020元·667 m^-2,较对照增效594.32%;在碳汇效应方面,有机栽培净碳汇量最高,667 m²可以固碳近59.96 kg。可见,马铃薯有机栽培净碳效益好、利润高,但市场准入门槛高,适合高端消费市场。绿色栽培适用于大多数马铃薯品种,操作简便,能达到提质、增效、减碳的目的,可进一步在当地示范推广。     

下辽河平原不同水-肥条件下玉米地土壤养分收支及氮肥利用效率

【目的】了解下辽河平原地区施肥与水分条件对玉米地土壤中氮、磷、钾养分收支以及氮肥利用效率的影响。【方法】利用持续16年的长期田间试验结果结合气象观测资料,对不同水肥条件下玉米农田养分收支与氮肥利用效率进行研究。【结果】施肥条件差异可使玉米移出农田的养分量高出无肥处理2～3倍。水分条件对农田养分移出量的作用虽不如施肥明显,但在较好的降水条件下,即使较为理想的施肥模式,玉米地土壤中养分仍有可能出现赤字;氮肥的施用加剧了土壤磷的赤字,而氮、磷肥施用可加剧土壤钾收支赤字,有机肥的施用可以使养分收支赤字得到缓解;水分条件的改善则加速了养分收支赤字的出现,但适宜的水分供给对氮肥利用效率的提高作用显著。【结论】在下辽河平原地区,水肥条件对玉米土壤养分收支有显著影响,水分条件适宜土壤养分收支出现赤字的可能性增大,但保持农业系统养分循环再利用并根据土壤肥力适当施用化肥,既可满足作物丰产的养分需求又有利于平衡土壤养分收支,提高氮肥利用效率,减少农业对环境的影响。     

面向医院在线信息服务的用户利用行为及影响因素研究——以河北省为例

[目的/意义]随着数字时代发展,许多传统医疗机构打造了一系列以患者为中心的线上用户服务项目,但其实际被利用情况、效果以及影响因素还有待进一步考证。[方法/过程]本研究以河北省10家三甲医院为例,调查医院提供的在线服务渠道、类型及具体内容,并进一步探究有医疗需求的患者及家属利用医院在线服务的影响因素。[结果/结论]研究发现,当前医院在线服务主要通过官方网站、微信公众号、微信小程序、支付宝生活号等4类渠道,提供智能分诊、线上线下问诊、个人线上健康管理、缴费管理、疫情应对等17项主要服务内容。用户的年龄、教育程度,以及感知平台服务效用、信息效用、努力期望、社会影响、感知风险等因素,对用户利用医院在线服务有多维度影响。     

生态林业建设中林业技术推广存在的问题及对策

有机生态林业和园艺林业能够有效利用各种森林资源,调节林业生产和发展,有效维护生态平衡,为林业的可持续发展做出贡献.本文首先叙述了林业技术推广在生态林业建设中的重要作用,并且提出了林业技术推广过程中存在的问题,对推动林业技术推广的对策进行探讨并提出相关建议.     

苹果CAX基因家族生物信息学和表达分析

[目的] CAX(Ca2+/H+exchanger antiporter)是一类重要的跨膜转运蛋白,在植物体内阳离子转运上起着非常重要的作用.本文对苹果MdCAXs基因进行了生物信息学和组织特异性表达分析,以期为该类基因的功能研究奠定基础.[方法]利用生物信息学的方法对苹果MdCAXs基因家族染色体定位、蛋白质等电点、亲疏水性、跨膜区域、亚细胞定位及保守结构域进行了预测和分析,同时还分析了MdCAXs基因与其他物种CAXs基因的进化关系.采用实时荧光定量PCR法对苹果MdCAXs基因在不同盐处理下根、茎、叶中的表达变化进行分析.[结果]苹果MdCAXs家族包含8个成员,分别属于CAXsⅠ型中的A亚型和B亚型,编码436～817个氨基酸,等电点4.97～7.12,且都为疏水性蛋白;所有MdCAXs基因编码的氨基酸都有11个及以上的跨膜区域,含有CAXs基因5个典型的功能域:N-端自抑制区域(NRR)、C-端功能区域、Ca2+功能域(CaD)、C功能域和D功能域.亚细胞定位预测MdCAXs主要是定位在质膜和内质网上.苹果MdCAXs基因具有组织特异性表达特点,不同种类盐处理根、茎、叶中表达发生不同程度的变化,反映了MdCAXs存在功能上的差异,对不同阳离子有特异性的应答反应.[结论]苹果MdCAXs是一类跨膜转运蛋白,具有植物CAXs基因典型的结构特征,根、茎、叶对不同的盐离子具有不同的表达响应.