枯草芽孢杆菌NCD-2对棉花根系分泌物L-脯氨酸响应的转录-蛋白质组学联合分析

【目的】棉花根系分泌物L-脯氨酸是影响生防菌株定殖的关键因素之一,前期研究发现L-脯氨酸能够提高枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）NCD-2生物膜形成能力。通过高通量测序技术分析L-脯氨酸调控枯草芽孢杆菌NCD-2生物膜形成和生防潜力相关的基因,为深入认识棉花根系分泌物与生防菌株的分子互作关系打下基础。【方法】以枯草芽孢杆菌NCD-2菌株为供试材料,外源添加浓度为10 mg·mL^-1的L-脯氨酸共培养24 h后,分别进行转录组（RNA-seq）和同位素标记相对定量蛋白质组技术（iTRAQ）分析,对所获得的转录组和蛋白质组数据进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）验证不同代谢通路中部分差异基因的表达情况。 【结果】转录组分析发现,L-脯氨酸和NCD-2菌株共培养后,获得1 071个差异表达基因（DEG）,其中602个基因上调,469个基因下调。GO分析发现在生物过程、细胞组分和分子功能方面分别有49、14和30个功能条目显著富集。KEGG代谢通路主要富集在化合物代谢、鞭毛组装、细菌运动和趋化作用。蛋白质组学分析发现,筛选到211个差异表达蛋白（DEP）,其中118个蛋白上调,93个蛋白下调。GO分析发现在生物过程和分子功能方面分别有13和8个功能条目显著富集。KEGG代谢通路主要富集在氨基酸代谢、碳水化合物类代谢、鞭毛组装和ABC转运蛋白。进一步转录-蛋白质组学联合分析发现,在L-脯氨酸作用下,检测到共有的显著差异表达基因（或蛋白）112个,其中38个基因（或蛋白）下调,74个基因（或蛋白）上调。GO功能显著富集主要集中在营养库活性、催化活性、细胞膜、定位、细胞脂质代谢过程、氧化还原过程、sigma因子活性、转运活性、芽孢形成9个方面。KEGG代谢通路主要富集在能量代谢、ABC转运蛋白、抗生素生物合成、鞭毛组装、运动或趋化作用和双组分系统方面。RT­qPCR验证了26个差异表达显著基因,结果发现在表达量上存在一定的差异,但表达趋势与RNA­seq和iTRAQ组学分析结果基本一致。【结论】棉花根系分泌物L-脯氨酸与枯草芽孢杆菌NCD-2之间的互作存在一个复杂的生物过程,依赖于不同代谢通路网络中的多个基因。双组分系统、抗生素生物合成、能量代谢、运动或趋化作用、鞭毛组装和ABC转运蛋白通路中的差异基因（或蛋白）可能在棉花根系分泌物与枯草芽孢杆菌互作过程方面发挥着重要作用。     

安疫肽、肽好、高免多糖对雏鸭免疫功能及生长性能的影响

为了探讨不同时间段内,在番鸭饮水中添加安疫肽、肽好、高免多糖这3种免疫增强剂对番鸭生长性能、体液免疫和细胞免疫的影响,试验选用100只1日龄健康黑羽番鸭,随机分成4组进行体内试验。结果表明:安疫肽、肽好、高免多糖这3种免疫增强剂可以明显改善番鸭的生长性能,促进免疫器官的发育;可以提高特异性免疫抗体水平,促进白细胞介素-2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)等细胞因子的分泌。     

酒花超临界CO_2萃余物中芦丁提取工艺的研究

研究了从酒花超临界CO2萃余物(废酒花)中提取芦丁的工艺条件。采用高效液相色谱法(HPLC)测定芦丁含量,通过单因素和正交试验确定了废酒花中芦丁的最佳提取条件:浸提剂体积分数40%乙醇,料液比1∶35,超声辅助提取,温度60℃,提取时间1.75 h,在此条件下芦丁的提取量为1.546 mg/g废酒花。     

农民专业合作经济组织与外部利益群体的关系

农民专业合经济组织的外部利益群体除各级政府外,还有一些其他利益群体,正确处理好农民专业合作经济组织与外部其他利益群体的关系是加强农民专业合作经济组织建设的必要条件.农民专业合作经济组织的其他外部利益群体或者利益集团由以下几个方面组成:一是社区合作组织;二是现实的和潜在的顾客;三是银行、保险公司等金融服务机构;四是现实的和潜在的市场竞争对手.     

生防枯草芽孢杆菌CAB-1抑菌蛋白产生条件及其稳定性研究

枯草芽孢杆菌CAB-1是一株对番茄灰霉病有显著防效的生防菌株,抑菌蛋白是其产生的主要抑菌物质之一。研究表明,菌株CAB-1产生抑菌蛋白的最佳培养条件为：接种量2%,培养温度30℃,转速180 r/min,装液量100 mL/250 mL,培养时间48 h。考马斯亮蓝法测得最佳培养条件下菌株CAB-1产生的粗蛋白浓度为0.16 mg/mL。该粗蛋白对胰蛋白酶及蛋白酶K不敏感,胃蛋白酶处理使其活性降低14%;抑菌蛋白在100℃以下处理30 min活性变化差异不显著,而121℃处理30 min其抑菌活性为对照的72%。抑菌蛋白对酸碱的耐受范围广,在pH值3~12的范围内抑菌活性均能保持在75%以上,pH值2时抑菌活性降低为对照的59%。经甲醇、氯仿、乙醚、乙酸乙酯及丙酮处理后该粗蛋白的抑菌活性变化不大。     

麻黄鱼腥草对鸡毒支原体病的临床治疗研究

为观察麻黄鱼腥草口服液对人工感染鸡支原体病的治疗效果,将180羽20日龄健康鸡随机分成6组,经鸡毒支原体标准株R株感染后,用麻黄鱼腥草口服液高、中、低剂量组进行饮水治疗,并将酒石酸泰乐菌素设为对照。研究结果表明:当饮水中的浓度达到4 mL/L时,连用7 d,对鸡毒支原体感染鸡有明显的治疗效果,能显著降低对气囊的损伤,同时提高感染鸡的平均增重,有效率为96.7%,治愈率为60.0%。     

农民工劳动权益的行政法保护

现有的法律体系在面对农民工权益保护的问题上,表现出明显的缺位、滞后和乏力,反映出现有法律落后于社会发展,己经不能适应新形势的需要。无论是从保护劳动者合法权益和基本人权还是维护社会稳定有序、促进经济社会良性、健康发展来说,政府都有责任加强对农民工的制度保护。     

枯草芽胞杆菌NCD-2中调控因子PhoP对fengycin合成的调控作用

 PhoR/PhoP双因子调控系统是枯草芽胞杆菌中一个重要的全局性调控系统, 在低磷环境下, 感应激酶PhoR自磷酸化, 并且将获得的磷酸基团转移到调控因子PhoP上, 从而激活PhoP的调控活性。为了明确调控因子PhoP对枯草芽胞杆菌NCD-2菌株中主要抑菌活性物质-fengycin合成能力的调控作用, 本研究通过同源重组技术缺失突变NCD-2菌株中的phoP基因, 拮抗活性测定结果表明, phoP基因缺失菌株显著降低了对立枯丝核菌的抑菌活性。通过快速蛋白质液相色谱(FPLC)技术比较了NCD-2菌株野生型及其phoP基因突变子fengycin的合成能力, 结果证明, phoP基因突变菌株降低了fengycin的合成能力。对突变子进行phoP基因互补发现, 互补phoP基因可使突变子的相关性状恢复到野生型菌株水平。以上结果证明, phoP基因对枯草芽胞杆菌NCD-2菌株中fengycin的合成具有正调控功能。     

肉牛微量元素铜的营养

铜是人和动物所必需的微量元素,大量的试验研究已证实,铜具有广泛的生物学作用,它与畜禽的生长性能、免疫功能等都有密切的联系。铜的缺乏对畜禽的造血功能、神经系统、骨骼、结缔组织和被毛的生长发育等均会造成不同程度的不良影响。