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华脆系中国农业科学院果树研究所以金冠为母本,惠为父本杂交选育而成的晚熟、红色、鲜食加工兼用型苹果新品种.2010年通过辽宁省非主要农作物品种备案办公室备案,是一个内质较好、制汁性状优良、抗逆性强的红色、晚熟、鲜食加工兼用苹果新品种. 相似文献
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以“王林”苹果为试材,采用RT-PCR的方法克隆获得Mal d 1基因,并将该基因连接到原核表达载体pCold Ⅱ上,经测序确定所构建的重组载体pCold-Mal d 1开放阅读框正确。将获得的重组质粒pCold-Mal d 1转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经0.1 mmol?L-1IPTG,15 癈,24 h冷诱导表达,SDS-PAGE电泳检测,证明Mal d 1蛋白获得了稳定而高效的表达,所表达蛋白是大小约为22.4 kD的融合蛋白。经镍柱纯化后获得相对单一的蛋白,可用于免疫组织化学,蛋白印记检测等。 相似文献
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蛋白质提取方法是双向电泳分析的关键。本研究中,我们通过优化提取条件,建立了适于苹果枝条表皮总蛋白提取的技术体系。在此基础上,开展了苹果枝条表皮应答轮纹病菌侵染的蛋白质组学研究,以期明确轮纹病菌胁迫下苹果枝条表皮细胞参与抗病反应的关键蛋白。具体方法是以未接菌及接菌后的苹果枝条表皮为材料,分别提取总蛋白,利用双向凝胶电泳技术结合质谱(MALDI-TOF-TOF/MS)检测分析差异表达蛋白。经质谱检测及数据库检索,共有22个蛋白点得到成功鉴定,按照功能划分为光合作用相关、糖类及能量代谢相关、防御反应相关、蛋白质合成相关及未知功能蛋白等5类。其中参与防御反应的病程相关蛋白(APX、 β-1,3-葡聚糖酶、Mal d1、PR-1)可能是苹果枝条表皮细胞应答轮纹病菌胁迫过程中参与抗病反应的关键蛋白。 相似文献
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