东方蜜蜂微孢子虫染色体结构维持(SMC)蛋白的分子特性与系统进化分析

目的 解析东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae染色体结构维持(Structural maintenance of chromosome，SMC)蛋白的分子特性，鉴定东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的SMC的保守基序和结构域，并进行系统进化分析，旨在丰富东方蜜蜂微孢子虫SMC的基本信息，为功能研究的深入开展提供依据。方法 使用Expasy网站的相关软件预测和分析SMC的理化性质、信号肽、磷酸化位点、二级结构和三级结构，利用MEME软件鉴定东方蜜蜂微孢子虫和其他物种SMC的保守基序，采用TBtools软件鉴定东方蜜蜂微孢子虫和其他物种SMC的结构域，通过Mega 11.0软件采用邻接法构建东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的SMC系统进化树。结果 东方蜜蜂微孢子虫SMC包含1 102个氨基酸，分子式为C₅₇₈₇H₉₄₁₈N₁₅₂₆O₁₇₇₁S₄₁，相对分子质量约130 020，脂溶系数为93.49，等电点为8.28，平均亲水系数为−0.740，亲水氨基酸多于疏水氨基酸，不含典型信号肽；包含50个丝氨酸磷酸化位点、26个酪氨酸磷酸化位点及28个苏氨酸磷酸化位点；包含787个α−螺旋、106条β−折叠、49个β−转角及160个无规则卷曲；可同时定位于细胞核、细胞质和线粒体。在东方蜜蜂微孢子虫、海伦脑炎微孢子虫Encephalitozoon hellem、麦格水蚤汉氏孢虫Hamiltosporidium magnivora、颗粒病微孢子虫Nosema granulosis、康氏泰罗汉孢虫Thelohania contejeani、菲尼斯毕罗酵母Piromyces finnis、指间毛廯菌Trichophyton interdigitale、紫色毛廯菌Trichophyton violaceum、发廯菌Trichophyton tonsurans和黑曲霉Aspergillus melleus 的SMC中预测到相同的9个保守基序；东方蜜蜂微孢子虫和上述其他9个物种的SMC中均含有1个SMC_N结构域和1个SMC_hinge结构域。进一步分析发现，东方蜜蜂微孢子虫与菲尼斯毕罗酵母的SMC序列相似性最高(61.96%)，与康氏泰罗汉孢虫的SMC序列相似性最低(34.73%)；东方蜜蜂微孢子虫与颗粒病微孢子虫的SMC聚为一支，置信度达到99%，进化距离最近。结论 本研究明确了东方蜜蜂微孢子虫SMC的分子特性，丰富了SMC的基本信息，并揭示SMC在东方蜜蜂微孢子虫和其他微孢子虫中具有较高的保守性，为功能研究的深入开展提供了依据。     

抑霉唑在草莓生长过程中对映体选择性降解行为

采用优化的QuEChERS样品前处理技术和超高效液相色谱-串联质谱仪(UPLC-MS/MS),建立了测定草莓中手性农药抑霉唑对映体的分析方法。样品用乙腈提取，N-丙基乙二胺(PSA)和石墨化碳黑(GCB)净化，经手性色谱柱Lux Cellulose-2拆分后，用UPLC-MS/MS进行测定，基质外标法定量分析。结果表明，手性农药抑霉唑对映体在2.5～1 000μg·L^-1范围内线性关系良好(R²>0.99),方法定量限(LOQ)为5μg·kg^-1,3个添加水平(5、50、1 000μg·kg^-1)下(S)-(+)-和(R)-(-)-抑霉唑对映体在草莓基质中的平均回收率分别为94.6%～119.7%和86.6%～117.3%,相对标准偏差分别为2.0%～8.3%和5.0%～9.6%。抑霉唑两对映体在草莓生长中的降解符合一级动力学方程，(S)-(+)-抑霉唑半衰期6.54 d,(R)-(-)-抑霉唑半衰期7.07 d。本研究从对映体的角度研究了抑霉唑在草莓中的降解，可为手性农药对映体的环境行为研究...     

圆周往复水射流式挖藕试验装置设计与试验

为满足莲藕采挖作业多样化的试验要求，提高试验装置的互换性、通用性与测量精度，设计了圆周往复水射流式挖藕试验装置。介绍了试验装置中试验台的结构设计、工作原理和关键部件设计，分析了圆周往复水射流结构在不同条件的挖掘深度及莲藕浮出率等，确定了试验指标，并进行了台架验证试验。结果表明：圆周往复水射流式挖藕试验装置能够有效反映喷头直径、喷射角度和喷头与泥土表面距离对莲藕采挖效果和挖掘深度的影响。当喷头直径不变时，喷射角度越小挖掘深度越深，喷头与泥土表面距离越小挖掘深度越深，喷射角度越大冲刷面积越大，成正比例关系；喷头与泥土表面距离越近、喷射角度越小情况下莲藕的浮出率越高，满足圆周往复水射流式挖藕试验要求。     

基于转录组分析花生单粒精播与多粒穴播植株荚果产量差异的分子机制

【目的】在中国，为保证出苗率及播种质量，田间常采用多粒播种。然而，多粒穴播植株间的竞争往往限制了植株的生长和最终产量。为了解决这一矛盾，团队前期研究建立了单粒精准播种的高产栽培技术。单粒精播技术的节种作用和增产效果结合起来能够带来更大的效益，实现节本增效。挖掘不同种植方式花生叶片、根系及荚果中的差异表达基因，探讨单粒精播栽培技术提高花生荚果产量的分子机制，为进一步推动花生高产高效提供理论依据和技术支撑。【方法】以花生品种花育25号为试材，测定单粒精播和多粒穴播种植产量相关指标，分别取花生开花后30 d倒三叶和主根及侧根、鸡头幼果期花生荚果进行转录组测序，从分子水平阐述不同播种方式花生产量的差异。【结果】与多粒穴播相比较，单粒精播种植方式下花生单株荚果数、单株饱果数、单株果重、经济系数均显著提高。转录组数据组装后，平均每库包含4 430万个读数。通过不同比较组合中差异表达基因、GO和KEGG通路分析，与多粒穴播相比较，单粒精播种植植物叶片中参与赤霉素信号传导、光信号传导等过程的转录因子及光系统Ⅱ放氧复合体、叶绿体膜、氧化还原反应等光合作用相关基因表达量升高；根系中生物胁迫和非生物胁迫诱导...     

常见肉类成分荧光PCR检测试剂盒的比较

目前市场上肉类成分检测试剂盒种类繁多。为了评价不同厂家试剂盒的应用效果，选取当前市场上4个品牌的5种肉类成分荧光PCR检测试剂盒，对其特异性、灵敏性及效率成本进行了分析比较。结果显示：4个品牌的5种肉类成分荧光PCR检测试剂盒特异性均较好，不同肉类之间没有交叉反应；但检测同一种肉类的不同品牌试剂盒及同一品牌检测不同肉类的试剂盒灵敏性存在差异；不同品牌的试剂盒检测时间和成本也有区别，A品牌耗时最短，D品牌价格最高。结果表明，不同品牌试剂盒的灵敏性、检测耗时和检测成本各有特点，使用者可根据使用目的及经费预算选择合适的试剂盒。     

木霉菌及其效应蛋白在与植物互作机制中的作用研究进展

木霉菌是一类资源丰富的生防真菌，同时木霉菌可与植物形成良好的互作关系，促进植物生长，诱导植物抗病性。加大对木霉与植物互作及生防机制的研究，有利于推广生物防治，减少化学农药的使用。本文通过介绍木霉菌的生物学特性、木霉菌与植物互作机制，进一步综述了木霉菌分泌的效应蛋白在与植物相互作用过程中的作用。     

饲料中添加丁酸梭菌对草鱼生长性能、免疫力及抗嗜水气单胞菌的影响

摘 要：旨在研究饲料中添加丁酸梭菌（Clostridium butyricum）对草鱼（Ctenopharyngodon idella）生长性能及血清酶活、免疫功能和抗病能力的影响，选用初始体质量为[ (23.78±0.68) g]的健康草鱼600尾，随机分为4组，每组3个重复，每个重复50尾。对照组（T0组）只投喂基础饲料，实验组（T1、T2、T3组）分别投喂添加1×107、1×108、1×109 cfu/g 丁酸梭菌的饲料，实验周期为56 d。结果表明：与T0组相比，T1、T2和T3组草鱼的增重率（WGR）和特定生长率（SGR）显著增加，存活率（SR）无显著差异。与T0组相比，T1、T2和T3组草鱼的血清超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、溶菌酶（LZM）活性显著增高，补体C3含量显著增高，但谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活性显著降低。与T0组相比，T1、T2和T3组草鱼的免疫相关基因白细胞介素-8（IL-8）、白细胞介素-1β（IL-1β）、免疫球蛋白M（IgM）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的mRNA相对表达量显著上调。投喂益生菌56 d后，用嗜水气单胞菌对草鱼进行攻毒实验，与T0组相比，T1、T2和T3组草鱼的累积死亡率显著降低。综上所述，饲料中添加丁酸梭菌可以提高草鱼的生长性能、血清抗氧化能力、机体免疫力以及抗病能力。     

减氮增钙及施用时期对花生生长发育及生理特性的影响

为探讨减施氮肥对花生的影响，采用盆栽试验，在北方黄淮海和南方红壤旱地产区选用当地主要栽培品种，北方选用 ‘花育25号’为材料，设置施N 0 kg·hm^-2（T0）、施N 157.5 kg·hm^-2（T1）、施N 157.5 kg·hm^-2+CaO 450 kg·hm^-2（T2）、施CaO 450 kg·hm^-2（T3）、施N 67.5 kg·hm^-2+CaO 450 kg·hm^-2作为基肥+花针期追施N45 kg·hm^-2（T4）、施N 67.5 kg·hm^-2作为基肥+花针期追施N45 kg·hm^-2+CaO 450 kg·hm^-2（T5）共6个处理；南方选用‘湘花2008’为材料，设置施N 0 kg·hm^-2（S0）、施N157.5 kg·hm^-2（S1）、施N 157.5 kg·hm^-2+ CaO 568 kg·hm^-2（S2）、施N 112.5 kg·hm^-2（S3）、施N 112.5 kg·hm^-2+CaO 568 kg·hm^-2（S4）共5个处理，研究了减氮增钙及氮、钙肥施用时期对花生干物质积累量、叶片SPAD值、碳氮代谢酶活性，根瘤和产量构成因素的影响。结果表明，与传统施肥（T1）相比，减氮增钙（T4）处理明显提高结荚期根瘤数量和鲜重，提高生育后期的叶绿素相对含量、干物质积累量，促进叶片中的碳、氮酶活性提高，产量提高4.5%。与T1处理相比，T2处理显著促进干物质积累、产量提高10.8%；基施钙肥处理（T4）与花针期追施钙肥处理（T5）相比，产量提高228%。同时，与S1相比，S2处理的单株总干物质积累量和产量分别提高15.6%和29.8%。与S1相比，氮肥减施+基施钙肥处理（S4）的产量提高27.7%。表明氮肥减施后钙肥的增产效果更明显，且作为基肥效果更好。因此，无论是北方黄淮海花生生产区、还是南方红壤旱地花生产区，增施钙肥是花生产量提高的有效措施，可作为氮肥减施后保障花生稳产的重要栽培方法。     

适用于多种禾本科植物染色质转座酶可及性测序的提核建库方法

为建立适用于多种禾本科植物染色质转座酶可及性测序(assay for transposase accessible chromatin with high-throughput sequencing, ATAC-seq)的细胞核提取和建库体系,本试验以水稻、小麦和结缕草的叶片及根系为研究材料,通过控制变量试验确定最佳的细胞核提取方法:采用液氮研磨样品,初步提核离心速度选取1200×g,2次ORB溶液去除细胞器等杂质,蔗糖梯度缓冲液纯化细胞核。通过构建文库、库检及测序分析发现,所提取的细胞核适用于染色质转座酶可及性测序的建库,可获得高质量测序数据。本试验建立的适用于多种禾本科植物的提核体系为获取禾本科植物染色质开放区域信息以及深入研究基因表达的调控方式奠定了基础。     

基于项目化+BOPPPS混合模式下《数控技术》教学改革研究

针对于目前在“大类招生，专业分流”培养模式中《数控技术》课程教学面临的问题，提出一种基于项目化+BOPPPS混合模式下《数控技术》课程的教学改革。本文根据《数控技术》课程当下面临的教学问题进行分析，提出将项目化+BOPPPS混合教学模式中的“教学项目、导入、教学目标、前测、参与式学习、后测、总结和课程评价”多个环节应用于《数控技术》课程的教学设计，最后通过实际应用验证项目化+BOPPPS混合模式下《数控技术》教学改革的合理性和有效性，为后续《数控技术》的教学改革提供一种思路和依据。