柑橘花芽分化期结果和未结果树矿质元素和碳水化合物含量变化

用石蜡切片法确定温州蜜柑花芽形态分化集中在3月初到4月中旬,同时用H2SO4—H2O2法分析了8年生和2年生树体秋春季叶片和茎矿质元素含量,结果表明:结果树茎叶钾含量最高,氮次之,磷和钙较低,花芽分化初期,氮和钾含量均有峰值.未结果树氮峰值较低,钾较高,且峰值时间较迟.用80%乙醇加热法和蒽酮硫酸比色法分析了醇溶性糖,淀粉和全糖含量,结果表明:结果树醇溶性糖含量花芽形态分化前积累其后下降,淀粉含量秋冬和早春较低,花萼原基后上升,总糖含量花芽形态分化前同醇溶性糖相似,形态分化期波动大.未结果树碳水化合物平均含量比结果树高,C/N比值比结果树高41.3%~63.3%.     

柑橘花芽分化期结果和未结果树矿质元素和碳水化合物含量变化

用石蜡切片法确定温州蜜柑花芽形态分化集中在3月初到4月中旬,同时用H_2SO_4-H_2O_2法分析了8年生和2 年生树体秋春季叶片和茎矿质元素含量,结果表明:结果树茎叶钾含量最高,氮次之,磷和钙较低,花芽分化初期,氮和钾含量均有峰值.未结果树氮峰值较低,钾较高,且峰值时间较迟.用80%乙醇加热法和蒽酮硫酸比色法分析了醇溶性糖,淀粉和全糖含量,结果表明:结果树醇溶性糖含量花芽形态分化前积累其后下降,淀粉含量秋冬和早春较低,花萼原基后上升,总糖含量花芽形态分化前同醇溶性糖相似,形态分化期波动大.未结果树碳水化合物平均含量比结果树高,C/N比值比结果树高41.3%～63.3%.

Abstract：

In order to understand the relationship between flower bud differentiation and nutrition in satsuma orange(Citrus unshiu Marc.)trees,the mineral elements and carbohydrate in the leaves and stems of bearing trees(8-year-old)and non-bearing trees(2-year-old)were measured from September to April.Flower bud differentiation occurred from early March to mid-April.In the leaves and stems of bearing trees K was the highest,followed by N,while P and Ca contents were comparatively low.At the early stage of flower bud differentiation,K and N contents were both up to the highest value.Compared with the bearing trees,the non-bearing trees had lower N peak and higher K peak,which occurred at a later date.The 80%ethanol soluble sugar contents kept increasing until the stage of flower bud formation and declined thereafter.Anthrone and sulfuric acid colorimetry showed that starch content was low from September to early spring and increased at the stage of the interspace of flower bud formation.Total sugar content was similar to the ethanol soluble sugar before flower bud formation.Carbohydrate content in the non-bearing trees was higher than in the bearing trees and the C/N rate was 41.3%～63.3 0% higher.     

柑橘花芽分化期结果和未结果树核酸含量变化

用石蜡切片法确定温州蜜柑花芽形态分化集中在3月初到4月中旬.同时分析了8年生和2年生温州蜜柑树体秋春季叶片核酸含量,结果表明:结果树叶片RNA含量较高,在核酸总量中所占比重较大.花原基分化初期,RNA含量和核酸总量均达到峰值,随后下降.花芽形成期DNA含量较低,形态分化期下降.束结果树叶片DNA含量高于成年树,且在核酸总量中所占比重较大.花原基分化初期,结果树叶片RNA/DNA比值出现峰值,未结果树叶片RNA/DNA比值有相似变化,但峰值较小.核酸总量(包括RNA含量)及RNA/DNA比值结果树大于未结果树.     

猕猴桃ACC合成酶基因家族四个成员的克隆

通过PCR方法从中华猕猴桃中分离出ACC合成酶基因家族的四个成员（AC－ACS1A、AC－ACS1B、AC－ACS2和AC－ACS3）的基因组DNA片段，AC－ACS1A、AC－ACS1B和AC－ACS2与其它植物该基因的氨基酸序列同源性最高可达76％以上，而AC－ACS3与其它植物ACC合成酶基因的氨基酸序列同源性均低于60％，与已知的其它猕猴桃ACC合成酶基因的同源性在51％－56％之间，且不存在MSSFGL保守区，因而属于一个未见报道的新成员。     

甜橙液泡转化酶基因(CSVI)的分离及全序列分析

根据不同植物液泡转化酶基因序列的保守区设计合成引物，采用滤纸吸附噬菌体PCR法，首次从甜橙基因组文库筛选出含甜橙液泡转化酶基因的阳性X噬菌体，经过大量培养并提取其DNA，限制性内切酶消化后进行DIG southern印迹分析，将阳性条带回收、加工并克隆测序。序列分析表明，该基因全长4722bp，编码588个氨基酸，包括6个外显子和5个内含子。在GenBank进行Blast检索的结果表明，该基因编码的氨基酸序列与马铃薯、番茄和酸樱桃液泡转化酶基因编码的氨基酸序列同源性分别为68％、68％和62％。系统进化关系聚类分析结果表明，该基因属液泡转化酶基因类型。该基因已经在GenBank登录(登录号：AF433643)。该基因的获得为从分子水平研究柑桔果实发育过程中蔗糖积累和分解机制以及通过基因工程改良果实品质奠定了基础。     

枇杷成熟子叶及叶片不定芽再生研究

枇杷(Eriobotrya japonica)是原产我国的特色树种,我国南方主要果树之一,栽培面积已达10万hm2以上,产量已达30万t以上(林顺权等,2004),超过世界总产量的70%(刘国强等,2000),因此有关枇杷的研究主要集中在我国.研究分别采用茎尖(杨永清等,1983;万志刚等,2000)、胚(王家福等,2000)、胚乳(彭晓军等,2002)、原生质体(林顺权等,1994;1996;1997;Lin et al.,1995)等类型,其中茎尖培养较为成功,胚乳培养最高再生率为18.04%(彭晓军等,2002),胚培养多用于种质资源保存(王家福等,2000).枇杷离体再生目前存在外植体类型单一且再生率低下、培养难度较大等问题,国内外可供参考的研究也较少,建立枇杷离体再生体系难度较大,已成为限制枇杷现代生物技术育种的因素之一,现今未见任何有关枇杷基因转化的报导与此是分不开的.因此有必要进一步拓宽外植体类型,进行其再生系统研究.本研究利用成熟种子子叶及种子苗叶片,试图建立其再生体系.作者在枇杷组织培养中做了大量尝试,多数研究毫无进展,本文所报道的试验结果,实现了成熟子叶和叶片(即使是种子苗叶片)再生报告零的突破,为今后枇杷种子诱变育种获得再生植株以及遗传转化工作打下基础.     

高氮处理对温州蜜柑果实糖积累的影响

本研究结果表明 ,增施氮肥后汁囊中光合产物的分配量减少 ,ABA/IAA的比值降低 ,蔗糖代谢相关酶 (特别是分解酶类 )的活性增加 ,最终造成了汁囊中的糖含量降低。对处理引起汁囊中糖含量变化的生理机制进行了探讨。     

笋瓜韧皮部特异性启动子的克隆分析及新型植物表达载体构建

根据已报道具韧皮部组织特异性的笋瓜韧皮部蛋白2（PP2）基因序列设计引物,以山西本地种笋瓜叶片基因组DNA为模板,用PCR法扩增得到了长度为966bp的PP2基因启动子片段,克隆入pUCm—T载体后,经鉴定获得了新的重组质粒pUCm—PSP,测序和序列分析表明与两个已报道的片段分别有95％和99％的同源性,推测具有相似的启动子功能。分别用限制性内切酶PstⅠ和BglfⅡ双酶切重组质粒pUCm—PSP和由CaMV35S组成型启动子驱动GFP报告基因的双元植物表达载体pCAMBIA1302,分别回收pUCm—PSP重组质粒中的PSP小片段和pCAMBIA1302植物表达载体中去掉GFP报告基因上游CaMV35S组成型启动子的大片段,经连接、转化和鉴定后,构建了由PSP驱动报告基因GFP的新型植物表达载体pHZ03。利用细胞感受态法将新植物表达载体分别导入根癌农杆菌EHA105、GV3101、LBA4404和发根农杆菌Ri15834中,为进一步研究其表达功能奠定了基础。     

CPPU、GA#-3处理对藤稔葡萄生物学性状及其生理基础效应的研究

ＣＰＰＵ、ＧＡ３处理对藤稔葡萄生物学性状及其生理基础效应的研究哈基姆＊张上隆陈大明陈履荣陈昆松徐昌杰陈志辉（浙江农业大学园艺系,杭州３１００２９）ＥｆｅｃｔｓｏｆＣＰＰＵ,ＧＡ３ＴｒｅａｔｍｅｎｔｓｏｎＦｒｕｉｔＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＦｕｊｉｍｉ...     

柑桔高效离体再生系统研究

研究了植物激素、刻伤、放置方式等因子对广柑子叶和上胚轴切段离体再生的影响,建立了一个高效的再生系统。该系统的最佳条件是：采用实生苗子叶和上胚轴茎段作为外植体,MS无机盐＋B5维生素＋5%蔗糖＋0.8%琼脂＋7.5 mg/L BA+1 mg/L NAA（pH 5.7）作为不定梢诱导培养基;子叶沿中间纵切为二,同时在非切面部分横向刻伤,切面朝下与培养基表面接触放置;上胚轴则切成0.5～0.8 cm长的切段,横放于培养基上。培养条件为恒温(26±1) ℃,首先在黑暗下培养15 d,而后转移至16/8 h光/暗周期下, 共经过70 d培养,95%子叶外植体均能发生不定梢,平均每个外植体上发生不定梢数为11.11个,96%的上胚轴切段能发生不定梢,平均每个外植体上发生不定梢数为5个。这一系统再生频率高,操作简便,适用于广柑的遗传转化。