NDV-F基因稳定表达P815细胞株的建立

在成功地构建NDV-F基因真核表达载体pCDNA3-NDV-F的基础上,应用脂质体LipofectamineTM2000介导使其转染小鼠肥大细胞瘤细胞株（P815）,以G418加压筛选（600μg/ ml）得到稳定的克隆并扩大培养成系。应用Trizol法提取细胞RNA,经RT-PCR鉴定,转染细胞在1600bp处出现目的条带。收集转染细胞,经Western blot和免疫荧光法检测到目的蛋白的表达。进一步将获得的细胞株在液氮中冻存6个月以检测其稳定性,实验证明该细胞株仍能很好的表达F基因。本实验采用脂质体法已成功建立了能够稳定表达NDV-F基因细胞株,为进一步研究ND核酸疫苗的效果奠定良好的实验基础。     

新城疫病毒（NDV）-F基因（NDV-F）稳定表达P815细胞株的建立

在成功构建新城疫病毒(NDV)-F基因真核表达载体pCDNA3-NDV-F的基础上,应用脂质体LipofectamineTM2000介导法,将其转染小鼠肥大细胞瘤细胞株(P815),经过加入G418(600 靏/mL),筛选得到稳定的细胞克隆株,并进一步扩大培养.应用Trizol法提取细胞RNA,经RT-PCR鉴定,转染细胞提取物在1 600bp处出现目的条带.收集转染细胞,经Westernblot和免疫荧光法检测到表达的目的蛋白.将获得的细胞株在液氮中冻存6个月后检测,该细胞株仍能很好表达NDV-F基因,表明其具有高度稳定性,证明采用脂质体法已成功地建立了能够稳定表达NDV-F基因的细胞株.     

免疫增强剂TMFN对犬外周血CD4/CD8比值的影响

采用检测犬外周血 CD4和 CD8比值变化的方法 ,观察犬注射免疫增强剂 TMFN和犬疫苗后 ,不同组之间的 CD4和 CD8比值 ,以证明该免疫增强剂对犬免疫系统的影响。结果表明 ,该免疫增强剂能够提高正常犬的细胞免疫水平 ,在犬注射疫苗的同时应用该免疫增强剂 ,可显著提高疫苗的免疫效力     

间接免疫细胞化学法快速检测新城疫病毒抗原的研究

本研究旨在建立一种简单、方便、准确、特异的方法检测新城疫病毒（Newcastle disease virus, NDV)。比较间接HRP-免疫细胞化学法与间接免疫荧光法两种方法检测NDV在COS-7细胞中的定位。两种试验方法都可以检测到NDV主要定位在COS-7细胞的胞浆内。间接HRP-免疫细胞化学法检测NDV要求一抗滴度≤1∶100,间接免疫荧光法要求的滴度≤1∶100。间接HRP-免疫细胞化学法检测NDV要求二抗滴度≤1∶300,间接免疫荧光法要求的滴度≤1∶50。而且结果观察中间接HRP-免疫细胞化学法要比间接免疫荧光法方便。间接HRP-免疫细胞化学法进行NDV检测优于间接免疫荧光法,是一种简单、快捷、准确的适用于检测NDV的技术。     

子宫切除术治疗犬子宫积脓症

子宫积脓症是指发情间期内脓性物质在母犬子宫腔内蓄积。子宫积脓症是子宫腔和子宫内膜的疾病,最终会导致子宫壁完全增厚,并会引起母犬全身症状。本病的主要原因是子宫内膜的囊泡状增生。母犬发情结束后,不论妊娠与否,功能性黄体可持续分泌黄体激素2个月以上。这种黄体激素长期持续作用于子宫内膜,引起子宫内膜囊泡状增生。这种状态的子宫对感染的抵抗力降低,     

非典型鸡新诚疫发生原因及防制措施

鸡新城疫俗称鸡瘟,典型鸡新城疫,是一种以呼吸困难、下痢、神经症状为主要特征的高度接触性、急性、烈性传染病.非典型鸡新城疫,是一种病程缓慢、症状不明显的温和性的传染病,雏鸡和小鸡的发病率和死亡率较高,成年鸡发病率和死亡率不高,病程多呈现温和性、渐进性、散发性死亡.     

仔猪白痢的诊断与防制措施

仔猪白痢是由致病性大肠杆菌引起仔猪的常见多发性传染病,多见于30日龄以内的仔猪,10～20日龄仔猪最为多发.该病多发生于冬、春季节,一般全窝或半窝以上仔猪腹泻,以排泄乳白色或灰白色的浆状或糊状粪便为特征.患病仔猪如果得不到及时治疗,会逐渐瘦弱死亡.有些仔猪虽然痊愈,但生长发育受阻,常给养猪业造成较大的经济损失.从该病的病原、流行病学、诊治等方面进行阐述,以期为科学防治仔猪白痢提供参考.     

家禽繁育技术与公众舆论

家禽的繁殖和选育可在任一年龄段进行。借助新技术,可以实现在不需要有许多鸡和历经多个世代的情况下,能够使种群的生产性能取得较大的进步。但是,误解和缺乏相关知识似乎成了这些新技术被消费者接受的屏障,但这不足以成为我们拒绝使用新技术的理由。     

恒温高温调节对赤点石斑鱼幼鱼的生长、性腺发育以及gnrh、fshβ和lhβ基因表达的影响

为了解恒定高温对赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)生长和繁殖的影响, 以孵化后120~420 日龄的幼鱼为研究对象, 对性腺发育以及与繁殖相关的基因gnrh、fshβ和lhβ表达进行了研究。对照组为自然水温(13.2~27.1 ℃)饲养, 实验组为26 ℃恒温饲养。每隔30 d或40 d采样1次, 比较两组中鱼的体长、体重、性腺指数(GSI)、性腺发育情况以及gnrh、fshβ和lhβ基因表达的差异。结果表明, 从240日龄开始, 实验组鱼的体长和体重均显著高于对照组(P<0.05)。实验结束时, 实验组体长约为对照组的1.3倍, 体重约为对照组的2倍。对照组GSI一直维持在0.25%以下的低值, 实验组GSI在330日龄前处于0.4%以下, 但在360日龄时出现GSI 1%以上的个体。在360、390和420日龄的个体中, 实验组GSI显著高于对照组(P<0.05)。实验结束时, 对照组中未检测到具有卵黄形成期卵母细胞的个体, 但实验组在330、360和390日龄出现了具有卵黄成熟期卵母细胞的个体。对照组和实验组间幼鱼脑中gnrh基因表达在各年龄段均无显著性差异(P>0.05), 但脑垂体中fshβ表达在360、390和420日龄, lhβ在390和420日龄时, 实验组均显著高于对照组(P<0.05)。研究表明, 26 ℃恒温调节不仅能促进赤点石斑鱼幼鱼体长、体重和GSI的增加, 同时也能显著提高脑垂体中fshβ和lhβ基因含量, 从而加速性腺发育成熟。