酶解啤酒废酵母生产橘小实蝇蛋白饵剂的研究

水解蛋白液是橘小实蝇蛋白饵剂的核心组成成分,研究利用酶解法从啤酒废酵母中提取水解蛋白的加工工艺。通过正交试验,对水解温度、pH、时间和加酶量4个水解影响因素进行分析,结果显示,最佳工艺条件为pH值6.0,温度50℃,时间18h,加酶量为2.0mg/mL。室内生物测定的结果表明,水解蛋白液对橘小实蝇的引诱率可达60.00%,其中雌性和雄性的引诱率分别为63.30%和56.70%。总糖与蛋白质含量的比例是影响引诱率的重要因素,当二者之比为200:1时,引诱率最高。     

橘小实蝇个体食量测定

橘小实蝇在有选择取食的情况下更倾向于倒挂取食,在无选择性取食的情况下位置对取食无影响(P>0.05).橘小实蝇对染料的排空试验结果表明,甲酚红和荧光素钠在4 h内即可到达后肠,通过染料J-管技术测得橘小实蝇取食量在2 h内就能达到最大,所以在测定橘小实蝇食量时饲喂时间以2 h为宜.染料J-管技术测定结果表明:3日龄和6日龄雌雄橘小实蝇2 h内个体食量分别为(4.0412±0.3348)、(3.4409±0.1132)、(5.6543±0.2852)、(4.6808±0.2654)g.     

成蜂饲养密度和繁蜂益害比对阿里山潜蝇茧蜂子代的影响

当成蜂饲养密度为300对.笼-1时,子代雌蜂数量占总出蜂量的60.34%;随着成蜂饲养密度的增大,子代雌蜂比例逐渐降低;当成蜂饲养密度达700对.笼-1时,子代雌蜂所占比例降至38.30%.当寄主橘小实蝇卵与寄生蜂雌蜂的比例为5∶1时,寄主发育至蛹期的数量和羽化的寄生蜂数量分别为10.25粒和8.88只;随着寄主卵比例的增大,寄生蜂子代出蜂量也随之增多;当寄主卵与寄生蜂雌蜂的比例增至25∶1后,寄生蜂子代出蜂量不再增多.     

橘小实蝇幼虫液体人工饲料正交设计优化

采用正交试验设计方法,对橘小实蝇幼虫液体人工饲料组成成分啤酒废酵母、蔗糖、防腐剂及饲料pH值4种因素3个水平进行优化筛选,以橘小实蝇化蛹率、蛹重、羽化率、产卵高峰期的单雌产卵量和F1卵孵化率为考察指标,求出橘小实蝇幼虫液体人工饲料的最佳配方为啤酒废酵母17.89 g,蔗糖10.34 g,防腐剂0.3 g,蒸馏水100 mL,pH值5.5.     

寄主龄期和温度对布氏潜蝇茧蜂和长尾潜蝇茧蜂种间竞争的影响

在实验室条件下研究了寄主龄期和温度对布氏潜蝇茧蜂和长尾潜蝇茧蜂种间竞争的影响,结果表明,以两种寄生蜂对3,4日龄橘小实蝇幼虫为寄主混合寄生后,长尾潜蝇茧蜂的出蜂率明显高于布氏潜蝇茧蜂,以2日龄做寄主时,结果则相反;混合寄生与单独寄生相比,长尾潜蝇茧蜂的出蜂率没有差异,布氏潜蝇茧蜂出蜂率显著下降.在25,35℃条件下,混合寄生的结果是长尾潜蝇茧蜂出蜂率显著高于布氏潜蝇茧蜂,在15℃条件下,两者的出蜂率差异不显著.     

多杀菌素和荧光桃红B对橘小实蝇的毒力测定

为进一步筛选适合田间施用蛋白诱剂条件下的实蝇杀虫剂种类和用量,室内测定了多杀菌素和荧光桃红B分别与阮酵母水解蛋白组配后对橘小实蝇自由取食的胃毒毒性.结果表明,多杀菌素和荧光桃红B均适合与水解蛋白组配防治橘小实蝇.多杀菌素和荧光桃红B对橘小实蝇雌、雄成虫在5h内的致死中浓度分别为12.7570、13.9535和779.9378、826.6259mg/kg,16和100mg/kg多杀菌素对橘小实蝇雌、雄成虫的致死中时间分别为4.1904、4.9730h和2.4877、2.6755h,630和1000mg/kg荧光桃红B对橘小实蝇雌、雄成虫的致死中时间分别为5.3507、4.9462h和4.7650、4.5715h.     

卵期辐照对橘小实蝇生长发育繁殖的影响

为研究卵期辐照对橘小实蝇生长发育及繁殖的影响,取12、24、36 h卵龄的橘小实蝇卵分别经过60Co 5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、30.0、35.0、40.0Gy的剂量辐照,比较辐照后橘小实蝇卵的孵化率。结果显示,大于5.0Gy的辐照剂量显著抑制12 h卵的孵化,而各剂量的辐照对24、36 h的橘小实蝇卵的孵化率均无显著影响。取孵化率较高的36h的辐照卵做后续研究,结果表明,所有剂量辐照对橘小实蝇的影响无性别差异;20Gy及以上的剂量辐照显著降低蛹重,且均使橘小实蝇的蛹不能羽化;随辐照剂量的增加,橘小实蝇成虫飞出率、死亡率增大,子一代F1卵孵化率降低。15~20Gy的剂量辐照36 h卵龄的卵可达到对橘小实蝇幼虫和蛹的影响最小但能显著降低或抑制成虫羽化的目的。本研究为有效分离橘小实蝇与以橘小实蝇卵为寄主的寄生蜂提供一定科学依据,为人工大量饲养寄生蜂防治橘小实蝇的危害提供基础。     

橘小实蝇蛋白饵剂中氨基酸的HPLC分析及生物测定

采用生物测定的方法比较Prima蛋白饵剂和自行研制蛋白饵剂的引诱效果。结果表明,两者对橘小实蝇(Bactrocera dorsalis(Hendel))引诱效果相当,但水解后的同种蛋白饵剂引诱效果高于水解前。采用柱前衍生高效液相色谱法(Acc Q·Tag法)测定以上两种蛋白饵剂中氨基酸的种类和含量,结果表明,这两种蛋白饵剂中均含有游离氨基酸17种,总氨基酸18种。其中Prima蛋白饵剂总氨基酸含量为52.847 6mg/m L,游离氨基酸含量为5.736 4 mg/m L,多肽含量为4.711 12 mg/m L;自行研制的橘小实蝇蛋白饵剂总氨基酸含量为65.624 3 mg/m L,游离氨基酸含量为6.301 0 mg/m L,多肽含量为59.323 3 mg/m L。通过比较两者氨基酸的差别,为蛋白饵剂的工业化生产质量监控提供方法依据。     

高温对阿里山潜蝇茧蜂体内保护酶系活性的影响

采用分光光度法测定不同温度条件下(29、32、35、38、41℃)阿里山潜蝇茧蜂[Fopius arisanus (Sonan)]幼虫、蛹和成蜂体内保护酶系活性的变化.结果表明:(1)经不同高温处理后,阿里山潜蝇茧蜂各虫态体内过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性均明显高于对照组,38℃为幼虫、蛹和雌蜂体内CAT清除H2O2的最适温度.同一处理温度下,幼虫体内CAT活性高于蛹,雄蜂体内CAT活性高于雌虫.(2)热胁迫处理后,雌雄蜂体内过氧化物酶(Peroxidase,POD)活性均高于对照,且雄蜂体内POD活性高于雌蜂.幼虫、蛹和雌蜂体内POD活性随温度的升高呈“M”形变化趋势,分别在35、38、35℃时达最大值.(3)阿里山潜蝇茧蜂高温暴露后,幼虫和蛹体内超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性均在35℃时达最大值,雌雄蜂体内SOD活性均明显高于对照,分别在35、32℃时活性达到最大.     

切割潜蝇茧蜂触角感器超微结构及触角电位反应

在扫描电镜下观察了切割潜蝇茧蜂的触角感器,并测定了触角对其寄主植物主要挥发物的电生理反应(EAG).结果表明:切割潜蝇茧蜂雌成虫触角有毛形感器、板状感器、腔锥形感器、蒲姆氏鬃等4种,雄虫除了有以上4种外,还有腔形感器;雄虫的腔锥形感器比雌虫多.切割潜蝇茧蜂交配前的雌雄虫对反-2-癸烯醛和香橙烯的EAG反应最强烈;交配后雌雄虫触角最高EAG反应值均由里那醇引发.雌虫的里那醇在交配前后差异显著,其余化合物差异不显著;雄虫的里那醇和α-法呢烯在交配前后差异显著,其余化合物差异不显著.