PEDV分离株S1基因的重组杆状病毒真核表达

为了研究猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)分离株(PEDV/LA/2014/02)纤突蛋白(S1)的真核表达及其反应原性,本研究利用杆状病毒真核表达系统表达出重组His-PEDV-S1蛋白。利用在线软件分析PEDV S1基因在sf9细胞内的稀有密码子,经优化密码子后的基因进行人工合成,合成后的PEDV S1基因被克隆至杆状病毒的穿梭载体(pFastBac HT A)中,转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞进行重组,PCR方法验证后将重组成功的杆状病毒基因组转染sf9细胞,获得包装成功的杆状病毒,该病毒进一步接种sf9细胞,显微镜观察重组病毒引起的细胞病变,RT-PCR方法验证PEDV S1基因的mRNA表达水平,SDS-PAGE、Western blotting方法验证重组PEDV S1蛋白的表达及其反应原性。结果显示,试验成功构建了重组穿梭质粒pFastBac HT A-PEDV-S1(pSL598),成功包装表达了PEDV S1的重组杆状病毒,重组杆状病毒能使sf9细胞出现细胞变大、胞内有空泡等典型病变,PEDV S1基因的mRNA获得表达,重组蛋白His-PEDV-S1在sf9细胞中得到表达,蛋白质大小为83 ku左右,主要存在于细胞沉淀中,表达的重组蛋白能与小鼠抗His抗体和猪抗PEDV阳性血清反应,说明该蛋白具有较好的反应原性。本研究为研制PEDV新流行毒株新型亚单位疫苗和防控该毒株的流行提供了材料。     

一株鸽Ⅰ型副粘病毒的分离鉴定及F基因遗传进化分析

东北某动物园鸽群发生异常死亡,采集病死鸽脏器,通过SPF鸡胚进行病毒分离,采用血凝试验和RT-PCR试验,鉴定结果显示尿囊液呈Ⅰ型副粘病毒核酸阳性。通过对F基因进行测序和遗传进化分析,结果表明,分离株BS0904裂解位点基序为112RRQKRF117,符合NDV强毒株的典型分子特征;分离株F基因与疫苗株LaS ota、B1、Clone 30、VG/GA、V-4、Mukteswar及经典强毒株F48E9的核苷酸同源性较低,仅为84. 2%—85. 8%;而与2011—2013年在中国多个地区鸽中所分离毒株核苷酸同源性则高达98. 8%—99. 9%,并且在遗传进化树上位于同一分支,属于ClassⅡ,基因型为Ⅵb-EU/re。该基因型毒株在中国鸽群中有较长时间、较大范围的流行传播,且与疫苗株遗传进化关系较远,说明疫苗株不能对鸽群提供有效的免疫保护,因此为了更好地对鸽群进行Ⅰ型副粘病毒的有效防控,需要针对Ⅵb基因型研发新疫苗。     

石河子总场“十一五”末GDP达15亿元

＂十一五＂收官之年,新疆兵团石河子总场（北泉镇）GDP从＂十五＂末的5.15亿元增加到15亿元,完成规划任务的136%。2010年,石总场（北泉镇）的财政收入是＂十五＂期间五年财政收入总和的四倍。     

证券交易税设计创新：触发式证券交易税

触发式证券交易税是根据所选定的基础变量的变化情况,确定对纳税人范围调整的时机与对税率调整的时机和幅度,进而影响证券市场的价格水平和成变量,挤出市场泡沫,形成对市场的有效调控.     

关于农业院校大学生课外阅读的几点思考

课外阅读是增强学生人文素质、促进全面发展、培养创新能力的重要环节,对于构造大学生的合理知识体系,丰富大学生的精神生活及发展智能都具有深刻的影响。了解大学生的课外阅读情况,有助于把握大学生的思想脉搏,促进大学校园良好读书风气的形成。     

盐胁迫和6-BA、Ca(NO3)2、SA对小麦POD的影响

NaCl胁迫下，6-BA、Ca（NO3）、SA处理小麦幼苗后，对POD同工酶酶带无影响，但酶带染色程度加’深，POD活性升高，说明NaCI胁迫下SA、Ca（NO3）2、6-BA通过加强酶的活性以调整代谢，适应盐胁迫环境，从而提高小麦的耐盐性。     

基于GIS的未利用地适宜性评价——以山东省莱州市为例

利用莱州市第2次土地调查成果和2010年的遥感影像,获得最新的未利用地现状数据。运用GIS的数据管理和空间分析功能,结合选择的评价因子建立了莱州市未利用地适宜性评价数据库,以此对未利用地的适宜性进行综合评价,得到了定量化的评价结果,为莱州市未利用地的规划和开发提供了数据支持。     

樱桃萝卜越冬栽培技术

樱桃萝卜越冬栽培,经济效益较高,因为其上市时间正值元旦、春节的蔬菜淡季,可填补这一空档期.但樱桃萝卜的生育期在严寒的冬季,需要较好的保温设施.樱桃萝卜越冬栽培经济效益高,而且其生长速度快、生长周期短,广大菜农也都乐于栽培.     

湄潭实验区农村土地改革的历史沿革（1987-2011）

随着社会经济的快速发展与城市化进程的迅速推进,土地问题日益严峻,农村土地制度改革的呼声越来越高,已成为中国社会经济进一步发展必须突破的瓶颈。本文回顾了湄潭实验区土地改革的历程,并对当前农村土地改革进行了思考。     

河南省重点保护植物优先保护等级划分研究

河南省分布有35种国家重点保护植物和98种省重点保护植物.以植物的稀有性、濒危性、种型特性、经济价值和科学文化价值作为评价指标,根据层次分析法对比133种植物的优先保护顺序进行综合评定,划分优先保护等级,由此将河南省内的重点保护植物分为3个等级,即一级优先保护植物20种,包括14种国家重点保护植物和6种省重点保护植物;二级优先保护植物40种,其中国家重点保护植物10种、省重点保护植物30种;三级优先保护植物73种,包括11种国家重点保护植物和62种省重点保护植物,较好地反映了河南省重点保护植物的现状,并提出一些相应的保护措施.