花椰菜种子活力和抗氧化酶活性及幼苗光合色素对NaCl胁迫的响应

以花椰菜银农70天自交系种子为材料,研究了7个NaCl胁迫浓度（0、34、68、102、136、170、204 mmol?L-1）对种子活力和抗氧化酶活性及幼苗光合色素的变化特点。结果发现：① 随着NaCl胁迫浓度的增加,种子发芽率、发芽势、发芽指数、幼苗叶绿素a/b（Chla/Chlb）和类胡萝卜素/叶绿素（Car/Chl）值呈线性降低趋势,丙二醛（MDA）含量呈线性增加趋势。② 种子超氧化物歧化酶（SOD）活性、幼苗干鲜质量以及Chla、Chlb、Chl和Car含量随NaCl胁迫浓度增加呈“钟形”抛物线变化规律,在68～136 mmol?L-1 NaCl胁迫下出现最大值|相对盐害率变化相反,呈“倒钟形”变化特点,在34 mmol?L-1 NaCl胁迫下出现最小值。③ 种子过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性均随NaCl胁迫浓度增加呈多项式变化规律,即在中度NaCl胁迫（136 mmol?L-1）下活性升高,而重度NaCl胁迫（204 mmol?L-1）下降低。综合分析表明,种子相对盐害率、抗氧化酶（SOD、POD和CAT）活性及幼苗Chla、Chlb、Chl和Car含量不仅能较好地指示NaCl胁迫对花椰菜种子活力及相关生理生化的伤害程度,并且可反映其受NaCl胁迫伤害的强度水平,但发芽率、发芽势、发芽指数、Chla/Chlb和Car/Chl值则无法指示|102～136 mmol?L-1 NaCl胁迫浓度是花椰菜种子活力及相关生理生化代谢受到伤害的盐胁迫阈值。     

东魁杨梅控梢促花试验

东魁杨梅引进温州栽培 ,表现为营养生长过旺 ,始果期迟和产量低 ,特别是种植在土层深厚的黄壤山地 ,表现尤为突出。应用植物生长调节剂可抑制杨梅树体营养生长 ,促进花芽分化。我们于 1998— 1999年对该品种进行控梢促花试验。现将试验结果报道如下。1　材料与方法　　试验设在瑞安市湖岭镇盘龙山村 ,供试品种为 10年生东魁杨梅 ,土壤为黄壤 ,p H值 4 .82。供试药剂为5%烯效唑超微可湿性粉剂 (江苏省张家港市联合化工厂制造 )和 15%多效唑可湿性粉剂 (浙江省兰溪农药厂制造 )。试验共 13个处理 ,处理 1:喷布烯效唑 2 0 0倍液 1次 ;处理 2 :…     

甘蓝SSR标记在近缘种青花菜的通用性及其应用

本研究对50条甘蓝SSR引物在其近缘种青花菜中的通用性进行了分析,结果表明,38对引物在青花菜上可有效扩增,扩增产物分子量在100～1500bp,有效扩增比率为76%,其中18%具有较好的多态性,揭示了两种作物基因组间存在一定的相似性。同时利用获得的多态性较好的9对引物对青花菜进行基因型鉴定和遗传多样性分析,20份青花菜基因型中共检测到51个基因位点,平均每个引物组合可扩增出5.67个条带,多态性为66.7%。多引物组合可鉴别出所有青花菜基因型。聚类分析结果表明同一来源的基因型间具有相近的遗传基础,且聚类与熟性具有一定的相关性。本研究为今后青花菜种质资源的收集、利用及分子标记辅助育种提供了新的SSR标记和参考。     

板栗脂质转运蛋白基因的克隆及表达

利用RACE技术从板栗短雄花序突变体中扩增得到660bp的板栗脂质转运蛋白(lipid transfer protein,LTP)cDNA片段。该cDNA编码118个氨基酸,具有8个位置保守的半胱氨酸(C)残基及26个氨基酸的信号肽,它与棉花、草莓脂质转运蛋白氨基酸序列相似性为63%,基因序列已提交数据库(GenBank),其登录号分别为FJ490676(基因)和ACL01093(蛋白)。荧光定量分析表明板栗短雄花序突变体较正常雄花序的脂质转运蛋白表达量更高。将板栗脂质转运蛋白基因插入到硫氧还蛋白融合表达载体pET32a(+)中,构建了板栗的原核表达载体pET-LTP,在大肠杆菌菌株Rosetta-gamiTM2(DE3)中,IPTG诱导5h大量表达约为30ku的融合蛋白,通过Ni2+-chelating sepharose fast flow柱纯化的融合蛋白具有抑制板栗镰刀菌属病原真菌孢子萌发的功能。     

磁场预处理对花椰菜花药培养的影响

采用磁场强度300，500，700mT预处理大部分花粉发育处于单核中期和单核靠边期的花蕾，以提高花椰菜花药培养的愈伤组织诱导率和绿苗分化率，结果表明，磁场预处理可以明显提高愈伤组织诱导率，以均匀磁场预处理30min、磁场强度为300mT的效果较好，提高诱导率28.87%；经过磁场预处理，两种不同培养基的愈伤组织诱导率的差异比对照间差异明显缩小，即经磁场预处理的材料对培养基的选择性降低；在同一种诱导出的愈伤组织绿苗分化率的差异更明显，M2培养基上诱导出的愈伤组织绿苗分化率比M1培养基上的愈伤组织平均高13.2%-26.2%。     

甘蓝型油菜与青花菜种间杂种子房离体培养研究

利用子房离体培养的方法克服了甘蓝型油菜与青花菜杂种后代杂种胚的衰亡,并通过组织培养技术获得了杂交后代。试验结果表明：授粉后15d的子房离体培养效果最好,获得7粒饱满种籽,其中2粒发芽,发芽率为0.29;1/2MS+B5有机+IAA1.5mg/L+蔗糖50g/L为最佳的子房离体培养基,平均每个角果可得到杂种0.17粒,杂种发芽率可达66.7%;通过比较父母本和杂交后代性状,发现杂交后代的生物学性状偏向父本。     

非生物胁迫下青花菜LncRNA内参基因的筛选

长链非编码RNA在植物抵御逆境胁迫中起着重要作用。适宜的内参基因是准确评价其表达水平的基础。本研究利用实时荧光定量PCR技术检测16个青花菜LncRNAs表达水平,并通过geNorm、NormFinder、BestKeerper软件进行表达稳定性分析。结果表明：青花菜的16个LncRNAs在不同逆境胁迫下表达稳定性存在差异。其中在弱光胁迫条件下, XLOC_000400表达最稳定;在低温胁迫条件下 XLOC_030832基因稳定性最好;在干旱和渍水胁迫条件下最稳定表达的内参基因分别是 XLOC_007087和 XLOC_012179;高温和盐胁迫处理下最稳定表达的内参基因均为 XLOC_007980。 XLOC_010342和 XLOC_007980在青花菜不同逆境胁迫下的表达稳定性较好。研究结果可为准确定量青花菜不同逆境胁迫下的LncRNAs提供合适的内参基因。     

花椰菜未受精子房、花托、花序轴离体培养诱导成苗研究

以花椰菜的花托、花序轴和未受了房为外植体,诱导出不定芽,并进行继代增殖培养,在工增殖培养基上每隔２５～３０天,不定芽可以增殖５～６倍,不加激素的１／２ＭＳ培养基上,试管苗生根率达到９８％以上,移栽成活率达到９５％以上。经观察,花托和未受精了再生植株是由外植体直接分化而来,不经过愈伤组织阶段,这样可避免不良变异,保持材料的遗传稳定性。     

亲和素磁珠分离毛竹SSR标记方法的优化

在参考其它文献报道的基础上,构建毛竹SSR位点富集文库。用EcoRⅠ分别和DraⅠ、EcoRⅤ、SmaⅠ、PvuⅡ四种平端限制性内切酶对毛竹基因组DNA进行双酶切,酶切片段回收后与根据抑制性PCR原理设计的接头连接。在利用亲和素磁珠富集含有SSR序列的DNA片段过程中,对杂交、漂洗及洗脱步骤进行优化。通过三引物特异PCR筛选含有SSR序列的阳性克隆并结合测序结果对富集SSR文库进行评价,确定了一条简单、经济、高效分离竹类植物SSR标记的方法。     

非生物胁迫下青花菜内参基因的筛选

【目的】检测非生物胁迫下常见内参基因的表达稳定性,筛选出青花菜的适宜内参基因。【方法】以青花菜高代自交系“KU19-3”为试验材料,利用已有的转录组数据和文献,筛选出31个候选内参基因,对其在不同非生物胁迫下(盐、干旱、渍水、弱光、高温和低温)的表达水平进行荧光定量PCR检测,采用geNorm、Normfinder和BestKeeper软件分析其表达稳定性,从而筛选出适宜的内参基因。【结果】31个候选内参基因的扩增特异性良好,且表达水平差异明显。其中BOL029171的Ct值最小,表达量最大;而BOL001470的Ct值最大,表达量最小。其他基因的Ct值介于20～40。3种软件综合分析结果表明：BOL034565和BOL008820在高温胁迫下最稳定,BOL043724和BOL005937在弱光胁迫下表达稳定性最好,BOL043724和BOL001470、BOL005937和BOL006136分别在低温和盐胁迫下表达最稳定,BOL024326和BOL025875、BOL008820和BOL001788分别在渍水和干旱胁迫处理下表达最稳定。综合上述得出BOL006136和BOL00882...