芜菁Ogura胞质不育系的选育初报

Ogura胞质不育甘蓝型油菜(Brassica napus L．)不育源植株苗期不黄化，蜜腺发育正常，表现为全不育。采用本实验室选育的芜菁(B．campestris ssP．rapifera Sinsk)优良自交系‘耐病98-1’和‘白蔓菁’为回交父本，2000年开始将不育源和回交亲本进行杂交和多代回交选择，并对F1，BC1，BC2和BC3植株植物学性状，特别是直根膨大情况，包括直根大小、形状和颜色，育性特征，蜜腺发育情况，花粉生活乃以及亲和指数等进行观察鉴定。     

白菜雄性不育相关基因BcMF3功能的反义RNA验证

为了研究白菜等十字花科植物花粉发育及雄性不育发生的机理,根据编码果胶甲酯酶的白菜雄性不育相关基因BcMF3的cDNA序列设计特异引物,从普通白菜(Brassica campestris ssp.chinensis var.communis,syn.B.rapa ssp.chinensis var.communis)花蕾cDNA中扩增出458 bp的片断,构建BcMF3的反义RNA植物表达栽体,然后转化菜心(B. campestris ssp.chinensis var.parachinensis).研究发现,31.3%菜心转基因植株花粉表现出畸形,而且只有部分花粉具有活力,花粉离体萌发率降低为31.6%,其花药果胶甲酯酶活性降低了12.8%.上述结果表明BcMF3基因与普通白菜和菜心等白菜植物的花粉发育密切相关.     

Ogura雄性不育甘蓝型油菜×白菜、芜菁杂种F1及其回交后代染色体减数分裂行为分析

 以甘蓝型油菜（Brassica napus L.，AACC，2n＝38）Ogura CMS材料与白菜 （B. campestris ssp. chinensis Makino, AA，2n＝20） 品种新选1号、矮脚黄和芜菁 （B. campestris ssp. rapifera Sinsk , AA，2n＝20）品种耐病98-1进行杂交、回交。F1花粉母细胞减数分裂染色体构型为10Ⅱ+9Ⅰ。BC1生长势强的群体中，新选1号和耐病98-1染色体构型多为10Ⅱ+9Ⅰ，矮脚黄的染色体构型以10Ⅱ和10Ⅱ+7Ⅰ占优势；BC1生长势弱的群体中，新选1号和耐病98-1染色体构型多为10Ⅱ+7Ⅰ，矮脚黄的染色体构型多为10Ⅱ+1Ⅰ。BC2生长势强的群体中，新选1号的染色体构型多为10Ⅱ+1Ⅰ，矮脚黄多为10Ⅱ；BC2生长势弱的群体中，新选1号和矮脚黄多为10Ⅱ，耐病98-1多为10Ⅱ+6Ⅰ、10Ⅱ+5Ⅰ。BC3根尖染色体观察新选1号、矮脚黄染色体数达到100%，耐病98-1中染色体数为20的细胞达到78.12%。同时对BC1代不同染色体数在减数分裂Ⅰ的分离规律进行了研究。结果表明，AACC染色体组物种与AA染色体组物种杂交经少数几代回交即可获得后代性状相对稳定的不育系。     

白菜核雄性不育两用系花蕾的mRNA差别显示及其cDNA差异片段分析

用mRNA差别显示技术对白菜核雄性不育两用系中不育株群与可育株群花蕾总RNA进行了比较分析.在6种反转录模板和20种差异随机引物共120种组合的选择扩增中共回收了18个cDNA差异片段,对其中6个cDNA差异片段进行Northern验证,获得了一个白菜核雄性不育两用系可育株群并在花蕾中特异表达的阳性差异片段,简称为B0302-4.Northern验证结果表明它在不育株中的表达受到了明显的抑制,其长度为463 bp.经GenBank BLAST查询,它与拟南芥第一条染色体上编码细胞色素P450的基因CYP86C4核苷酸序列有84.3%的同源性.     

CYP86MF反义基因转化获得青花菜雄性不育植株

 通过根癌农杆菌LBA4404（含质粒反义CYP86MF基因片段）介导转化青花菜（Brassica oleracea L.var. italica Plenck）下胚轴，经卡那霉素选择压下连续选择、扩繁和生根培养，获得了青花菜转基因植株。经PCR、Southern blot、Northern blot检测证明，CYP86MF基因已经整合至转基因植株染色体中。经花器官观察，转基因植株中有雄蕊发育不良、花粉不萌发的植株。转基因植株自交不能结实，用转基因植株花粉对正常植株进行人工授粉，不能正常结实，表明转基因植株花粉是不育的。用正常花粉对转基因不育植株进行人工授粉，转基因不育植株能正常结实，表明转基因不育植株的雌性器官发育正常，其不育性与CYP86MF基因在转基因植株中的表达有关。     

白菜细胞核雄性不育两用系的性状比较分析

用比较分析的方法，对白菜核雄性不育两用系中不育株与可育株的植株性状、育性、花器结构和花粉扫描电镜形态等进行观察研究，结果表明：白菜核雄性不育两用系中不育株花粉败育彻底，不育株与可育株呈1：1分离，是一种稳定可靠的核雄性不育两用系；对不育株与可育株花蕾总蛋白进行了SDS-PAGE凝胶电泳，发现不育株与可育株都有各自的一条特异蛋白条带，分别命名为A-1和B-1，两者的表达量都比较高。     

早捷苹果南引初报

早捷苹果南引初报童昌华，陈履荣，马秋燕，叶纨芝，范云芳（浙江农业大学园艺系杭州３１００２９）（浙江绍兴农校）苹果南移有较早的历史，早在５０年代初长江以南许多地区就进行过这方面的工作，但至今仍没有太大的进展。从区划上看，长江以南地区不是发展苹果的适宜地...     

激素对白菜GMS系不同育性外植体再生植株的影响

 以白菜核雄性不育两用系的可育株和不育株带有子房及花柄的花托为外植体, 比较了不同育性外植体再生体系的异同; 并结合内源激素含量测定, 探讨了内源激素、外源植物生长调节剂间的相互作用对不同育性外植体再生的影响。结果表明: 不育和可育再生体系所需的最佳NAA浓度分别为0.2 mg·L^-1和0.1 mg·L ^-1; 在最适的NAA浓度下补给不同浓度的6-BA, 不育外植体不定芽诱导率差异不大, 而可育外植体不定芽诱导率则随62BA浓度的增加表现不规律的变化。不同育性的外植体内源激素含量测定结果表明, 可育外植体内源GA₃、IAA和ZT含量分别比不育外植体高出37.8%、28.0%和224.9%; ABA含量则是不育外植体比可育外植体高出20.4%。花柄及花托再生得到的不定芽在不继代或继代次数少的情况下生根培养时高频现蕾, 生根率极低; 随着继代培养时间的延长, 生殖生长趋势逐渐减弱, 生根率明显提高。     

萝卜肉质根膨大过程库活性与蛋白质变化研究

通过对萝卜肉质根膨大过程中干物质在根、冠部的分配以及蔗糖代谢相关酶活性变化等的研究,结果发现在播种后27 d根部库活性最强,碳水化合物主要向地下部输送,直根开始膨大.库活性的变化与蔗糖转化酶活性无明显相关性.对可溶性蛋白进行SDS-PAGE分析发现,虽然叶片中蛋白质表达无明显差异,但在播后24 d直根中有一条特异蛋白质条带出现,其表达量随肉质根生长而加大,其作用有待进一步验证.     

芸薹类蔬菜基因组DNA遗传多样性的RAPD分析

采用随机引物扩增多态性DNA（RAPD）技术,对芸薹类（2n=20）蔬菜作物的33个品种进行了遗传多样性检测。从70个引物中筛选出37个引物,共扩增出353带。其中,多态带有260条,扩增片段长度大多数集中在0.9～1.6　kb之间。不同引物的检测效率相差很大。运用5个引物扩增的10条RAPD特征带,可以作为一组DNA指纹,区分所有供试7个大白菜品种。