蝉拟青霉类枯草杆菌蛋白酶基因的克隆及其序列和蛋白质分析

蝉拟青霉是一种常见的昆虫病原真菌,被广泛应用于生物防治。本研究根据GenBank中已登录的淡紫拟青霉、粉拟青霉、球孢白僵菌和金龟子绿僵菌的类枯草杆菌蛋白酶基因序列的同源性比较,以它们高度保守的核苷酸序列设计一对引物,采用RT-PCR和3'/5'-RACE相结合的方法,从蝉拟青霉中克隆出完整的类枯草杆菌蛋白酶(subtilisin-like protease)cDNA基因序列。cDNA全序列为2 031 bp,该序列5'-端和3'-端的非编码序列长度分别为170 bp和262 bp,开放阅读框为1 599 bp,编码532个氨基酸,信号肽长度为18个氨基酸,前肽长度为133个氨基酸。该基因编码的蛋白序列与虫草棒束孢(Isaria farinosa)、球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、蛹虫草(Cordyceps militaris)和哈茨木霉(Trichoderma harzianum)类枯草杆菌蛋白酶有较高的同源性,同源性分别为88%、88%、89%和71%。成熟蛋白具有典型的丝氨酸蛋白酶活性位点,同时有5个半胱氨酸,4个潜在的N-糖基化位点,位于细胞的液泡中与分泌途径相关,二级结构中以α-螺旋和无规则卷曲为主。     

生物农药的应用现状及其前景

从生物农药的各个类别综述了国内外生物农药的应用发展现状,提出了目前制约国内生物农药产业发展的问题,并对我国的生物农药发展进行了建设性的展望。     

蝉拟青霉杀虫活性成分的分离

 【目的】采用化学分离分析和生物检测相结合的方法，首次从蝉拟青霉[Paecilomyces cicadae （Miq.）Samson]子实体提取物中分离出对小菜蛾[Plitella xylostella （Lepidoptera：Plutellidae）]具有杀虫活性的化合 物。【方法】在活性检测引导下，蝉拟青霉子实体40%乙醇提取物经二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇溶剂依次萃取（剩余溶液为水溶组分），再经过大孔树脂、HPLC和Sephedex LH-20分离纯化得到杀虫活性化合物。【结果】分离纯化到一 个白色粉末状化合物，浓度10 mg•ml-1，24、48和72 h时校正死亡率分别为（95.1±1.8）%、（97.7±1.6）%和（99.1±1.7）%。【结论】该化合物具有较好的杀小菜蛾活性，对酸稳定，对胃蛋白酶不敏感，并具有茚三酮不显色等其它理化性质。     

2%春雷霉素液剂防治水稻稻瘟病田间药效试验

通过本次试验进一步验证了2％春雷霉素液剂防治稻瘟病田间防治效果，2％春雷霉素液剂30g ai／ha，平均防治效果达到86．43％，同时试验还说明2％春雷霉素液剂防治稻瘟病穗瘟防治效果优于相同浓度的2％春雷霉素可湿性粉剂，可以在生产上推广应用。     

56%阿维菌素·炔螨特乳油防治桔全爪螨药效试验

对56%阿维菌素.炔螨特乳油进行防治桔全爪螨的田间药效试验。结果表明,与单剂相比,该复配药剂对桔全爪螨防治效果较好,且对作物无药害,并具有广谱性和较长持效期;在桔全爪螨发生初期,与其他药剂交替使用,可取得较好防效。     

虫草蝉花废弃培养基对肉鸡免疫因子及生长发育的影响

蝉花(Cordyeps cicadae)是由麦角菌科(Claviceptaceae)的蝉拟青霉[Paecilomyces cicadae(Miquel)Samson4]真菌寄生于蝉(Platylomia pie li Koto)若虫的虫菌复合体,是一类珍贵的传统中药。现代药理研究表明天然蝉花及人工培养蝉花中含有多糖,腺苷和N6-(2-羟乙基)腺苷等核苷类物质,氨基酸,生物碱及麦角甾醇等多种活性物质,具有明显的解热镇痛、抗惊厥等作用,以及显     

2%武夷菌素水剂防治黄瓜白粉病药效试验

[目的]明确2%的武夷菌素水剂在黄瓜白粉病上的防治效果。[方法]以2%武夷菌素180倍液2、60倍液3、40倍液喷雾为处理,以50%福美双可湿性粉剂500倍液喷雾为常规对照,以清水喷雾为空白对照,施药2次,每次间隔7 d,分别于药前、第1次药后7 d、第2次药后7 d、第2次药后14 d调查黄瓜白粉病的发病情况,并计算防效。[结果]2%武夷菌素水剂对黄瓜白粉病有较好的田间防治效果,可有效控制黄瓜白粉病的蔓延;2%武夷菌素水剂各处理均未对黄瓜产生药害,对黄瓜的生长发育无明显影响,且对其他病虫害或有益生物无直接影响;2%武夷菌素水剂260~340倍液喷雾对黄瓜白粉病的防治效果较好,且成本较低。[结论]2%武夷菌素水剂是防治黄瓜白粉病的一种有效无公害生物农药,可以在生产上推广使用。     

生防药剂对草莓灰霉病的防治效果

为筛选适用于防治草莓灰霉病的生防药剂,测定了4种生防药剂对灰霉病菌的抑制效果,并开展了田间药效试验。室内生测结果表明：4种供试药剂均能明显抑制灰霉菌的菌丝生长,其中多抗霉素的抑菌效果最高,抑制率达100%。田间药效调查结果表明：4种供试药剂控病保果的效果较为接近,第2次药后14 d防效在84.24%～89.13%,显著高于对照药剂腐霉利,持效性较好。