辣椒棚室优质安全高效栽培（三）

三、大棚辣椒秋延后栽培关键技术适宜江苏省大棚秋延后栽培的辣椒品种主要有苏椒14号、09Q13、09Q14、9006、江蔬2号牛角椒;尖椒99;苏椒13号甜椒以及部分国内外辣甜椒。1.一网一膜小拱棚育苗要把好五关:(1)播期关。黄淮海地区最     

辣椒EST-SSR标记的开发

对4000条辣椒EST序列进行筛选,获得了119条含有SSR的EST,共设计出35对EST—SSR引物,占所有EST序列的0．87％。在所有的SSR—ESTs中,二核苷酸重复含量最高,其次是三核苷酸重复。GA和AGA分别是二,三核苷酸重复中含量最高的重复基元。以不育系（cytoplasmic male sterility,CMS）,保持系基因组DNA为模板,对EST—SSR引物进行筛选,首次获得Pe21、Pe26和Pe27等3对特异引物,并扩增出特异片段分别为CMSPe2160、CMSPe260、CMS Pe27300. EST—SSR标记作为功能基因的一部分,可以直接揭示或反映相关基因功能,特异标记基因的一部分序列,它的应用将对进一步研究辣椒胞质雄性不育分子机理带来一定的促进作用。     

辣椒新品种‘苏椒25号’

‘苏椒25号’为早熟辣椒杂交一代新品种。果实长灯笼形,纵径13.5 cm,果肩横径4.5 cm,果肉厚度0.30 cm,单果质量62.1 g,果面微皱有光泽,青果绿色,成熟果红色,味微辣,鲜果维生素C含量1.15 mg·g~(-1),产量为41.0 t·hm~(-2)左右。适合在江淮、黄淮流域保护地栽培。     

辣椒新品种‘苏牛2号’

辣椒‘苏牛2号’是以2014X73为母本、以2014X80为父本配制的早中熟杂交一代品种。果实长牛角形,青熟果浅绿色,纵径27.3 cm,果肩宽度4.2 cm,肉厚0.43 cm左右,平均单果质量130 g,味微辣,维生素C含量1.17 mg • g-1。平均产量67 260 kg • hm-2。抗TMV和炭疽病,中抗CMV。适宜在江苏省、山东省等地作冬春季保护地栽培。     

辣椒抗黄瓜花叶病毒(CMV)基因的ISSR标记

辣椒(Copicum annuum L.)抗黄瓜花叶病毒(CMV)一直是辣椒育种的主攻目标之一.本研究以辣椒抗CMV品种VC16a和感CMV品种SS69杂交的F2群体60个单株材料,通过人工接种鉴定,采用高抗单株和高感单株分别构建抗、感基因池,利用BSA法筛选了40条ISSR引物,其中引物I-34在抗感病池中扩增出450 bp多态性片段,通过F2单株验证后证明I-34450与抗CMV基因紧密连锁,其遗传距离为27.3 cM,为辣椒抗CMV分子标记辅助育种奠定了基础.     

辣椒白绢病病原菌的分离与鉴定

辣椒白绢病为辣椒土传病害,病原菌为齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)。为准确鉴定辣椒白绢病,在江苏南京地区采集到疑似辣椒白绢病病株,采用常规植物病原菌分离方法,分离菌核H样和菌丝S样,经PCR扩增和BLAST比对,确定病原菌为齐整小核菌。通过初步建立分子检测技术体系,以期为江苏地区辣椒白绢病的对症用药提供技术支撑。     

辣椒ISSR-PCR体系优化

辣椒是一种重要的蔬菜和调味品,目前在辣椒上应用较多的是RAPD、RFLP和AFLP标记,而有关ISSR分子标记报道很少。本试验利用正交设计,以辣椒SS69为试材,从Taq酶、dNTPs、引物、Mg2 4因素3水平来优化辣椒ISSR-PCR反应体系。本实验中20μL反应体系初步确定各反应成分为:1×PCR buffer,1.5 mmol/L的Mg2 ,50 ng辣椒模板DNA,1.5 UTaq酶,200μmol/L的dNTPs,0.6μmol/L的引物。该体系的建立为今后利用ISSR技术进行辣椒遗传连锁图谱的构建、基因定位、种质资源鉴定与分类和遗传多样性分析奠定了技术基础。     

辣椒全基因组测序材料Capsicum annuum cv.CM334再生体系的建立

选用辣椒全基因组测序材料Capsicum annuum cv. CM334、高抗CMV辣椒材料C. frutescens cv.PBC688和高感CMV辣椒材料C. annuum cv. G29,以其幼苗的子叶、下胚轴作为外植体,研究了不同激素组合对辣椒组织培养再生的影响。结果显示:最佳的芽分化培养基为MS+5.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IAA+5000.0mg/L DJ+10.0 mg/L AgNO_3;促进再生芽伸长的最优培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IAA+2.0 mg/L GA_3+5000.0 mg/L DJ+10. 0 mg/L AgNO_3; 3个基因型子叶的平均芽分化率(5.9%)高于下胚轴的(2.4%);CM334的再生能力最强,以子叶和下胚轴作为外植体时,其芽分化率分别为10.74%和4.85%,芽伸长率分别为54.54%和53.33%,分别获得可移栽的生根再生植株30株和8株; PBC688和G29的再生能力较差,只获得少量的再生植株。     

辣椒细胞质雄性不育系和保持系线粒体DNA差异的SRAP分析

以辣椒细胞质雄性不育系21A及其保持系21B的线粒体DNA为材料进行SRAP分析,结果表明,从128对引物扩增获得了1 440条100～1 000 bp的条带,多态性位点仅有9个,占0.63%,其中7条多态性条带位于21A中;对多态性条带回收、克隆和测序分析后发现,9个克隆在GenBank中找到了相似的功能,绝大部分与能量代谢有关;利用21A中的多态性序列特点设计SCAR引物,对21A和21B的基因组DNA进行扩增验证,3对引物在21A中扩增出目的条带,表明已成功地将SRAP标记转化为SCAR标记,是新发现的与辣椒细胞质雄性不育基因相关的片段。