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传染性副猪嗜血杆菌的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
近年来,国内外许多猪场出现了一种以多发性浆膜炎和关节炎及高死亡率为特征,严重危害仔猪和青年猪的传染病,给养猪业带来巨大的经济损失。经细菌分离培养、生化鉴定和分子生物学试验研究表明.该传染病主要是由副猪嗜血杆菌(Hps)所引起。为了更加全面地本质地认识该病原体,本文对其流性病学、理化特性、分子生物学、诊断及防制作了较为全面的综述。 相似文献
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表达猪2型圆环病毒ORF2基因的重组伪狂犬病病毒的构建及鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
【目的】以伪狂犬病病毒为载体,构建表达猪2型圆环病毒ORF2基因的重组病毒,并研究其生物学特性。【方法】将猪2型圆环病毒ORF2基因插入到伪狂犬病病毒gG缺失通用转移载体中,构建猪2型圆环病毒-伪狂犬病病毒重组中间转移质粒,然后将该质粒与伪狂犬病病毒TK-/gG-/LacZ+基因组共转染IBRS-2细胞,待发生细胞病变后收集病毒液进行重组病毒的筛选及生物学特性测定。【结果】利用检测PCV2 ORF2基因和LacZ基因的PCR方法筛选到重组病毒TK-/gG-/ORF2+,同时用Southern blotting证实外源基因PCV2 ORF2已成功插入到TK-/gG-/LacZ+亲本株的基因组中。间接免疫荧光试验(IFA)和Western blotting结果显示重组病毒中PCV2 ORF2基因获得了成功表达。对重组病毒的生物学特性研究表明,重组病毒与其亲本株在不同细胞上的增殖滴度相当,且重组病毒对小鼠无致病性,免疫小鼠后可诱导机体产生抗ORF2蛋白的特异性抗体。【结论】重组伪狂犬病毒构建成功,且表达的ORF2蛋白具有免疫原性。 相似文献
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猪肺Ⅱ型上皮细胞的分离和培养研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
肺泡Ⅱ型上皮细胞具有重要的生理功能,并与肺内其他细胞之间存在着复杂的关系。研究Ⅱ型细胞的体外培养,为科学评价Ⅱ型细胞在多种生物机制中所起的作用提供了有效的途径。上皮细胞的提取技术经过近30 年的发展,日渐成熟,呈现多样化的特点。总的说来,肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、纯化、原代培养和鉴定,操作复杂,时间长,损伤较大,且细胞形态功能易发生变化,因此仍然有必要改进分离和培养技术。文章主要概述了猪肺泡上皮细胞提取,以及原代培养技术的进展与存在的问题。 相似文献
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胸膜肺炎放线杆菌生物Ⅰ型标准抗血清的制备及初步临床应用 总被引:4,自引:0,他引:4
用十三种血清型的胸膜肺炎放线杆菌标准菌株免疫家兔,制备了标准抗血清,通过玻片凝集试验,琼脂扩散试验和免疫电泳试验,对抗血清的特异性、效价和保存期进行了监测,结果表明,制备的抗血清有较好的特异性,在4℃可以保存一个月、-20℃和、-80℃下保存一年无明显变化.用抗血清对从湖南,安徽,河南等地分离的胸膜肺炎菌株进行分型鉴定,分别为血清2,3,8型;而PCR检测均为阳性,说明抗血清可用于野生株的鉴定和流行病学调查. 相似文献
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表达猪2型圆环病毒ORF2蛋白的重组伪狂犬病毒的生物学特性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为了探讨重组伪狂犬病毒TK-/gG-/ORF2 作为疫苗候选株的潜在价值,对该病毒的增殖特性、遗传稳定性、安全性、免疫原性及保护力进行了研究.结果表明:重组病毒的增殖滴度与亲本株相当,遗传稳定性良好,以100倍的免疫剂量接种小鼠时对小鼠是安全的;重组病毒在免疫小鼠后可诱导小鼠产生针对PRV和PCV2的特异性免疫应答,并且对致死剂量(100LD50)PRV Ea株强毒的攻击具有100%的免疫保护效果. 相似文献
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将表达的胸膜肺炎放线杆菌(APP)外膜脂蛋白(OmlA)纯化后免疫新西兰白兔,收集高免血清作为一抗,建立了间接荧光抗体检测方法(IFA)。同时用提纯IgG标记FITC,作为荧光抗体,建立了直接荧光抗体检测方法(FA)。这2种检测方法对血清1型~12型APP标准株检测结果均为阳性,而血清13型和15型APP标准株、副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血性波氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏茵、葡萄球菌和链球菌等其它相关细菌的检测结果均为阴性。IFA和FA对APP的最小检出浓度分别为5.32×10^4CFU/mL和4.17×10^5CFU/mL。TFA和FA对人工感染动物和139份临床送检病料进行检测,并与细菌学检测结果和apxlV-PCR进行比较。其中,上述4种方法检测实验感染动物样品结果均为阳性,有较好的符合率;临床可疑病料中,有36份(25.90%1为IFA阳性,29份(20.86%)为FA阳性,42份(30.22%)为PCR阳性,从7份(5.03%)病料中分离到本病原。这些初步研究结果表明,所建立的荧光抗体检测方法可以应用于APP感染的检测,在检出率方面优于细菌分离鉴定方法。 相似文献