异色瓢虫丙酮酸激酶基因序列分析及其调控海藻糖代谢功能

【目的】丙酮酸激酶（pyruvate kinase,PYK）是一种调节性糖酵解酶,负责调节糖酵解和糖异生之间的平衡,具有重要的生理作用。本研究通过分析异色瓢虫（Harmonia axyridis）3条HaPYK的序列结构,并结合RNA干扰（RNAi）技术,探讨HaPYK在瓢虫体内的生物学功能。【方法】基于从异色瓢虫全基因组中获得的3条HaPYK序列（被分别命名为HaPYK1-1、HaPYK1-2、HaPYK2）,通过生物信息学方法分析其理化性质和序列结构,以及与其他昆虫之间的同源性。然后采用显微注射的方法将体外合成的dsRNA导入羽化第1天成虫体内,在注射后48和72 h分别收集试验材料,提取虫体总RNA后进行反转录,随后采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术测定3个HaPYK的表达水平以评估RNAi效果,并检测与海藻糖代谢相关基因的表达水平,最后检测葡萄糖、糖原、海藻糖含量以及两种海藻糖酶的活性。【结果】HaPYK1-1、HaPYK1-2、HaPYK2的开放阅读框分别为1 350、1 569、1 656 bp;蛋白大小分别为449、522、551 aa,理论等电点分别为5.04、5.02、5.01。保守结构域预测表明3条HaPYK均属于Pyruvate_kinase超家族。HaPYK二级结构主要是α-螺旋和无规则卷曲,另外也含有延伸链和β-转角。3条序列的寡聚物类型均为同源四聚体。系统进化树显示,HaPYK与同为鞘翅目的昆虫具有较近的亲缘关系,如马铃薯甲虫（Leptinotarsa decemlineata）和赤拟谷盗（Tribolium castaneum）。注射dsHaPYK1-1后,HaPYK1-2和HaTRE1-4的表达量显著下调,而HaPYK2、HaTRE1-1、HaTRE1-2、HaTRE2-like、HaTPS的表达量显著上调;注射dsHaPYK1-2后,HaTRE1-1、HaTRE1-2、HaTRE1-3、HaTRE1-5、HaTRE2、HaTPS的表达量显著上调;注射dsHaPYK2后,仅HaTRE1-1表达量在48 h表现为显著上调,HaTRE1-3、HaTRE1-4、HaTRE1-5、HaTRE2、HaTRE2-like的表达量均下调。与对照组相比,在dsHaPYK1-2组中48 h时可溶性海藻糖酶（TRE1）活性显著降低,海藻糖和糖原含量显著增加;在dsHaPYK1-1或dsHaPYK2组中48 h时葡萄糖含量减少,72 h时葡萄糖、海藻糖含量增加,膜结合型海藻糖酶（TRE2）活性显著提高;在dsHaPYK2组48 h时,海藻糖含量显著减少,而糖原含量显著增加。【结论】异色瓢虫体内存在3个HaPYK,通过导入外源dsHaPYK能成功干扰靶标基因的表达水平,且抑制表达后海藻糖代谢会受到影响,但3个HaPYK的调控机制不尽相同。     

山西省混交林建设的理论基础和模式探讨

针对目前我省混交林建设存在问题，对混交林建设的理论基础、建设模式进行了探讨，并阐述了混交林建设的保证措施。     

枯草芽孢杆菌对马铃薯黑痣病和黄萎病的防效及对土壤酶活性的影响

随着马铃薯主粮化战略的实施,重茬种植现象普遍,黑痣病与黄萎病危害严重。目前主要应用化学药剂进行防治,造成环境污染与食品安全问题。枯草芽孢杆菌菌剂对一些作物土传病害防治效果较好,为明确其对马铃薯黑痣病和黄萎病的田间防治效果与应用方法,在重茬地进行了田间防治和马铃薯根围土壤酶活性的研究。结果表明,枯草芽孢杆菌对马铃薯黑痣病、黄萎病均有较好的防治效果。枯草芽孢杆菌与有机肥混合沟施(每667 m^2沟施枯草芽孢杆菌颗粒剂10 kg+有机肥500 kg)对马铃薯块茎黑痣病防治效果最佳,达到了63.65%,枯草芽孢杆菌与化学药剂混合拌种(每667 m^2种薯用枯草芽孢杆菌粉剂500 g+3%中生菌素43 g+70%甲基硫菌灵107 g拌种)对马铃薯黄萎病的防效达到了38.72%。这2种处理对马铃薯的增产效果也最为明显,分别增产20.00%和22.66%。对不同生育期马铃薯根围土壤酶活性的分析得知,枯草芽孢杆菌能够提高土壤脲酶、蔗糖酶和磷酸酶的活性,但对过氧化氢酶活性的增加没有显著效果。化学药剂拌种对土壤蔗糖酶活性有抑制作用。     

透心红胡萝卜的栽培

1．整地：整地对胡萝卜的产量和品质影响较大。要做到深、细,即深翻15—20厘米以上,打碎土坷垃,拾净杂物,使土壤质地疏松,土层深厚,为胡萝卜肉质根膨大创造良好条件。     

内蒙古马铃薯枯萎病病原菌鉴定及其生物学特性

马铃薯枯萎病在内蒙古马铃薯种植区发生日趋严重。为明确其病原,2009~2014年对采自内蒙古各地的马铃薯枯萎病病样进行病原菌分离和鉴定。通过形态学鉴定和r DNA-ITS测序、同源性比对,得知引起内蒙古马铃薯枯萎病病原菌主要为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、三线镰刀菌(F.tricinctum)和茄病镰刀菌(F.solani)。生物学特性研究结果表明,尖孢镰刀菌的最适生长温度为25℃,最适p H为7,最适合生长的培养基为PDA、PSA、Bilais培养基,最适碳源为淀粉和麦芽糖,最适氮源为蛋白胨;三线镰刀菌的最适生长温度为20℃,最适p H为7,最适生长的培养基为玉米粉和燕麦粉培养基,最适碳源为淀粉,最适氮源为尿素;茄病镰刀菌的最适温度为30℃,最适p H为7,最适合生长的培养基为PSA培养基,最适碳源为葡萄糖和蔗糖,最适氮源为硝酸钾。     

扁豆与青贮玉米混种试验

青贮玉米在畜牧业发展中占有重要地位,但目前生产上所应用青贮玉米饲料的蛋白质含量普遍较低,在饲喂使用过程中需要添加一定的蛋白饲料．从而相应增加了饲养成本。2009年黑龙江省农垦总局牡丹江农业科研所在双峰农场进行了扁豆与青贮玉米试验,试验表明因扁豆是优质的豆科牧草,     

菲并吲哚里西啶生物碱及其盐衍生物 的生物活性研究

分别采用菌丝生长速率法和盆栽法,测定了一系列菲并吲哚里西啶生物碱及其盐衍生物的杀菌及除草活性。结果表明:该类生物碱及其盐衍生物表现出了很好的杀菌活性,尤其是生物碱安托芬 ± )-antofine]( 2 )和脱氧娃儿藤宁碱 ± )-deoxytylophorinine]( 3 )在50 μ g/mL下,对番茄早疫Alternaria solani、花生褐斑Cercospora arachidicola、苹果轮纹Physalospora piricola 和黄瓜枯萎Cladosporium cucumerium 4种菌体的抑制率达70%~100%;但未表现出明显的除草活性。     

影响农作物种子发芽试验的因素及纠偏措施

农作物种子是实现农业高质量发展的关键，种子发芽率是种子质量最为重要的指标之一。本文从试验前期准备、发芽试验、数据分析及校核试验等方面，综合分析了影响种子发芽因素，针对不同类型的种子特性选择适宜的发芽床和预处理方法，在发芽过程中定期检查种子吸胀状况、温湿度状况、通气状况以及种子霉变状况，按照幼苗鉴定方法准确识别不同类型的育苗，总结出发芽试验关键检验技术和纠偏措施。通过总结种子发芽试验过程中的关键技术与纠偏措施可以降低试验误差，避免技术失误，保证试验方法科学合理，确保试验结果准确可靠，为农业用种生产安全和农民丰产丰收保驾护航。     

马兜铃酸Ⅰ对大鼠五脏的毒性及功能影响

【目的】探究马兜铃酸Ⅰ（aristolochic acid Ⅰ，AA-Ⅰ）对大鼠五脏（心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏）的毒性及功能影响，为今后马兜铃属类中药临床用药提供参考。【方法】将SD大鼠随机分为AA-Ⅰ给药组和空白对照组，给药组按20 mg/kg灌服AA-Ⅰ，连续7 d。于给药后0.25、0.5、1、2、24 h及停药后15 d，采集大鼠五脏组织。利用HPLC法检测各个时间点五脏组织中的AA-Ⅰ及马兜铃内酰胺Ⅰ（aristolactams-Ⅰ，AL-Ⅰ）含量，并检测大鼠五脏主要生理功能及病理组织学变化。【结果】给药后0.25 h，AA-Ⅰ主要分布于心脏、肝脏、脾脏和肺脏，同时在肝脏和脾脏中检测到AL-Ⅰ；给药后0.5 h，AA-Ⅰ主要分布于心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏，除心脏外，其余四脏中AA-Ⅰ含量均达到高峰值，且在肝脏、肺脏、肾脏中检测到AL-Ⅰ；给药后1 h，AA-Ⅰ主要分布于肝脏和肺脏，且在肝脏中检测到AL-Ⅰ；给药后2 h，AA-Ⅰ主要分布于心脏、肝脏、肺脏和肾脏，且在肾脏中检测到AL-Ⅰ；给药后24 h，AA-Ⅰ主要分布于心脏和肝脏，且在肝脏中检测到AL-Ⅰ；停药后15 d，五脏中均未检测到AA-Ⅰ及AL-Ⅰ。功能检测结果显示，大鼠灌服AA-Ⅰ可引起五脏发生氧化应激损伤。【结论】连续7 d给大鼠灌服20 mg/kg AA-Ⅰ，在五脏中均可检测到不同含量的AA-Ⅰ，且在肝脏、肾脏、肺脏及脾脏中检测到AL-Ⅰ。AA-Ⅰ可对五脏造成不同程度的损伤，其损伤与氧化应激有关。