羊驼免疫库的制备及抗孔雀石绿纳米抗体的筛选

孔雀石绿（malachite green,MG）是一种易溶于水和乙醇等的基础染料,可在多种行业应用,并曾用于水生动物多种疾病如真菌病、寄生虫病、细菌性疾病等的治疗。但因其具有致癌等毒副作用,目前已被禁用。然而市场上仍有在水产品违法使用MG的现象,因此需要加强对该药品残留的检测。本研究选择羊驼免疫库筛选抗MG纳米抗体,通过噬菌体ELISA筛选高亲和力和特异性的纳米抗体。通过辅助噬菌体M13的救援,使得纳米抗体基因（VHH）与噬菌体外壳蛋白基因融合表达,从而使得VHH蛋白展示在噬菌体表面,通过有限稀释筛选和多次洗脱的办法,获得含有目的基因的单个噬菌克隆;将重组质粒PMES4-VHH转化到表达细胞中,进行体外表达。最后采用NI-NTA柱进行His标签纯化,得到抗MG纳米抗体,并进行SDS-PAGE电泳鉴定。结果显示：噬菌体文库成功构建,库容为3.2×108 cfu/mL;通过ELISA筛选,得到16个具有抑制效果的噬菌体克隆,经对噬菌体基因测序并翻译,得到2种氨基酸序列;将重组质粒转化至表达菌株表达、纯化,最后得到大小约为15 kDa的抗MG纳米抗体,从而为MG的下一步检测奠定了基础。     

新城疫病毒ClassⅠ与ClassⅡ毒株交叉血凝抑制试验快速分类

ClassⅠ新城疫病毒(NDV)分离自健康家禽泄殖腔棉拭子,其基因序列与ClassⅡNDV存在很大差异,为了建立简单快速的NDV分类方法,用SPF鸡制备ClassⅠ和ClassⅡ毒株多价抗血清分别与选取的ClassⅠ和ClassⅡ代表毒株进行交叉血凝抑制反应。结果表明所有ClassⅠ毒株比同ClassⅡ毒株的交叉血凝抑制值高8～64(3～6log2)倍;而ClassⅡ毒株与ClassⅡ抗血清的HI效价比同ClassⅠ毒株的交叉血凝抑制值高2～8(1～3log2)倍,结果与基因分型高度一致,说明可以用交叉血凝抑制试验进行初步分类。本研究结果显示,NDVClassⅠ弱毒株血凝性与广泛应用的NDV弱毒疫苗株不同,基因序列分析可以部分解释这种差异,另外可能HN蛋白的空间结构也会影响其与血凝素结合的特性。     

当前我国鸭病de流行动态与防制对策

近几年来，随着我国的养鸭业的迅速发展，鸭病的流行动态日益受到人们的关注，鸭病研究已成为禽病研究中的一个热点。但目前鸭饲养规模化集约化与分散零星的放养并存，鸭苗的提供由以前的自繁自养为主到现在的跨地区运输等，使疾病的传播与流行变得更容易。而病毒和细菌的变异和进化，使一些老病出现了新形式（如变异株等），出现了老病尚未被消灭，新病、新血清型又不断出现的问题，所以对鸭病流行动态的监测与分析非常重要，有利于制定相应的防制对策。一鸭疫里默氏杆菌病（Ｒｉｅｍｅｒｅｌｌａａｎａｔｉｐｅｓｔｉｆｅｒｉｎ－ｆｅｃ…     

河南省机械化旱作农业将大发展

旱作农业也称雨养农业,是指水资源缺乏,没有灌溉条件的地方,依靠自然降水从事旱地作物种植的一种耕作方式。机械化旱作农业,是针对旱区土地干旱、瘠薄、耕作粗放的自然劣势,通过机械化综合配套技术,改善生产条件,提高旱地水、肥存蓄利用能力,使旱地农业增产增收。一、河南省旱地农业情况河南省的旱地主要分布在京广铁路以西的丘陵山区,包括12个市、地的56个县、区。其中,深山区8个、浅山区16个、丘陵区26个、     

巧卖辣椒赚大钱

<正>临泉县吕寨镇任庄村近几年来,念活了辣椒经,家家的钱袋子都鼓了起来。1.辣椒穿衣卖。让延秋辣椒穿上外衣——透明保鲜袋,将辣椒挑选、检测后,贴上"吕大寨"无公害蔬菜商标,一下子使延秋辣椒的批发价由每千克1.8元涨到4元(青椒),每亩收入由原来的2000余元增加到3600元以上。     

噬菌体与宿主细菌的攻防机制

噬菌体是侵袭细菌的病毒,也是病毒中最普遍、分布最广的类群。为了防止噬菌体侵染,细菌进化出多种多样的防御机制;而为了突破这些防御机制,噬菌体也进化得到了相对应的反制策略。本文即综述了这一领域的研究进展,有助于理解噬菌体与宿主细菌的共存共进化机制,合理利用噬菌体。     

2002—2009年中国华东地区家禽低致病性禽流感的病原学检测与分析

 【目的】为确定中国华东地区家禽中禽低致病性禽流感(Low pathogenic avian influenza, LPAI)的流行和分布状况。【方法】 2002年7月至2009年9月在江苏省扬州市活禽市场 (live poultry markets, LPMs)采集来自不同省份的家禽泄殖腔拭子11 645个,用鸡胚尿囊腔传代接种法分离病毒,进行了长达8年的LPAI的病毒学监测。【结果】禽流感阳性样品1 158个,总分离率9.94%。所分离到的亚型及各亚型分离率从高到低依次为H3、H6、H11、H1、H4、H9、H10、H8。【结论】禽流感的分布季节性非常明显,以冬、春为高,各亚型又有其不同分布特点。到目前为止,已经从家鸭中分离到8种HA亚型,依次为H1、H3、H4、H6、H8、H9、H10、H11;7种NA亚型,包括N1、N2、N3、N4、N5、N6、N8,两者之间有17种组合,与野鸭的带毒情况十分相似。家鸭还很容易发生混合感染,2007年以来以H6亚型为主,H3、H11、H4、H9等很多亚型都可与其混合感染,这为禽流感病毒(avian influenza viruses, AIVs)基因重组产生新的亚型及毒力的变异提供了很好的载体。     

金昌城市居民区土壤重金属分布特征研究

通过对甘肃省金昌市居民区土壤重金属含量的调查分析,以国家土壤环境质量标准和区域土壤背景值为评价标准,利用单项和综合污染指数对金昌市居民区土壤重金属进行分析评价.结果表明:金昌市居民区五种重金属元素的平均含量均超过该地区的背景值,90%以上研究区域的土壤重金属含量超过区域背景值,金昌市不同居民区土壤的重金属含量差异很大,...     

黄土高塬沟壑区小流域暴雨侵蚀特征分析

基于黄河水利委员会西峰水土保持科学试验站历史实测降雨、径流、泥沙数据,分析水土保持治理对A、B两种暴雨(A类型以降雨时间不超过24 h的短历时强降雨形式出现,B类型以降雨时间超过24 h的连阴雨形式出现,下同)条件下小流域侵蚀特征的影响,结果表明：(1)研究区2005—2021年共出现暴雨事件13次,其中A类型暴雨占暴雨总次数的61.5%,B类型暴雨占暴雨总次数的38.5%,出现大暴雨2次,无特大暴雨出现;(2)在A、B两种类型暴雨条件下,水土保持治理小流域产流时间均值比非治理小流域延后17.97%和17.26%,涨水过程所用时间多109.72%和21.36%,非治理小流域退水过程所用时间均值分别比治理小流域多84.25%和1.21%,洪水总量均值为治理小流域的3.06倍和3.39倍,径流深分别为治理小流域的2.75倍和3.06倍,洪峰流量分别为治理小流域的1.95倍和2.09倍;(3)在A类型暴雨条件下,治理小流域产沙量峰值出现时间较非治理小流域滞后15.09 min,但输沙率峰值出现时间较非治理小流域提前10.33 min,在B类型暴雨条件下,治理小流域产沙量峰值出现时间及输沙率峰...     

肉用山羊——南江黄羊

【外貌特征】南江黄羊被毛黄色,毛短而富有光泽,面部毛色黄黑,鼻梁两侧有一对称的浅色条纹,公羊颈部及前胸着生黑黄色粗长被毛,自枕部沿背脊有一条黑色毛带,十字部后渐浅;头大小适中,鼻微拱,有角或无角;体躯略呈圆桶形,颈长度适中,前胸深广、肋骨开张,背腰平直,四肢粗壮。