基于核酸适配体的PCR法检测溶藻弧菌及其灭活菌

溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)分布广,数量多,发病率高,是水产养殖中常见的条件致病菌,而对溶藻弧菌进行快速准确的识别鉴定是其病害防治的前提和基础。核酸适配体,因为具有较高的亲和特异性,在微生物的识别鉴定方面展现出了巨大的优势。本文利用核酸适配体和适配体筛选产物,通过结合、洗涤、加热分离、PCR扩增以及电泳检测等步骤,对溶藻弧菌进行了检测鉴定。结果表明,适配体和筛选产物都能对溶藻弧菌及其灭活菌进行较好的识别鉴定,适配体筛选产物对溶藻弧菌的检测下限为10~3cfu/mL,而对其灭活菌的检测下限为10~2cfu/mL,适配体对溶藻弧菌及其灭活菌的检测下限都可达到10 cfu/mL。该方法对溶藻弧菌有较好的亲和特异性,并能较好地区分溶藻弧菌与哈维氏弧菌等水产常见病原菌,在水产病害的检测中显示了较好的应用前景。     

新牧4号紫花苜蓿原生质体游离和培养条件的研究

主要探讨影响苜蓿原生质体游离和培养的条件,为原生质体的培养体系的建立提供了依据。以‘新牧4号紫花苜蓿’的子叶、下胚轴和愈伤组织为材料,研究了酶液的pH值,酶解时间,酶液组合和不同培养方法对原生质体游离和培养效果的影响。结果表明：当酶液pH值为5.8时,有活力的原生质体的产量最高,同时细胞碎片少;子叶、下胚轴和愈伤组织适宜的酶解时间均为10 h;酶液组合为2%纤维素酶＋0.5%果胶酶＋0.3%或0.5%离析酶,游离出的有活力的原生质体产量较高;采用液体浅层培养和固液双层培养,均观察到原生质体发生分裂,但固液双层培养法更有利于‘新牧4号紫花苜蓿’原生质体的分裂和培养。     

盐碱地高盐废水电解脱氯同步制氢特性

就近利用风光能电解盐碱地治理过程中产生的高盐废水,是同步实现风光消纳、废水处理和H₂/Cl₂生产的有效途径。然而,盐碱地治理废水盐浓度较低且盐离子种类众多,直接电解严重影响脱氯制氢效率。该研究通过开展盐碱地治理废水的电解试验,讨论了盐浓度及不同除杂工艺对废水脱氯制氢特性的影响规律。结果表明,不同盐浓度废水电解的H₂/Cl₂产率与电流密度呈线性关系,且产H₂速率稍大于产Cl₂速率。电流密度和pH值均随盐浓度升高先增大后减小,废水中盐浓度为3.5 mol/L时,电解后最终电流密度和阴极的pH值均最大,电解效果最优。添加Ca(OH)₂对废水进行电解前除杂,可将浓缩废水中Ca²⁺、Mg²⁺和SO₄^2-浓度分别降低至0.02、0.1和0.2 mol/L。电解过程中通入CO₂能够进一步降低杂质离子对废水电解的不利影响,使电解脱氯制氢性能相...     

脱贫致富好项目——饲养荷兰猪

１饲养前景荷兰猪也叫海猪、火猪，在我国南方的餐桌上叫“乳猪”或“烤全猪”。根据我厂对市场的详细调查，“烤全猪”目前流行于港澳、广州、福建、厦门、深圳、海南等大中城市，因它肉质细嫩，味道鲜美，又具有特殊的滋补、养颜、壮阳等功效，所以，它是招待国内外宾客的美味佳肴。“烤全猪”的出现正好填补了我国有“烤全鸡”、“烤全鸭”、“烤全羊”而无“烤全猪”的空白，在深圳、广州、厦门上一头（盘）“烤全猪”均在二、三百元。中国林牧渔业经济学会高级专家中心的有关专家经多年研究，开发的“扒全猪”已申报国家专利。山东省曹…     

PK-15细胞的ISG15基因敲除促进PRV的复制

本试验旨在研究干扰素刺激基因15（interferon-stimulated gene 15,ISG15）敲除对猪伪狂犬病病毒（PRV）复制的影响。通过CRISPR/Cas9技术构建猪ISG15基因敲除猪肾上皮（PK-15）细胞系,利用CCK-8试剂盒检测PK-15敲除ISG15基因对细胞活力的影响,采用间接免疫荧光技术检测PK-15以及PK15-ISG15^-/-细胞感染PRV的增殖差异,通过RT-qPCR检测PRV-EP0、PRV-gE、PRV-VP16和IFN-β的转录水平,Western blot检测PRV-gE和ISG15的蛋白表达水平,以及通过病毒噬斑检测对子代病毒感染力的影响。结果表明,sgRNA1和sgRNA2均成功敲除ISG15基因;CCK-8试剂盒检测细胞活力结果表明,敲除ISG15基因对PK-15细胞活力无影响;间接免疫荧光检测结果表明,PRV感染后,PK15-ISG15^-/-细胞中的荧光强度明显高于PK-15细胞;RT-qPCR和Western blot结果表明,敲除ISG15可以促进PRV的转录和蛋白表达;病毒噬斑试验进一步显示,敲除ISG15可以促进PRV的复制。另外,RT-qPCR结果显示,敲除ISG15可以抑制PRV感染引起的IFN-β转录上调。本研究成功构建了PK15-ISG15^-/-细胞系,并通过PRV感染试验证实ISG15基因可以抑制PRV在PK-15细胞中的增殖,并推测这种抑制作用可能与IFN通路有关。     

谈地面辐射采暖方式的应用

本文阐述了地面辐射采暖的特点及辐射采暖的构造,施工方法及注意事项。     

一株降解苯酚的翅碱蓬内生菌降解条件优化

苯酚是重要的有机合成原料,但具有毒性,对环境和生物体具有较强的毒害作用.用生物法降解苯酚具有成本低、效率高、二次污染少等优点.为提高微生物降解苯酚的效率,对从黄河三角洲盐碱地生翅碱蓬中分离出的一株能够有效降解苯酚的菌株进行降解条件优化试验,得到该菌株的最佳培养时间为36h、最适pH为7、苯酚降解最适初始浓度为500mg/L.     

推广农田节水技术实现粮食增产农民增收推广农田节水技术实现粮食增产农民增收

近年来,干旱对农业生产的影响越来越明显,如2008年10月下旬至2009年2月上旬、2010年10上旬至2011年2月下旬沈丘县基本无有效降雨,造成全县麦田普遍干旱,对小麦正常生长极为不利,抗旱浇麦成为全县干部群众首要任务.由于抗旱浇麦的实施,造成部分农户吃水困难.2013年秋季,高温干旱造成玉米授粉不良,缺行缺粒严重,未浇水地块大幅度减产.为应对干旱灾害,沈丘县农技人员在工作实践中,总结农田节水技术并加以推广,年推广各种农田节水技术模式20万hm2次以上.     

地方土猪源副猪嗜血杆菌Omp P2基因的分子鉴定 及遗传演化分析

为研究地方土猪源副猪嗜血杆菌(Hps)的分子遗传演化特性,应用PCR方法扩增淮南猪源河南分离株XY0501的Omp P2基因,并进行序列比较和遗传演化分析。结果显示,XY0501的Omp P2基因序列全长为1080bp,编码359 aa;与参考菌株的核苷酸序列同源性为96.7%~99.4%,与4型、5型和12型参考菌株的核苷酸序列同源性分别为96.9%~97.4%、96.7%~99.4%和97.1%~99.1%;基因进化树显示与血清5型参考菌株FJ685760亲缘关系最近,同源性高达99.4%。研究结果证明,该分离菌株属于血清5型;Hps可感染地方猪种并导致发病,但其来源则有待进一步研究;Omp P2基因在Hps国内优势流行血清型中高度保守,而且这种高保守性并无明显品种差异;不同地域的Hps分离菌株存在一定的遗传差异。     

中西医结合防治奶牛百叶干

百叶干,又叫瓣胃阻塞或第三胃积食,是奶牛一种严重的前胃运动机能障碍的疾病,是兽医临床常见的多发病之一.虽为慢性、进行性疾病,但预后多为不良,严重病例常转归于死亡,给养殖户带来较大的经济损失,也在某种程度上制约了奶牛业的健康发展.