绵羊卵巢oar-mir-150靶向调节类固醇激素合成急性调节蛋白基因的表达

为研究吐鲁番黑羊(Ovis aries)的繁殖调控,培育新的高繁殖力绵羊品种,本研究以吐鲁番黑羊卵泡期和黄体期显著差异表达的绵羊微小RNA150(Ovis aries microRNA150,oar-mir-150)为研究对象,利用生物信息学预测oar-mir-150的靶基因,应用qRT-PCR检测吐鲁番黑羊卵泡期和黄体期卵巢组织中oarmir-150和类固醇激素合成急性调节蛋白基因(steroidogenic acute regulatory protein gene,STAR)的表达水平,合成野生型、突变型和缺失型STAR基因碱基序列,退火扩增后与PGL3-control载体连接,构建荧光素酶报告基因重组载体,将绵羊oar-mir-150 mimic或negative control mimic与重组载体共转到293T细胞,利用双荧光素酶活性检测实验检测荧光素酶活性。结果表明,oar-mir-150的全部靶基因有540个,其中卵泡期与黄体期差异表达的靶基因有8个,STAR基因作为卵泡期较黄体期表达显著上调的靶基因其mRNA的3'非翻译区(3'untranslated region,3'UTR)存在oar-mir-150靶标结合位点(UUGGGAG);相对定量结果显示:卵泡期与黄体期相比,吐鲁番黑羊卵巢组织中oar-mir-150相对表达量为0.73,显著下调(P0.05),STAR mRNA相对表达量为1.90,显著上调(P0.05);成功构建野生型、突变型和缺失型荧光素酶报告基因重组载体,并以最佳转染效率和最佳转染比例进行转染;双荧光素酶活性检测结果表明oar-mir-150靶向负调控STAR的表达。研究证明了oar-mir-150与STAR间存在确切的靶向关系,且负调控STAR基因的表达,为研究微小RNA(microRNA,mi RNA)在发情周期的不同阶段调控吐鲁番黑羊繁殖过程提供理论依据。     

指针式万用表常见故障及排除方法

指针式万用表是农村电工最常用的工具。笔者根据自己的经验,将指针式万用表的一般故障分析及处理方法予以介绍。谬误之处,祈请指教。1总结回顾 回顾万用表损坏时所放档位及所测项目,看是否是在测量中放错档位引起,以判明故障是电气故障或是因摔伤振动引起。2细致检查2.1确认故障系放错档位所致后,还应进行其它档位的检查测试,其顺序为由小档到大档,看其它档位有无异常。     

Caspase-9在肉用绵羊主要生殖器官中的分布研究

通过试验研究凋亡因子Caspase-9在肉用绵羊主要生殖器官中的表达,并探讨其生理意义.利用免疫组织化学的方法对Caspase-9在肉用绵羊主要生殖器官中的表达进行研究.研究结果显示,Caspase-9只在细胞质中表达,其在卵巢中主要分布于原始卵泡、初级卵泡及颗粒性黄体细胞,而卵泡膜性黄体细胞中未见表达;黄体期,主要表达于子宫的浅层腺体腺上皮细胞、子宫内膜上皮细胞、子宫颈黏膜固有层的淋巴小结、输卵管黏膜上皮分泌细胞和纤毛细胞、峡部的浆液性腺的腺上皮细胞;卵泡期,子宫和输卵管各个部位阳性反应不明显.在正常生理情况下,Caspase-9参与了肉用绵羊主要生殖器官周期性变化的调控和子宫黏膜免疫,对生殖器官功能的稳定发挥起着重要作用.     

牦牛发情周期中卵巢卵泡发育状况的组织学观察

运用组织学技术对36头处于发情周期的健康成年母牦牛卵巢卵泡的结构与发育状况进行了观察。结果表明，牦牛发情周期中卵巢卵泡发育的组织结构与其他牛基本相似。每对卵巢中原始卵泡数和生长卵泡数在发情前期、发情期、发情后期和发情间期之间差异不显著（P〉0．05）；发情前期的囊状卵泡数与发情期、发情后期和发情间期之间差异不显著（P〉0．05），发情期和发情后期均与发情间期差异显著（P〈0．05）。闭锁生长卵泡数在4个时期之间差异不显著（P〉0．05）；发情期的闭锁囊状卵泡数与其他3期之间差异极显著（P〈0．01），发情前期和发情间期均与发情后期差异显著（P〈0．05）。各级卵泡的闭锁形式各有特点。在生长卵泡、囊状卵泡及相应闭锁卵泡的卵泡膜中均见到了胶原纤维和网状纤维。     

‘南通小方柿’DkADH1基因遗传转化及功能分析

[目的]研究‘南通小方柿’(Diospyros kaki Linn.‘Nantongxiaofangshi’)乙醇脱氢酶基因DkADH1的功能,阐明其在柿果脱涩过程中的作用。[方法]构建了DkADH1基因植物双元表达载体,通过农杆菌介导法将该基因转入番茄中。以转基因和非转基因番茄株系的不同组织为材料,钨酸钠-钼酸钠比色法测定可溶性单宁含量,并用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测原花青素(PA)合成途径相关基因的表达情况。[结果]经PCR和RT-PCR检测,获得了3个转DkADH1基因番茄株系。过量表达DkADH1基因的转基因番茄植株的叶片、花、果实中可溶性单宁含量均显著低于非转基因番茄植株。qRTPCR显示:转基因植株不同组织中PA合成途径相关基因F3’5’H、LAR、MYB4和PAL的表达量与非转基因植株相比均显著下调。[结论]DkADH1能降低植物可溶性单宁的含量并抑制其生物合成途径相关基因的表达,与柿果脱涩密切相关。     

盐胁迫下泛菌属内生细菌对杂交狼尾草发芽及生理的影响

内生细菌作为一种宝贵的天然微生物资源,在植物防病、杀虫、促生、耐盐及耐干旱能力等方面具有广阔的应用前景。本研究分析了泛菌属内生细菌(Pantoea sp.)PP04对不同盐浓度胁迫下杂交狼尾草(Pennisetum americanum×P.purpureum)种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明,该内生细菌在低(100mmol·L~(-1))、中(200mmol·L~(-1))度盐浓度下,对杂交狼尾草种子的萌发率、发芽指数及胚芽长度都有明显增益作用,增幅分别达10.75%、28.57%和300%。进一步研究发现,在不同浓度的盐胁迫下,内生细菌PP04通过诱导杂交狼尾草不同的抗氧化保护酶活性,从而减少膜脂过氧化作用,降低丙二醛(MDA)的含量。在低、中浓度盐胁迫下,PP04能显著提高杂交狼尾草超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸酶(APX)的活性。其中SOD和POD活性在低盐胁迫下增幅最高,可达64.17%和73.14%;而CAT和APX酶活性在高盐(300 mmol·L~(-1))胁迫下增幅最大,可达160.57%和73.38%。说明该内生细菌菌株可通过缓解氧化胁迫对植物造成的损伤,显著提高植物对盐胁迫的耐受性,具有良好的开发应用前景。     

蚯蚓饲喂产蛋母鸡试验

<正> 一、材料与方法本试验从1982年10月12日开始至1983年7月17日结束,历时250天。预饲期二周,采用室内阶梯式三层笼养。每组20笼,每笼2只。试验鸡为本所试验鸡场生产群中当年4月初出壳的纯种来航。随     

用自助法统计推断炔螨特对桑树朱砂叶螨的防治效果

采用自助法(Bootstrap method)对炔螨特(propargite)防治桑树朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)的效果进行了统计推断。将4个试验点获得的田间防治效果数据进行平方根反正弦转换后,采用1000次自助法再抽样并作统计分析。结果表明,73%炔螨特乳油243．33mg/L有效质量浓度处理的第1、3、7天,田间防治效果的点估计分别为78．37%、86．03%和86．36%,置信区间估计依次为78．21%～78．52%、85．83%～86．24%和86．16%～86．55%;365．00mg/L处理的第1、3、7天,田间防治效果的点估计分别为88．14%、91．90%和91．23%,置信区间估计依次为88．01%～88．27%、91．78%～92．02%和91．09%～91．38%;486．67mg/L处理第1、3、7天,田间防治效果的点估计分别为92．82%、95．70%和95．11%,相应的置信区间估计依次为92．72%～92．93%、95．64%～95．76%和95．01%～95．20%。以上述的点估计为测试点,对各浓度处理后的不同天数的防治效果进行游程检测(Monte carlo Sig方法),随机性显著(p＞0．05)。通过Tamhane方法、Dunnett T3方法和Games-Howell方法对上述各处理的不同天数后的防治效果进行统计检测表明：炔螨特对桑园中朱砂叶螨的防治效果在防治后第3天达到高峰(p＞0．05),至第7天,243．33mg/L处理区的防治效果持平(p＜0．0000);而365．00和486．67mg/L处理区的防治效果呈下降趋势(p＞0．05)。以上统计推断结果显示：73%炔螨特乳油对桑树朱砂叶螨具有较好的田间防治效果,推荐使用的有效质量浓度为243．33mg/L。     

水稻三系不育系A4A的特征特性及制种技术

介绍不育系A4A的特征特性和A4A配组杂交组合的表现以及A4A的制种技术,以促进该不育系的推广应用。     

火炬松纸浆材林土壤管理模式研究

通过对整地、施肥、抚育等研究 ,分析了林分的生长效应、效益 ,分别提出了在中、高立地条件下的火炬松纸浆材林的土壤管理模式。