节瓜抗镰刀菌酸突变体的筛选和特性研究

枯萎病是节瓜的主要病害之一。为了创新节瓜抗枯萎病资源,利用枯萎病毒素镰刀菌酸（FA）为胁迫剂,以节瓜不定芽为筛选材料,进行了节瓜抗镰刀菌酸变异体离体筛选研究。试验结果表明,FA胁迫的适宜浓度为60~80mg•L-1。筛选出的抗性细胞系继代培养后仍保持对FA抗性,其再生植株的R1、R3代株系对节瓜枯萎病的抗性可以达到中抗至抗病级;与供体材料相比,再生系后代株系除枯萎病抗性增强外,其他主要农艺性状没有明显变化。表明利用抗FA细胞系离体筛选技术改良和创新节瓜抗枯萎病材料是可行的。     

黑皮冬瓜新品种巨人二号的选育

巨人二号是从广东省连州市农家种B35中系统选育出来的高产优质抗病黑皮冬瓜新品种,该品种生长旺盛,主蔓17~20节着生第一雌花,果实圆柱形,长50 cm左右,横径22 cm左右,肉厚约5.5 cm,白色,肉质致密,皮墨绿色,表皮光滑,无棱沟或浅棱沟,品质优。单瓜重约10 kg,耐贮运,中晚熟,播种至收获约130天,每667 m2产量5 000 kg以上。     

节瓜抗枯萎病变异体离体筛选研究初报

利用镰刀菌酸(FA)为胁迫剂,以节瓜不定芽为筛选材料,进行节瓜抗枯萎病变异体离体筛选技术的研究,初步试验结果表明FA胁迫的适宜浓度为75~100 mg/L。经过筛选的细胞系对FA的抗性较未经筛选的细胞系明显增强。初步建立了节瓜抗性变异体离体筛选体系,获得了抗FA变异体再生植株的自交种子。     

冬瓜、节瓜枯萎病菌人工接种技术研究

对冬瓜枯萎病菌与节瓜枯萎病菌在接种浓度、接种方法等方面进行了研究。结果表明:枯萎病病菌、FOC(theculturefiltratesofFusariumoxysporum)、FA(Fusaricacid)、标准镰刀菌酸均可用于鉴定抗性;病菌适宜的接种浓度为5×106个孢子/mL;FOC接种浓度以原液的2～4倍稀释液为宜,接种时间为播种后15～20d,即1～2片真叶时期,FA的鉴定浓度以150mg/L效果最佳。     

节瓜产量性状的遗传研究

利用5个节瓜亲本材料进行完全双列杂交,对7个产量相关性状（单瓜重、瓜长、肉厚、雌性率、早熟性、病毒病抗性、瓜形指数等）进行了遗传分析。结果表明：这7个性状遗传均属加性－显性模型;早熟性、瓜形指数以加性效应为主;雌性率、瓜长、瓜形指数表现不完全显性;单瓜重、抗病毒病表现超显性;单瓜重、抗病毒病、肉厚的显性基因表现增效,早熟性、雌性率、瓜长、瓜形指灵敏的隐性基因表现增效;单瓜重与瓜长、肉厚存在显著的正相关（0．6952、0．7210）,瓜长与瓜形指数存在极显著的正相关（0．8979）。     

冬瓜子房与果实性状的遗传相关性和通径分析

通过对墨宝冬瓜和7个冬瓜高代自交系配制的9个杂交组合的子房长、子房横径、成熟瓜长和成熟瓜横径4个农艺性状进行相关性分析,以期揭示冬瓜子房与成熟果实的遗传相关性,为根据子房大小预测成熟果实大小提供依据.结果表明,子房长与成熟瓜长呈正相关且达极显著水平,与成熟瓜横径呈显著正相关.该研究为冬瓜育种和生产提供理论参考.     

瓜类蔬菜枯萎病抗性分子标记研究进展

简述了瓜类蔬菜枯萎病菌专化型分化情况,近年来甜瓜、西瓜、黄瓜等瓜类蔬菜抗枯萎病分子标记研究进展,并对其在育种中应用进行了展望。     

基于NBS-LRR类R基因保守结构域克隆瓠瓜抗病基因同源序列

【目的】分离鉴定瓠瓜Lagenaria siceraria抗病种质的抗病基因同源序列(Resistance gene analogs,RGAs),为瓠瓜功能性抗病基因的克隆及分子标记辅助育种奠定基础.【方法】根据已知核苷酸结合位点和富亮氨酸重复(Nucleotide binding site and leucine rich repeat,NBS-LRR)类抗病基因保守区设计简并引物,从"大籽瓠"抗性材料基因组DNA中分离抗病基因同源序列,并利用生物信息学软件进行长度变异、保守结构域、同源比对与系统进化分析.【结果和结论】基于同源克隆策略,获得23条瓠瓜NBS抗病同源序列,命名为HNB1~HNB23,Gen Bank登录号为KJ908192~KJ908214.序列分析及同源比对结果表明,这些RGAs长度变异在242~261 nt之间,18条序列具有连续开放阅读框(Open reading frame,ORF),推导氨基酸序列具有P-loop、Kinase-2a典型NBS类R基因保守结构域;核苷酸序列相似性为41.5%~98.8%,氨基酸序列相似性为21.5%~100.0%;利用NCBI Blast同源搜索发现,与其他植物尤其是冬瓜、黄瓜、葫芦及丝瓜的已知R基因具有40%~100%相似性;氨基酸序列聚类分析将其分为5个组;同源进化分析表明,23条瓠瓜RGAs均为non-TIR-NBS-LRR类R基因,与推导氨基酸序列多重比较结果一致.     

碳酸氢盐对马铃薯黑痣病菌毒力及田间防效

为明确碳酸氢盐对马铃薯黑痣病菌的毒力及田间防效,采用菌丝生长速率法,测定了碳酸氢盐对马铃薯黑痣病菌的毒力;并通过盆栽防治试验及田间防治试验,研究了碳酸氢盐对马铃薯黑痣病的防治效果。结果表明:碳酸氢铵抑制马铃薯黑痣病菌菌丝生长的有效中浓度EC50仅为0.71g/L,碳酸氢钾EC50为3.8g/L;在PSA培养基中同时加入0.79g/L碳酸氢铵、1g/L碳酸氢钾与在PSA培养基中含1.58g/L碳酸氢铵的抑菌效果一样;尿素对马铃薯黑痣病没有防治效果。碳酸氢铵与碳酸氢钾混配对该病有良好的防治作用,相对尿素最高防治效果可达到63.4%。覆膜栽培能够提高碳酸氢盐的防效和马铃薯产量。碳酸氢盐可用于田间马铃薯黑痣病的防治。     

番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因原核表达蛋白的抗血清制备及其检测应用

 以受番木瓜环斑病毒（Papaya ring spot virus,PRSV）侵染的番木瓜（Carica papaya）叶片为供试材料,采用RT-PCR 方法克隆其外壳蛋白基因cp,并将其连接到原核表达载体pET-28b（+）上,酶切鉴定及克隆测序确定开放阅读框的正确性,将获得的重组质粒转化大肠杆菌表达宿主菌。通过摸索转化的表达宿主菌种类、IPTG 浓度及诱导时间,获得高效表达PRSV cp 的条件。SDS-PAGE 分析结果表明,CP 融合蛋白分子量为36.8 kD。以Ni2+-NTA 亲和层析柱纯化的融合蛋白为抗原,免疫注射新西兰大白兔制备得到高效价抗体,间接ELISA 测定效价为1︰16 384。Western blot 检测结果表明,制备的抗血清可与诱导表达的融合蛋白发生特异性反应。通过ID-ELISA 检测田间样品证实了制备的抗血清与PRSV 侵染病叶发生了良好的特异性反应。本试验为PRSV 的快速检测以及PRSV 编码蛋白的功能研究奠定了基础。