高素质技能型人才的培养方法

目前,高职教育领域关于高技能人才培养和职业教育人才培养的研究与实践正在逐步深化,但经济产业发展的视角,结合行业企业岗位(群)对高技能人才需求标准、现状以及发展趋势的分析,确立工学结合人才培养模式,以及充实、健全与完善高职院校高技能人才培养模式构成要素、建立健全系统化课程体系。     

猪圆环病毒2型ORF2和ORF1-2串联基因重组腺病毒对小鼠的免疫效果

为了研究含有猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2,PCV2)基因的重组腺病毒作为基因工程疫苗的潜在应用价值,利用本实验室构建的PCV2的ORF2和ORF1-2串联基因的重组腺病毒对小鼠进行了免疫并对其免疫效果进行了研究。分别用表达ORF2和OFR1-2基因的重组腺病毒Ad-ORF2、Ad-ORF1-2经肌肉途径免疫Balb/c小鼠,对免疫后小鼠的血清抗体和脾淋巴细胞中各细胞亚群的比例及其增殖反应、自然杀伤活性和特异性杀伤活性进行了检测和比较。结果表明,用表达ORF2基因和ORF1-2串联基因的重组腺病毒Ad-ORF2、Ad-ORF1-2经肌肉途径免疫Balb/c小鼠后,随着免疫次数的增加,小鼠产生的针对PCV2ORF2基因的特异性抗体水平不断升高,第3次免疫后2周达到最高,但第3次免疫后4周有所下降;免疫重组腺病毒的试验组小鼠的脾淋巴细胞增殖活性、CTL杀伤活性和NK细胞杀伤活性与免疫空载体的对照组和免疫PBS的对照组比较均有显著的差异(P<0.05)。本研究为PCV-2基因工程疫苗的深入研究及应用奠定了基础。     

BHV-1gG-／tk-／GM-CSF＋重组病毒的构建及其免疫效果的评价

通过引入免疫增强因子GM-CSF,提高重组病毒的免疫原性。将牛GM-CSF克隆到pcDNA3．1载体中,构建GM-CSF基因表达盒;将tk基因上游同源臂、GM-CSF基因表达盒、tk基因下游同源臂克到pcDNA3．1载体中,得到转移栽体pTK-GM-CSF。将亲本病毒BHV-1gG-／TK-／EGFP’基因组与转移载体pTK-GM-csF采用磷酸钙法共转染MDBK~g,得到重组病毒BHV-1gG／TK-／GM-csF’。并对重组病毒的生物学特性和对日本大耳白兔的免疫原性进行了评价。利用PCR和RT-PCR证实GM-CSF基因表达盒已正确插入重组病毒的tk基因位置,并具有转录活性。亲本株和重组株的空斑形态、空斑直径大小无明显差异;两者病毒滴度无明显变化．生长曲线相似;体外遗传稳定性良好。兔体试验表明,在免疫早期重组毒株能产生较亲本株更高水平的IFN-B（P〈0.05）。但中和抗体水平、攻毒后的临床症状及病毒排毒时间等各项指标检测表明,亲本株和重组毒株之间无明显差异。在免疫早期重组株刺激机体产生的IFN-p高于亲本株,具有-定的应用前景。     

某牛场奶牛A型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定

湖北某奶牛场牛群爆发体温升高、呼吸困难、流涎及颈胸皮下气肿等症状的疾病,部分发病牛衰竭死亡,为确诊牛场牛群发病原因并提出防控方案,本试验采集死亡牛的心脏、肝脏、肺脏及气管组织进行病原菌的分离纯化及PCR鉴定,并对鉴定的病原菌进行生化特性鉴定、致病性试验和药物敏感性分析;同时提取患牛血清RNA,开展牛流行热病毒的RT-PCR鉴定。结果显示,病料在类胸膜肺炎固体培养基上不生长,生化特性鉴定显示能形成靛基质、不发酵肝糖和肌醇;牛流行热病毒RT-PCR扩增阴性;所分离的病原菌经16S rRNA及牛A型多杀性巴氏杆菌特异性引物PCR扩增阳性;致病性试验显示该病原可致死小鼠,且能从死亡小鼠体内分离到感染菌;药敏试验结果显示该病菌对头孢哌酮、左氧氟沙星敏感,其他20种临床常见药物表现耐药。综上所述,该牛场患病牛确诊为牛A型多杀性巴氏杆菌感染,建议根据药敏试验结果选择敏感药物,对患病牛进行隔离治疗,疑似患病牛隔离观察,同时加强通风,及时清理污物并消毒,改善饲养管理,避免拥挤、寒冷及长途运输等应激因素。     

小花棘豆水浸液对两种禾草种子萌发的化感作用

本文研究了小花棘豆水浸液对南疆常用的两种禾本科牧草高羊茅和鸭茅种子萌发的影响,揭示了小花棘豆水浸液对这两种禾本科牧草种子萌发的化感效应。用自然阴干的小花棘豆花、叶和茎分别配制成不同浓度的水浸液,然后置于培养皿滤纸床发芽,研究小花棘豆不同部位的水浸液对高羊茅和鸭茅种子萌发的发芽势、发芽率、胚根长和胚芽长的影响。结果表明,小花棘豆水浸液显著抑制高羊茅和鸭茅种子的发芽势、发芽率和胚根长。花、叶水浸液对高羊茅胚芽生长无显著影响。低浓度(0.025g/mL)的茎和叶水浸液有促进鸭茅胚芽生长作用,而高浓度花和茎水浸液却抑制其胚芽生长。综合效应(M)显示,小花棘豆花的化感效应最强,对高羊茅种子萌发的抑制从强到弱排序为花>茎>叶,对鸭茅种子萌发的抑制顺序是花>叶>茎。最后得出小花棘豆水浸液对高羊茅化感效应(M1=-0.50)强于鸭茅(M1=-0.38)。     

牛支原体单克隆抗体的制备与鉴定

以牛支原体(Mycoplasma bovis)湖北分离株HB0801作为抗原免疫8周龄BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术筛选出了6株能稳定分泌抗牛支原体的单克隆抗体细胞株,分别生产腹水并对单抗进行了纯化和特性鉴定。经亚型测定,这些单抗都属IgG类。腹水ELISA效价在1×10⁵~1.6×10⁶。ELISA特异性分析结果表明,6株单抗与临床分离的牛支原体菌株以及ATCC标准株PG45都显阳性反应,但与牛的其他常见病原菌如多杀性巴氏杆菌、化脓隐秘杆菌等都显阴性反应。所有制备的单抗都与无乳支原体有交叉反应,其中两株单抗1A5和1C11只与无乳支原体有交叉反应,与其他支原体无交叉反应。经Western blotting验证,6株单抗分别识别牛支原体全菌蛋白中的不同条带,说明分别针对不同的蛋白抗原。这些牛支原体单克隆抗体为后期建立牛支原体检测方法及致病机理研究奠定了良好基础。     

猪呼吸道疾病综合征的防治措施

猪呼吸道疾病综合征是由多种疾病因素引起猪的呼吸道疾病的总称.引起猪的呼吸道疾病的原因很多,病毒、细菌、支原体、寄生虫以及环境应激、饲养管理粗放或突然改变饲养方式等多种因素均可引发.通常是由几种病因共同作用所致.     

融合蛋白Rv3872/CFP-10/ESAT-6的制备及在牛结核诊断中的初步应用

本研究通过融合表达Rv3872、CFP-10和ESAT-6蛋白,以改良牛结核病特异性鉴别诊断抗原CFP-10-ESAT-6,提高牛结核抗体鉴别诊断法的灵敏度。利用PCR方法,克隆牛分枝杆菌RD1区上述三个基因,通过酶切连接方法,将三个基因串联在pET-28a载体上,基因之间用Linker序列连接。融合基因在大肠杆菌内经IPTG0.4mmol/L诱导3h,目的蛋白经SDS-PAGE证实表达在上清中,Western-blot分析证实表达蛋白具有免疫原性。以所表达的融合蛋白作为包被抗原建立间接ELISA,检测了44份牛分枝杆菌感染背景清楚的临床奶牛血清。26份阳性血清中,Rv3872-CFP-10-ESAT-6融合蛋白ELISA检出阳性样本18份,检测灵敏度为69%,而CFP-10-ESAT-6融合蛋白ELISA只检出阳性样本4份。18份阴性血清中,两种ELISA均检出17份阴性血清,特异性都为94%（17/18）。因此,Rv3872-CFP-10-ESAT-6融合蛋白在对牛结核抗体检测特异性没有降低的情况下,敏感性获得了显著提高,这对牛结核病的早期鉴别诊断方法的建立具有重要意义。     

NOD1/2及其在奶牛乳腺炎中作用研究进展

奶牛乳腺炎是严重危害养牛业的常见疾病,近年来对奶牛乳腺炎的研究不断深入,关于乳腺炎天然免疫进程的研究也不断深化。核苷酸结合寡聚化结构域蛋白(NOD)是天然免疫的重要组成部分,不断有报道称NOD蛋白参与或调控了乳腺炎天然免疫进程,论文以NOD1/2为出发点从NOD家族的结构、NOD1与NOD2的异同、NOD1/2参与天然免疫进程以及NOD1/2与乳腺炎的关系等方面总结相关研究进展,为深入了解NOD1/2及其在奶牛乳腺炎中的作用,给乳腺炎相关治疗方法的优化及相关药物的研发提供参考。     

大豆异黄酮对肉仔鸡免疫功能的影响

100只6周龄的AA肉仔鸡随机分为4组,每组5个重复,日粮中分别添加0mg／kg、3mg／kg、6mg／kg、9mg／kg的大豆异黄酮,以研究对肉仔鸡免疫功能的影响。试验结果表明,肉鸡日粮中添加大豆异黄酮对内仔鸡的肝重／体重,脾重／体重,法氏囊重／体重,胸腺重／体重,影响均不显著（P〉0．05）,日粮中添加大豆黄酮有使法氏囊／体重增加的趋势,但统计上不显著。42日龄的屠宰试验中,试验Ⅰ组白细胞数与其他各组差异显著（P〈0．05）。