瓜类褪绿黄化病毒在山东省的流行调查及西葫芦分离物全基因组扩增与序列分析

瓜类褪绿黄化病毒(cucurbit chlorotic yellows virus, CCYV)给我国葫芦科作物造成了严重的经济损失。2014—2019年持续调查山东葫芦科作物产区CCYV的发生情况。调查结果表明：CCYV可以自然侵染西瓜、甜瓜、南瓜、黄瓜和西葫芦,样品检出率由2014年的1.7%增加到2019年的29.1%,西葫芦地块发病严重有进一步蔓延的趋势。利用RT-PCR结合RACE技术扩增CCYV西葫芦分离物全基因组序列。结果表明：CCYV西葫芦分离株的基因组RNA1和RNA2与GenBank分离株的相似性均为99.6%～100%,基于CCYV全基因组的系统发育进化树均聚类在一个分支上,与各个蛋白的进化树和相似性分析结果一致,CCYV在传播的过程中与寄主无关但可能跟地理位置有关。本研究扩增分析了CCYV西葫芦分离物的基因组序列,对CCYV的变异现状和进化趋势研究具有一定的参考价值。     

辣椒新品种晋椒401的选育

晋椒401是以母本M4627、父本F4352配制的杂交辣椒新品种,适宜干制。晚熟,植株生长势强,株型直立,株高70 cm左右,开展度54 cm×56 cm左右。叶色绿,始花节位10节;果实羊角形,顺直,果面微皱,青熟果绿色,老熟果红色;果纵径18.4 cm,果横径1.1 cm,单果质量8 g左右;果皮薄,易干制,辣味浓。较抗疫病,耐病毒病和疮痂病,抗倒伏,适应性广。一般每667 m2产鲜椒2300kg。     

番茄褪绿病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法

根据番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)热激蛋白70(Hsp70)的基因序列,设计ToCV实时荧光定量PCR特异引物。利用重组质粒ToCV-1为标准品建立SYBR Green Ⅰ实时荧光定量方法。针对引物浓度、退火温度、特异性、灵敏度、重复性和稳定性进行系列优化。结果表明,最适退火温度为63℃,最适引物浓度为0.3μmol·L~(-1)。熔解曲线为特异性单峰,表明其特异性良好。建立的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR较常规PCR灵敏100倍,且具有良好的重复性和稳定性。基于SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术建立的ToCV检测方法,速度快、特异性强、灵敏度高、重复性好,可以用于ToCV的定量检测。     

番茄褪绿病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR方法

 根据番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus, ToCV)热激蛋白70(Hsp70)的基因序列,设计ToCV实时荧光定量PCR特异引物。利用重组质粒ToCV-1为标准品建立SYBR Green I实时荧光定量方法。针对引物浓度、退火温度、特异性、灵敏度、重复性和稳定性进行系列优化。结果表明,最适退火温度为63℃,最适引物浓度为0.3 μmol·L^-1。熔解曲线为特异性单峰,表明其特异性良好。建立的SYBR Green I实时荧光定量PCR较常规PCR灵敏100倍,且具有良好的重复性和稳定性。基于SYBR Green I实时荧光定量PCR技术建立的ToCV检测方法,速度快、特异性强、灵敏度高、重复性好,可以用于ToCV的定量检测。     

山西省长子县青椒生产现状及发展对策

山西省长子县是我国青椒的主要产区之一,该文在详细论述长子青椒发展概况的基础上,分析了当地青椒生产中存在的品种选择、栽培技术以及市场、加工等方面的问题;提出了选用专用品种,配套标准化栽培技术,扩大销售渠道,发展大、中、小型加工企业。建议科研部门进行青椒不同茬口专用品种的选育,适宜当地栽培技术的攻关,借鉴各地市场销售经验扩大销售渠道,鼓励劳动者进行小型农机具的发明创造;提倡政府惠农政策实施,在大力扶持合作社、示范园区和龙头企业的同时进一步落实在以家庭经营为主的农户区。     

辣椒苗期抗感黄瓜花叶病毒病比较转录组学分析

为了研究辣椒在黄瓜花叶病毒侵染下的分子响应机制、发掘抗病相关基因,以感病材料茄门和抗病材料JJ101为对象,对接种黄瓜花叶病毒前后的茄门和JJ101叶片进行高通量转录组测序,并利用生物信息学方法对基因表达和功能进行研究.结果显示,采用RPKM法计算基因表达量,共筛选出JJ101和茄门接种黄瓜花叶病毒后的1158个差异表...     

洋葱T型细胞质雄性不育与花蕾ATP含量的关系

以洋葱T型细胞质雄性不育系8-43A、保持系8-43B和恢复系8-43-57C为试材,采用萤火虫荧光素酶检测技术,分析花蕾不同发育时期三磷酸腺苷(ATP)的含量变化,研究洋葱T型细胞质雄性不育与花蕾ATP含量的关系。结果表明:在整个花药发育过程中的各个阶段,保持系和恢复系的花蕾之间ATP含量均无显著差异,不育系花蕾ATP含量均极显著低于保持系和恢复系,尤其在花粉粒成熟早期,仅为保持系和恢复系的1%;花粉粒成熟早期,不育系花蕾ATP含量下降到不足四分体时期的1/10,说明花药发育通过单核期后耗费了组织内大量的ATP,更重要的是ATP的产生可能出现了障碍;洋葱T型细胞质雄性不育系花蕾ATP含量极显著低于各时期的可育株,可能是导致其雄性不育的原因。     

寿光蔬菜产业可持续发展面临的问题与对策

通过深入蔬菜产业发展的各环节进行调查研究,综合分析了寿光蔬菜产业中所面临的突出问题。调查得出:优质高端蔬菜数量相对不足,农业生态环境随蔬菜种植年限的增长日益恶化,蔬菜商品化处理及深加工发展滞后,蔬菜种植过程中机械化程度较低,缺乏具有自主知识产权的蔬菜优良品种,农民素质相对偏低等成为制约寿光蔬菜产业可持续发展的主要问题;通过调查研究,提出了寿光蔬菜产业可持续发展的相应对策,主要包括建立和执行新的科学的土壤整治体系;扩大有机蔬菜生产规模,提高蔬菜的深加工水平;借鉴国外先进经验,提高寿光蔬菜产业的机械化水平;加强与国内科研院所的合作,提高蔬菜种子的国产化水平;加大培训力度,提高菜农整体素质等几个方面。     

蔷薇新品种‘鲁硕红’的选育

我国是蔷薇属植物的主要发源地之一,具有丰富的蔷薇种质资源。但我国蔷薇资源的开发利用还很不充分,尽管现代蔷薇的品种丰富,但在抗病性、芳香性等方面仍有不足,急需引入更优良的蔷薇种质资源,并充分利用蔷薇属植物种质资源的遗传多样性,深入开展蔷薇属植物的资源收集、良种筛选和选育工作。为此,我们于2002年从荷兰引进了一批蔷薇天然杂交种,对其进行播种、试种、选育,从中选出优良品种‘鲁硕红’蔷薇,该品种于2011年12月通过了山东省林木品种审定委员会的审定。     

应用CRISPR/Cas9体系对番茄PSY 1基因的定点编辑

基于NCBI数据库提供的番茄八氢番茄红素合成酶基因(PSY 1)全长,并根据基因序列中PAM(proto adjacent motif)的位置设计特异性sg RNA,构建CRISPR/Cas9 Level 1、Level 2载体;将设计好的载体转化农杆菌,继而转染番茄子叶,利用PCR产物测序法检测sg RNA在番茄基因组中的敲除效率。结果表明,36个转基因植株中有22个PSY 1基因目标区出现不同数目的碱基缺失、增加或互换,初步估计基因敲除效率为61%。本试验在番茄中初步建立了CRISPR/Cas9介导的基因敲除技术,该技术能够稳定的在番茄中实现基因敲除。