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【目的】分析1株血清4型禽腺病毒(FAdV-4)流行株的分子特征及其感染对细胞因子的影响。【方法】采集安徽省某禽类养殖场疑似心包积水 肝炎综合症的鸡肝脏组织样本,用鸡肝癌细胞(LMH)对病原进行分离,采用PCR、透射电镜(TEM)观察和间接免疫荧光试验(IFA)对分离的毒株进行鉴定。采用分段扩增后拼接的方法克隆分离毒株的全基因组,对其进行遗传进化分析和序列重组分析。基于柯赫法则,用分离毒株接种无特定病原体(SPF)鸡,检验其致病性。采用实时荧光定量PCR法,检测分离毒株对LMH细胞天然免疫相关细胞因子环鸟苷酸-腺苷酸(cGAS)、干扰素刺激因子(STING)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-8、干扰素-α(IFN-α)、IFN-β、干扰素调节因子7(IRF7)、线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)、主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ-α、MHCⅡ-β等11种细胞因子的诱导作用。【结果】分离鉴定到1株FAdV,其在LMH细胞中培养未出现明显细胞病变效应;病毒粒子直径为70~90 nm,符合FAdV-4的结构特征;免疫荧光试验结果显示,在接种分离毒株的LMH细胞内可观察到亮红色荧光,而对照细胞没有荧光;将该毒株命名为FAdV-4-AH-F41。采用分段扩增后拼接的策略获得了FAdV-4-AH-F41全基因组序列(43 708 bp);遗传进化分析和序列重组分析发现,FAdV-4-AH-F41与FAdV-4株核苷酸相似性为99.6%;存在3个重组事件,第1个重组事件发生在30 453-30 674 bp,第2个发生在36 884-36 988 bp,第3个发生在43 401-43 715 bp。致病性试验显示,FAdV-4-AH-F41是导致鸡心包积水-肝炎综合症的病原。实时荧光定量PCR检测结果显示,与对照(DMEM/F12处理)相比,用FAdV-4-AH-F41处理后LMH细胞中11种免疫因子的表达量水平均有提升,其中cGAS、IL-6、IRF7、MHCⅡ β差异达极显著水平(P<0.01),IL-1β、IFN-α、MAVS差异达显著水平(P<0.05),STING、IL-8、IFN-β、MHCⅠ-α差异不显著。【结论】成功分离1株重组血清4型禽腺病毒,感染LMH细胞会诱导强烈的天然免疫反应。 相似文献
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In this study, we used microsatellite‐based parentage analysis to assess the mating system of a mass spawning bay scallop, Argopecten irradians irradians. Parental assignment was performed on 237 offspring and 14 candidate parents. Overall, 95% of all offspring were unambiguously allocated to their putative parents based on information from six highly polymorphic loci. Offspring from both the self‐fertilization and cross‐fertilization style were observed, the large variation of self‐fertilization rate among individuals displays a mixed mode of mating. The high variances in reproductive success resulted in a decline in effective breeding numbers (Nb/N = 0.71). The self‐fertilization rate was 32.89% for this mass spawning and the coefficient of inbreeding was estimated at around 16.5% per generation. When selfed larvae were removed, the relationship between relatedness and individual reproductive success was proved insignificant between half‐sibings and unrelated, which suggest that selection pressures other than avoidance of inbreeding may be responsible for the evolution and maintenance of the self‐compatible mating system of A. i. irradians. These results lend insight to A. i. irradians cultivation in present China and provide a genetic basis for the development of more effective spawning techniques. 相似文献
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应用投影寻踪技术与聚类分析相结合的数学手段,通过对福建、台湾的81个县(市、区)的数据处理,对森林景观资源进行了分类区划。结果表明:福建生态旅游资源大致由内陆向沿海递减,即由内陆到沿海分别为第一等级、第二等级、第三等级;台湾生态旅游资源由中部山脉向东西两岸递减,即中部第一等级,东部第二等级、西部第三等级,这与福建及台湾的生态资源的地理分布相似。 相似文献
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介绍了森林保护机械设备的主要种类及其发展,分析了各种机械的特点及适用场合. 相似文献