马铃薯Y病毒云南昭通烟草分离物的检测及年度间差异比较

利用DAS-ELISA检测试剂盒检测昭通烟草脉斑病样品,结果表明存在马铃薯Y病毒O株系和马铃薯Y病毒N株系两个不同株系病毒。利用Sprimer和M4引物扩增、克隆、测序,得到长度为1 771 bp目的片段,该片段包含病毒的外壳蛋白基因序列、3′ UTR序列以及部分Nib基因序列;序列分析表明与湖南HN 2分离物（GenBank No. GQ200836）和美国NE 11分离物（GenBank No. DQ157180）核苷酸序列相似性均为98%,系统进化分析表明其具有较近的亲缘关系。     

云南金沙江干热河谷油橄榄不同材料覆盖后土壤养分的变化

在云南省金沙江干热河谷的油橄榄园进行了4种不同材料的覆盖试验,分析不同材料覆盖后,土壤有机质、氮、磷、钾含量的变化。结果表明,覆盖处理提高了油橄榄园土壤中有机质的含量,土壤全氮、全磷、全钾含量变化不大,速效养分增加明显。与对照(空白)相比,秸秆覆盖的效果最明显,使有机质、速效氮、速效磷、速效钾的含量分别增加66.85%、62.67%、近20倍和83.68%。     

高钙牛奶稳定性研究

钙强化后的高钙牛奶可以提供更多利于人体的钙质,研究了制备高钙牛奶时所需要的钙源、乳化剂以及增稠剂,采用正交试验确定了复配稳定剂的成分及用量,并利用粒径分析仪对高钙牛奶稳定性进行了研究.     

护理管理者领导力现状调查及影响因素分析

目的：调查护理管理者领导力现状,并分析其影响因素。方法采用管理者实践量表、一般自我效能感量表、职业倦怠量表、角色认知量表对浙江省210名护理管理者进行问卷调查。结果共发放问卷210份,回收有效问卷182份,有效回收率为86．67％。本组护理管理者的领导力得分为（37．70±5．30）分;是否经常阅读管理书籍、是否参与护士长的分层培训、任命方式以及是否经过护士长岗前培训的护理管理者的领导力得分情况比较,差异有统计学意义（t值分别为－3．608,－7．136,2．343,－2．511;P＜0．05）。领导力与角色认知中的角色模糊、自我效能感以及职业倦怠中的个人成就感均呈正相关,与角色认知中的角色冲突以及职业倦怠中的情绪枯竭、去人格化因子呈负相关（ r值分别为0．589,0.521,0．509,－0．323,－0．291,－0．227;P＜0．01）。多元线性回归分析显示,角色认知中的角色模糊因子、是否参加护士长分层培训、职业倦怠中的个人成就感因子、自我效能感和是否阅读管理书籍为领导力的影响因素（P＜0．05）。结论领导力与护士长的角色认知、自我效能感、职业倦怠及是否分层培训均相关。管理者的分层培训有利于领导力的培养和提升,明确角色定位、降低职业倦怠和提高自我效能感同样可以提升护士长的领导力,另外护理管理者需加强经济管理学方面的知识培训。     

河南省樱桃谷鸭乙型肝炎病毒全基因组克隆与序列分析

对河南省樱桃谷鸭主产区信阳、新郑、焦作三地628份樱桃谷鸭血清样本应用PCR技术进行鸭乙型肝炎病毒（DHBV）检测,并将三地DHBV阳性样本各挑选1份进行DHBV全基因的扩增、克隆、测序及序列分析。结果显示,信阳、新郑、焦作三地樱桃谷鸭DHBV自然携带率分别为10.5%、8.9%、17.6%;3株DHBV基因组全长分别为3 021、3 027、3 024bp,均含有编码P、S和C蛋白的3个开放阅读框,各开放阅读框氨基酸同源性比较显示差异显著的区域位于P蛋白。序列分析显示,3株DHBV河南株核苷酸同源性为89.8%~93.9%,与参考株为89.4%~99.5%。遗传进化分析及P蛋白关键位点分析结果表明,信阳分离株为西方基因型,其余2株为中国基因型。本试验掌握了河南省樱桃谷鸭主产区DHBV自然感染情况,并成功克隆了3株樱桃谷鸭DHBV全基因序列,为该病毒的进一步研究提供了有益信息。     

我国部分地区牛支原体肺炎和关节炎的病原体诊断

重庆等4省市从外省引进的肉牛群发生以严重肺炎和关节炎为主要表现的疾病。该病的病变主要集中于肺脏,其组织学变化主要是间质增生,纤维素渗出,干酪样坏死,淋巴细胞、嗜中性粒细胞和单核细胞浸润。PCR检测病牛肺脏显示牛支原体阳性,而丝状支原体丝状亚种、牛分支杆菌和多杀性巴氏杆菌为阴性。从肺等组织中分离到牛支原体以及大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌、葡萄球菌和烟曲霉,没有分离到巴氏杆菌。结果显示本病是以牛支原体感染为主引起的牛支原体肺炎和关节炎,长途运输等应激因素是该病突发的重要诱因,其他细菌和/或真菌继发感染加重了病情。     

鹅细小病毒VP3蛋白B细胞线性表位的精确定位

本试验旨在利用获得的4株抗鹅细小病毒(GPV)VP3的单克隆抗体,进一步对GPV VP3 B细胞线性抗原表位精确定位。根据笔者实验室已鉴定的线性抗原表位区结果,筛选出单抗所针对的优势抗原表位区。设计并合成互相重叠5 aa的10 aa短肽寡聚核酸片段,退火后,连入pET-32a载体,经转化鉴定,诱导表达后,获得相应的小片段融合蛋白,并利用单抗通过Western blot进行抗原性鉴定。同样方法进行短肽片段两端氨基酸的逐个缺失设计,进一步精确定位,结果鉴定出2个抗原表位,分别为430-435 aa和643-647 aa。     

监测口蹄疫抗体的液相阻断ELISA法的改进和体会

液相阻断ELISA（LBE）法由于具有高度的敏感性、特异性和重复性,目前被广泛应用于动物免疫抗体效果监测实践工作中,特别是为防控牛、羊亚洲I型口蹄疫（FMD）做出了积极的贡献。但该方法操作繁琐,稍有不慎就会导致实验结果发生偏差或试验失败,笔者就该方法应用于亚I型口蹄疫抗体检测中的改进和体会作一总结。     

禽I型副粘病毒广西分离株F基因序列及毒力的研究

对源于鸡、鹅、鸽的 9株APMV_1广西分离株及我国常用的中发型疫苗毒株I系 (Mukteswar株 )的F基因N_端前段进行了RT_PCR扩增 ,产物进行核苷酸序列测定 ,用基因分析软件DNAStar进行分析并与已发表的其它参考毒株进行比较。结果发现 ,广西分离株在裂解位点的氨基酸组成和排列均符合强毒株的特征 ;根据F基因绘制的系谱树来看 ,广西鸡和鹅分离株都归属于基因型VII,证实近年来广西流行的基因型与国内其他地区的相同 ;并发现中发型疫苗毒株I系 (Mukteswar株 )也属于基因型VII。研究还对分离株进行了常规的毒力和致病性测定试验 ,并与根据F基因序列特征判定的结果相比较 ,结果发现其中一株鸽源和两株鹅源分离株根据常规方法判定的结果与毒株在临床上的致病性不相符 ,而根据F基因序列特征判定的结果与毒株在临床上的致病性相一致