Expression of Cdc25a in cross-species hepatocellular carcinoma tissues and its significance

AIM：To study the expression of cell division cycle 25a protein (Cdc25a) in hepatocellular carcinoma (HCC) tissues of different species, including human, rat and tree shrew, and to verify the feasibility of the strategy of cross-species oncogenomics screening. METHODS：Real-time fluorescence quantitative PCR and Western blotting were applied to detect the expression of Cdc25a at mRNA and protein levels in the HCC tissues, corresponding HCC-adjacent liver tissues and normal liver tissues collected from humans, rats and tree shrews. RESULTS：The mRNA expression of Cdc25a in the HCC tissues of humans, rats and tree shrews was higher than that in normal liver tissues (P<0.05). The mRNA levels of Cdc25a in the HCC tissues of humans and rats were higher than those in the corresponding HCC-adjacent liver tissues (P<0.05). The mRNA expression of Cdc25a in the HCC tissues was significantly correlated with the portal vein tumor thrombus, the extrahepatic metastasis and the clinical stage, but was not correlated with the recurrence of tumor, the diameter of tumor, the number of tumor, the level of serum alpha-fetoprotein and the differentiation of tumor. The protein levels of Cdc25a in the HCC tissues of humans, rats and tree shrews were higher than those in the corresponding HCC-adjacent liver tissues and the normal liver tissues. CONCLUSION：Cdc25a may be a particularly crucial molecule for hepatocarcinogenesis. The cross-species oncogenomics screening may represent a feasible and convenient way for identifying key molecules of human HCC.     

苦瓜afp1基因的克隆与序列分析

通过异硫氰酸胍法提取苦瓜总RNA,采用一步RT-PCR方法获得394 bp苦瓜afp1基因序列.应用DNA star软件进行序列分析,表明这个片段包含了基因完整的编码.Blast分析表明,它与荠菜的防卫基因有很高的同源性,序列一致率为87％.该试验结果将为分子植物抗病育种提供基因材料.     

八氢番茄红素合成酶(PSY2)基因果实特异表达载体的构建

八氢番茄红素合成酶是番茄红素合成的关键酶,通过PCR法获取PSY2基因和E8启动子序列,将目的基因和E8启动子序列构建到植物表达载体pBI101.2中,构建了果实特异表达启动子的八氢番茄红素合成酶基因植物表达载体。并采用PCR、限制性内切酶酶切和序列测定分析法,对重组质粒进行鉴定。结果表明,番茄果实特异性表达PSY2蛋白的重组质粒构建成功;通过农杆菌直接转化技术将其成功转入转化农杆菌LBA4404、EHA105,为下一步PSY2蛋白在番茄果实中特异表达奠定了基础。     

草莓根腐病病原菌分离与鉴定

为了有效防控草莓根腐病,采用组织分离法,对徐州地区草莓根腐病病原菌进行分离与鉴定,分离、纯化后获取了5个真菌菌株,经形态学与分子生物学碱基序列测定结果比对发现：CMGF-1是胶孢炭疽菌或其亚种,CMGF-2和CMGF-3是棒孢拟盘多毛孢或其亚种,CMGF-4和CMGF-5是串珠镰刀菌或其亚种。黑根根腐的致病菌主要是镰刀菌和拟盘多毛孢菌,而红中柱根腐的致病菌是胶孢炭疽菌。     

光照、营养钵及磷肥用量对西瓜幼苗素质的影响

对不同光照、营养钵、磷肥用量对西瓜幼苗素质的影响进行试验,结果表明,本试验条件下,在2/3光照、8cm营养钵育苗、磷酸二铵用量0.5 kg/m~3的条件下,才能培育壮苗,经济效益较高。     

优质抗病厚皮甜瓜新品种苏甜2号的选育

苏甜2号为中早熟厚皮甜瓜杂交种。全生育期95d左右,果实发育期约35d。植株长势较强,抗白粉病和蔓枯病,较耐低温,易坐果。果实短椭圆形,果皮白色、光滑无网纹;肉厚3.8～4.2cm,果肉浅绿色,肉质软嫩,具有浓香味,中心可溶性固形物14.7%～16.8%。耐贮运。单果质量1.0～2.0kg,667m2产量2000～2300kg。适于华东地区及气候相似地区保护地栽培。     

秸秆发酵技术在百合生产中的应用

以“西伯利亚”百合为试材,研究了秸秆发酵栽培百合的可行性.结果表明:在秸秆处理前50 d,秸秆处理的地温高于对照处理1～3℃,其中玉米秸秆处理的地温要大于其它处理的地温,秸秆处理50 d后,不同处理的地温差异不明显;秸秆处理的植株长势优于对照处理的长势,表明在气温偏低的时期种植百合,秸秆发酵技术能够提高地温,促进植株生长,其中玉米秸秆处理的植株长势优于其它处理的植株长势,可以在百合生产中推广应用.     

园艺专业安全管理方向检测技术课程教学实践与探讨

为提高学生的综合素质和研究创新能力,根据本科教学的培养目标和园艺专业安全管理方向检测技术课程的教学特点,从教学内容、教学方法手段及动手实践等环节进行教学改革的初步探索。通过改革取得较好的教学效果,但仍需进一步探索和实践,以完善和提高教学体系。     

茶树CsSPMS基因全长cDNA克隆和时空表达分析

为探究精胺合成酶（spermine synthase,SPMS）与茶树（Camellia sinensis）耐寒性的关系,以茶树品种‘迎霜’为试验材料,利用简并引物PCR扩增技术结合5′/3′RACE方法,获得与低温胁迫相关的CsSPMS片段cDNA全长序列（GenBank登录号为KJ580429）。该序列全长1 374 bp,包含1 113 bp的完整开放阅读框（ORF）,编码371个氨基酸,预测分子量41.28 kD;构建亚细胞定位载体pJIT166-GFP/SPMS,亚细胞定位结果显示CsSPMS定位在细胞核上。荧光定量PCR分析表明CsSPMS在根、茎、叶、芽、花和果中都有表达,在根、茎中表达量较高;低温胁迫处理下不同组织CsSPMS的表达量,在叶片中2 h达到峰值,而在根中12 h达到高峰;在低温条件下4个茶树品种的耐寒性与CsSPMS表达量密切相关。     

利用黄秋葵转录组信息挖掘SSR标记及用于种质分析

通过对黄秋葵（Hibiscus esculentus L.）转录组信息分析,共获得74 600条unigene,全部序列有52 976 011 bp;有3 191条unigene包含SSR的序列,从中鉴定出3 448个SSR位点,其中有235条序列包含1个以上SSR,复合SSR有123个。优势重复基序为三核苷酸和二核苷酸,分别占总SSR的60.79%和21.43%。二核苷酸重复基元中以AG/CT为优势重复基元,占总位点的11.02%,三核苷酸重复基元以AGA/TCT为主,占总位点的19.61%。利用Primer 3.0共设计出8 088对SSR引物。从87对有效扩增引物中随机选择60对用于32份黄秋葵种质的多态性验证分析,其中36对（占60%）引物表现稳定可重复的多态性。利用UPGMA作图,将32份供试材料分为2类。利用黄秋葵转录组数据进行SSR标记开发,能获得较高频率的SSR位点,且类型丰富,为其遗传多样性分析和遗传图谱构建提供更丰富可靠的标记选择。