哺乳动物细胞无血清培养基研究进展

随着哺乳动物细胞培养种类、规模和应用范围的不断扩大以及安全性能要求的不断提高,无血清培养基的研制已经成为细胞工程领域的重要课题.许多类型的哺乳动物细胞无血清培养基配方得到了研究开发和优化,且有些已经进入第3代无蛋白无血清培养基研制阶段.论文重点概述了无血清培养基在添加因子作用机制、细胞分化条件、细胞和组织移植以及肿瘤治...     

猪蛔虫感染期幼虫抑制消减cDNA文库的构建

为筛选与线虫感染性相关的基因,本研究以猪蛔虫为对象,构建猪蛔虫感染期幼虫差异表达消减cDNA文库,为研究线虫期特异性发育的分子机制奠定基础。分别提取感染期幼虫和其它各期幼虫及成虫的总RNA,纯化mRNA后,采用Clontech公司PCR-selectTM试剂盒进行反转录合成cDNA并进行抑制消减杂交(SSH),构建猪蛔虫感染期幼虫差异表达的消减cDNA文库,并采用Southern斑点杂交进行消减效率的检测。随机从文库中抽取45个克隆进行测序及在线BLAST分析。试验结果表明,感染期幼虫差异表达的消减cDNA文库具有较强的特异性;在得到的41个表达序列标签(ESTs)中,有40个ESTs与已报道的基因有较高的相似性,主要代表猪蛔虫第三期幼虫基因和成虫头部基因,有1个cDNA片段可能代表新基因。猪蛔虫感染期幼虫差异表达消减cDNA文库的成功构建,为进一步研究幼虫发育差异表达基因的功能奠定了基础。     

水貂隐孢子虫病流行病学调查及虫种的初步鉴定

为初步了解水貂隐孢子虫病的流行情况,作者于2005年11月份用饱和蔗糖溶液漂浮法检查了河北省肃宁县某水貂养殖场的469份粪便样品。结果,8份粪便样品为隐孢子虫阳性,总感染率为1.71%(8/469)。其中,白貂感染率为2.15%(5/233)、灰貂感染率为2.08%(1/48)、黑貂感染率为1.06%(2/188)。所查的8份隐孢子虫阳性样品均来自5~6月龄的水貂,表明幼龄水貂容易感染隐孢子虫病而老龄水貂不易感染。另外,8份阳性样品多数来自雄性水貂,显示水貂的隐孢子虫感染可能存在性别的差异性。根据卵囊形态和大小将水貂隐孢子虫初步鉴定为小球隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)。同时,利用所收集的隐孢子虫卵囊进行了小白鼠感染试验,结果表明水貂源隐孢子虫不感染免疫抑制状态下的昆明系小白鼠。     

调节胚胎期代谢提高蛋鸡抗热应激能力

应用维生素E、维生素C及普鲁卡因组合的生理调节剂对蛋鸡胚胎期进行调控，试验分为对照组和3个不同剂量组合的试验组，即试验1组（VE＋VC）、试验2组（VE＋普鲁卡因）、试验3组（VE＋VC＋普鲁卡因），研究不同剂量及组合的胚胎调节剂对出壳后母鸡在热应激条件下生产性能、血液指标和卵泡的变化。试验结果显示：试验1组应激前后平均蛋重分别提高7．50％和9．82％（P〈0．01）；热应激期产蛋率提高5．81％（P〈0．05）。试验2组应激前后产蛋率分别提高了7．45％和9．69％（P〈0．01）。试验1、2、3组总产蛋量在应激前后均有提高，尤其试验1组和2组（P〈0．01）。常温期试验1组胰高血糖素和试验3组T4水平分别提高55．52％和10．03％（P〈0．01）；试验1、2、3组热应激期T4水平分别提高28．65％、132．74％和72．79％（P〈0．05）或（P〈0．01）。试验2组热应激期白蛋白水平和常温期葡萄糖水平分别提高27．36％和31．16％（P〈0．05）；试验3组常温期葡萄糖水平提高25．15％（P〈0．05）。试验2组异嗜性粒细胞和H／L的比值下降，单核细胞数上升（P〈0．05）。试验2组卵泡中大白泡和小白泡的数量显著增多（P〈0．05）。以上结果表明，补充适量的Ve、Vc和普鲁卡因能提高蛋鸡抗热应激能力，改善产蛋性能。     

祁连山中部高山草甸土壤有机碳矿化及其影响因素研究

分析了室内培养土壤温湿度变化对祁连山海拔3500,3600,3700和3800 m处高寒草甸土壤有机碳矿化的影响。结果显示土壤有机碳累积矿化量及其比例为35℃下最高,土壤含水量为30%和40%下比10%和20%下高,0~15 cm土层比15~35 cm土层中高。土壤有机碳矿化速率及其占有机碳含量比例随培养时间延长而递减。土壤有机碳矿化速率及其比例为35℃下最高,土壤含水量为30%和40%下比10%和20%下高,0~15 cm土层比15~35 cm土层中高。一阶动态方程拟合土壤有机碳矿化动态效果较好。5℃下分解率系数和活性有机碳库较低。5℃升高到15℃,Q10为1~6,15℃升高到25℃,Q10为1~2。结果表明祁连山高寒草甸表层土壤有机碳分解受温湿度变化的影响较大。     

高寒草场主要牧草对黄帚橐吾水浸液化感胁迫的生理响应

用不同浓度的黄帚橐吾叶水浸液处理高寒草场4种常见牧草中华羊茅、大雀麦、垂穗披碱草和早熟禾后,测定了受体植物叶片内超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶的活性,及丙二醛、可溶性糖和脯氨酸的含量以及相对电导率等生理指标,旨在探讨受试植物对黄帚橐吾化感作用的生理响应。结果显示,游离脯氨酸的变化在所有处理中均达到显著或极显著差异,且明显的依赖浓度,可能与降低渗透势,保证组织在化感物质胁迫引起水势下降时细胞膨压得以维持有关。其余指标变化不同,反应出不同受体植物对相同化感胁迫的生理响应是不同的。     

广东屠猪肉样品中大肠杆菌耐药性与毒力特征的分析

为分析广东地区屠猪肉中大肠杆菌(E.coli)药物敏感菌株的血清型、毒力基因和系统进化背景,本研究从屠猪肉样品中分离出112株E.coli,采用玻片凝集法鉴定血清型,琼脂稀释法测定10种抗菌药的敏感性,PCR方法检测7种毒力相关基因,多重PCR方法进行系统进化背景判定。结果显示,112株E.coli中,定型菌株95株,分别属于15种血清型,其中O65、O131、O8和O158为优势血清型。几乎所有菌株对氟苯尼考、多西环素和四环素高度耐药,而对头孢曲松高度敏感,其中多重耐药菌株多数耐5种以上药物,常见的多重耐药表型是氟苯尼考/氯霉素/多西环素/四环素/氨苄西林。PCR鉴定结果表明,含有毒力基因的菌株中38%至少具有两个毒力基因,其中EAST1+Stx2e和hlyF+Stx2e比较常见。比较常见的毒力基因为Stx2e和EAST1,STb基因仅在一株菌中检测到。多重PCR鉴定结果显示,屠猪肉样品中E.coli主要分布为共生型的A组和B1组。本研究为大肠杆菌病的控制和合理使用抗生素提供实验依据。     

农村地方母牛冻配改良过程中难产的预防及处理

在牛冻配改良过程中,由于引进冻精的种公牛与本地母牛之间在体格、体重上存在较大差异,以及部分养牛户的饲养管理水平不高,造成本地母牛难产较多,严重地阻碍了牛冻配改良的进展。从2003年开始,我县通过总结经验,找出引起本地母牛难产的原因,采取了一系列综合措施,极大地降低了我县母牛的难产率,增强了农户实行冻配改良的信心,推动了我县肉牛改良工作的发展。现将引起我县母牛难产的原因、采取的预防和处理措施介绍如下,与同行探讨。1本地母牛难产的原因1.1品种选择不当选择的种公牛品种与本地母牛之间在体格、体重上差异较大,胎儿相对较大而…     

有机微量元素对初产母猪生产性能及血液指标的影响

为研究有机微量元素对初产母猪生产性能及血清指标的影响,挑选体重相近、健康的初产怀孕80d的母猪40头,随机分为对照和试验组,每组5个重复,每个重复4头猪。对照组母猪在基础日粮中添加无机微量元素添加剂,试验组母猪从妊娠85d开始,在对照组日粮基础上再补充添加0.15%的有机微量元素添加剂,至泌乳期结束。结果表明:(1)母猪饲料中补充有机微量元素后,可显著提高活仔率、健仔数与健仔率(P0.05);有提高活仔数和断奶重的趋势(P0.05);对产程、总产仔数、初生重无影响。(2)补充有机微量元素显著提高了母猪血清中铁含量(P0.05),也显著提高了母猪和仔猪血清中IgA含量(P0.05)。这表明母猪日粮中添加有机微量元素有利于改善母猪繁殖性能。     

祁连山不同植被类型土壤微生物群落多样性差异

土壤微生物是土壤生态系统的重要组成部分,在生态系统物质循环和能量转化中占有重要的地位。以祁连山中段不同海拔的4种植物群落,即垫状植被(cushion plants,CP)、高寒草甸(alpine meadow,AM)、沼泽化草甸(swamp meadow,SM)和高寒灌丛(alpine shrub,AS)作为实验样地,采用BIOLOG技术,探讨了土壤微生物群落多样性在不用海拔梯度形成的植被条件下的变化特征。结果表明,反映微生物活性的平均颜色变化率(average well color development,AWCD)的大小顺序为:沼泽化草甸高寒草甸高寒灌丛垫状植被,沼泽化草甸土壤微生物群落代谢活性最高;高寒草甸和沼泽化草甸土壤微生物群落碳源利用模式相似,土壤微生物群落的Shannon-Wiener物种丰富度指数(H)与土壤有机碳和全氮显著相关(P0.05),Simpson优势度指数(D)和Mc Intosh指数(U)与土壤全氮显著相关(P0.05);冗余分析表明,土壤有机碳、p H和全氮可能是土壤微生物利用碳源的控制因子。研究结果为进一步探讨高寒草甸与土壤微生物之间的关系奠定了基础。